一种抗菌功能多肽及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种抗菌技术，特别设及一种抗菌功能多肤及其制备方法和应用。 技术背景
[0002] 離病是一种感染性疾病，也是人类最常见的口腔疾病。不加干预的離病会进展为 牙髓病和根尖周病。由于離病发病率高，流行区广，严重影响口腔及全身健康，世界卫生组 织已将其列为人类重点防治的S大非传染性疾病之一，仅次于屯、血管疾病和肿瘤。
[0003] 離病是一种牙体硬组织多因素疾病，微生物、饮食、宿主和时间该四种因素相互作 用导致離病的发生，大量证据已经表明，细菌的存在是離病发生的先决条件。口腔内常见的 致病菌有变异链球菌、放线菌、乳杆菌、粪肠球菌等，该些致病菌在離病及牙髓病、根尖周病 的发生、发展中起着重要作用。防治離病、牙髓病、根尖周病，感染控制是重要的治疗原则。
[0004] 20世纪40年代青霉素的发现使人类几乎可W征服所有的感染类疾病，其对各 种感染性疾病的控制、预防和治疗等方面作出了巨大贡献。但随着"传统抗生素"的广泛和 长期使用、滥用，使得细菌通过各种变异获得耐药性，耐药菌株越来越多，使现用抗生素失 效。抗微生物制剂如洗必泰、四环素等，的确可直接作用于细菌而预防離病，但长期使用易 导致口腔菌群失调，耐药菌出现，牙齿染色等明显的毒副作用。
[0005] 因此，寻找和开发新型不易对细菌产生耐药性的抗菌药物成为了一个热点问题。 但新型合成抗生素药物一方面研究进展缓慢，并且存在抗菌谱窄、应用范围有限和毒性等 问题；另一方面，人类对自身健康和环保问题认识的不断提高，对药物副作用的了解越来越 多，不少合成抗生素被发现有潜在的致癌、致崎和致突变作用，使新型化学合成抗生素的开 发难度越来越大。
[0006] 抗菌肤是广泛存在于自然界动植物体内的一类具有抗菌活性的多肤类物质，由 12-50个氨基酸残基组成，大多数为阳离子抗菌肤，目前已发现的天然抗菌肤已超过2000 种。在面临抗药性和筛选新的抗生素极端困难的情况下，抗菌肤因其独特的生物活性W及 不同于传统抗生素的特殊作用机制引起了人们极大关注，可望成为新一代的抗菌药物。与 传统的抗生素相比，阳离子抗菌肤具有分子量低、抗菌谱广、毒副作用较低、热稳定性好、 抗菌机理独特、无耐药性等优点，有望克服当前抗菌药物的耐药性强、毒副作用大等系列难 题。
[0007] 但天然抗菌肤的短板是分子量较大，提纯或生产成本高，长链多肤在体内药物代 谢过程中易被干扰，在临床应用上受到一定限制。因此，研发和人工合成小分子抗菌肤具有 重要的意义。
【发明内容】
[0008] 针对上述问题，本发明通过对天然抗菌肤进行深入研究、总结其抗菌原理和机制 并通过严密的科学推理，创新性的构建了一种可有效杀菌的多肤。
[0009] 本发明通过W下技术方案来实现： 一种抗菌功能多肤，包含如SEQIDNO. 1所示的氨基酸序列。该种多肤分子量小，结构 稳定且简单。杀菌效果好，范围广。
[0010] 进一步的，所述多肤的C端经过酷胺化修饰。C端酷胺化能使抗菌肤的抗菌活性更 为广谱。
[0011] 进一步的，所述多肤具有a螺旋结构。所述多肤通过对特定种类氨基酸的特定排 列W形成a螺旋结构，螺旋结构接触并作用于细菌细胞壁，造成细胞壁穿孔，细菌死亡，从 而起到抗菌作用。所述序列中的两亲性氨基酸和疏水氨基酸通过排列让其分别位于a-螺 旋结构的不同区域，形与成水和脂类物质都有具有亲和力的结构，该种两亲性结构是抗菌 肤发挥抗菌作用的基础，改变其螺旋度会影响抗菌肤的活性。
[0012] 本发明还提供一种上述抗菌功能多肤的制备方法，包括W下步骤：按照SEQID NO. 1所示的氨基酸序列，用Fmoc保护第一个氨基酸的氨基，然后将被Fmoc保护的氨基酸连 接到固相载体Wang树脂上，然后脱掉氨基保护基；然后将氨基被Fmoc保护的第二个氨基酸 在缩合剂的活化作用下与已连接在固相载体的第一个氨基酸的氨基反应形成肤键；重复上 述肤键形成反应，使肤链从C端向N端生长，直至最后一个氨基酸接入；切割得到目标多肤。
[0013] 作为可选方式，在上述制备方法中，先将第一个氨基酷胺化，再用Fmoc保护其氨 基并进行后续步骤。
[0014] 作为可选方式，在上述制备方法中，在所述肤键形成反应中采用皿TU作为缩合 剂，采用NMM作为活化剂。
[0015] 作为可选方式，在上述制备方法中，所述切割具体为；用TFA切割液裂解，去除树 脂和氨基酸保护基团 本发明还提供了一种抗菌药物或药物组合物或药物制剂，其特征在于，包含上述的抗 菌功能多肤或其药学上可接受的盐或醋。进一步的，还可W包括药学上可接受的载体和/ 或辅料。
[0016] 本发明还提供了一种上述抗菌功能多肤的应用，其特征在于，将所述抗菌功能多 肤或其药学上可接受的盐或醋用于制备抗菌药物。
[0017] 本说明书中公开的所有特征，或公开的所有方法或过程中的步骤，除了互相排斥 的特征和/或步骤W外，均可任何方式组合。
[0018] 本发明的有益效果： 本发明所述抗菌功能多肤具有高效抗菌作用，可在正常浓度、短时间内杀灭口腔内常 见致病菌，且对体外人牙銀成纤维细胞几乎无毒性，而且多肤分子量小，结构稳定且简单。 杀菌效果好，范围广靠。
[0019] 该抗菌肤合成方便，成本较低，效果较好且安全可靠。且蛋白质类抗菌药物可W有 效降低细菌耐药性的发生，在代替抗生素成为主流抗菌药物方向上有巨大潜力。
[0020]
【附图说明】： 图1为实施例3中所述圆二色光谱分析结果图。
[002。 图2为实施例5中所述杀菌曲线的部分测定结果图，其中，5：邸/fans、公；S. mitis、C: S. gordo打ii、D: S. salivarius、E: S. sanguis、F: S. sobri打us。
[0022] 图3为实施例5中所述杀菌曲线的另一部分测定结果图，其中於乂 出i、 H: A. viscosus、I: L. acidophilus、J: L. casei、K: L. ferme打tatae。
[0023] 图4为实施例6中所述杀菌实验的沈M照片，其中（A,B)为Streptococcus mutans, (C,D)为S.mitis，(E,F