检测呼吸道感染相关病原微生物的系统及其专用lamp引物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物技术领域中检测呼吸道感染相关病原微生物的系统及其专用 LAMP引物。
【背景技术】
[0002] 肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、肺炎 克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、流感嗜血杆菌、嗜肺军团菌、 结核分枝杆菌复合群、肺炎支原体和肺炎衣原体这十三种病原菌是呼吸道感染的常见病原 菌。呼吸道感染是我国临床上最常见的疾病之一，重症肺炎若不能及时、正确用药，容易危 及生命。然而，临床常规的生化指标分析无法对患者所感染的病原菌种做出准确鉴定，大多 数临床治疗仍处于经验用药阶段，在使用高级抗生素方面存在较大的盲目性。目前临床上 流行使用的相对比较科学地鉴定病原菌的方法主要是依靠细菌培养检测法，但是细菌培养 检测法存在较大的缺陷：检测时间长（一般两天左右）、准确率低（假阴性率和假阳性率都 较高）、难以检测出难培养的病原体等。
[0003]环介导等温扩增法（loop-mediatedisothermalamplification,LAMP)是利用一 种具有链置换活性和瀑布式核酸扩增功能的BstDNA聚合酶，在等温条件下进行核酸的变 性和自动循环的链置换核酸扩增反应。LAMP针对靶序列的6个区域设计4条特异引物，利 用具备链置换功能的DNA聚合酶在恒定温度下不断复制扩增DNA。为了提高反应效率，可在 反应体系中添加两条环引物，使之分别与茎环结构结合，启动链置换合成，循环复制。
[0004]LAMP具有简便、快速、灵敏、特异的优势，尤其适合在基层开展LAMP试剂盒的应用 推广。LAMP技术中，引物是决定检测结果灵敏度和特异性的关键因素。
【发明内容】
[0005] 本发明所要解决的技术问题是如何检测呼吸道感染相关病原微生物的种类。
[0006] 本发明首先提供了检测呼吸道感染相关病原微生物的系统及其专用LAMP引物。
[0007] 本发明所提供的检测呼吸道感染相关病原微生物的环介导等温扩增的成套引物， 为下述十三个引物组中的十三组、任十二组、任十一组、任十组、任九组、任八组、任七组、任 六组、任五组、任四组、任三组、任两组或任一组：用于检测肺炎链球菌的引物组、用于检测 金黄色葡萄球菌的引物组、用于检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的引物组、用于检测大肠 埃希氏菌的引物组、用于检测肺炎克雷伯菌的引物组、用于检测铜绿假单胞菌的引物组、用 于检测鲍曼不动杆菌的引物组、用于检测嗜麦芽窄食单胞菌的引物组、用于检测流感嗜血 杆菌的引物组、用于检测嗜肺军团菌的引物组、用于检测结核分枝杆菌复合群的引物组、用 于检测肺炎支原体的引物组和用于检测肺炎衣原体的引物组；所述用于检测肺炎链球菌的 弓丨物组为肺炎链球菌正义6引物组、肺炎链球菌反义6引物组、肺炎链球菌正义4引物组或 肺炎链球菌反义4引物组。
[0008] 本发明提供的成套引物中所述肺炎链球菌正义6引物组由肺炎链球菌引物F3-Z、 肺炎链球菌引物B3-Z、肺炎链球菌引物FIP-Z、肺炎链球菌引物BIP-Z、肺炎链球菌引物 LF-Z和肺炎链球菌引物LB-Z这6条引物组成；所述肺炎链球菌反义6引物组由肺炎链球 菌引物F3-F、肺炎链球菌引物B3-F、肺炎链球菌引物FIP-F、肺炎链球菌引物BIP-F、肺炎链 球菌引物LF-F和肺炎链球菌引物LB-F这6条引物组成；所述肺炎链球菌正义4引物组由 所述肺炎链球菌引物F3-Z、所述肺炎链球菌引物B3-Z、所述肺炎链球菌引物FIP-Z和所述 肺炎链球菌引物BIP-Z这4条引物组成；所述肺炎链球菌反义4引物组由所述肺炎链球菌 引物F3-F、所述肺炎链球菌引物B3-F、所述肺炎链球菌引物FIP-F和所述肺炎链球菌引物 BIP-F这4条引物组成。
[0009] 本发明提供的成套引物中所述肺炎链球菌引物F3-Z是如下al)至a2)中的任一 种单链DNA:
[0010]al)SEQIDNo. 1的第6-25位核苷酸的单链DNA;
[0011]a2)与al)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0012] 本发明提供的成套引物中所述肺炎链球菌引物B3-Z是如下a4)至a5)中的任一 种单链DNA:
[0013]a4)SEQIDNo. 1的第213-229位核苷酸的反向互补单链DNA;
[0014]a5)与a4)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0015] 本发明提供的成套引物中所述肺炎链球菌引物FIP-Z是如下a7)至a8)中的任一 种单链DNA:
[0016]a7)结构为A-linker-B的单链DNA，所述A是SEQIDNo. 1的第79-100位核苷酸 组成的单链DNA的反向互补单链DNA;所述linker是长度为0-10个核苷酸的单链DNA，所 述B是SEQIDNo. 1的第39-55位核苷酸组成的单链DNA;
[0017]a8)与a7)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0018] 本发明提供的成套引物中所述肺炎链球菌引物BIP-Z是如下alO)至all)中的任 一种单链DNA:
[0019]alO)结构为A-linker-B的单链DNA，所述A是SEQIDNo. 1的第101-124位核苷 酸组成的单链DNA;所述linker是长度为0-10个核苷酸的单链DNA，所述B是SEQIDNo. 1 的第166-185位核苷酸组成的单链DNA的反向互补单链DNA;
[0020] all)与alO)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0021] 本发明提供的成套引物中所述肺炎链球菌引物LF-Z是如下al3)至al4)中的任 一种单链DNA:
[0022] al3)SEQIDNo. 1的第56-77位核苷酸的反向互补单链DNA;
[0023]al4)与al3)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0024] 本发明提供的成套引物中所述肺炎链球菌引物LB-Z是如下al6)至al7)中的任 一种单链DNA:
[0025]al6)SEQIDNo. 1的第126-146位核苷酸的单链DNA片段；
[0026]al7)与al6)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0027] 本发明提供的成套引物中所述肺炎链球菌引物F3-F是所述肺炎链球菌引物F3-Z 的反义DNA;所述肺炎链球菌引物B3-F是所述肺炎链球菌引物B3-Z的反义DNA;所述肺炎 链球菌引物FIP-F是所述肺炎链球菌引物FIP-Z的反义DNA;所述肺炎链球菌引物BIP-F是 所述肺炎链球菌引物BIP-Z的反义DNA;所述肺炎链球菌引物LF-F是所述肺炎链球菌引物 LF-Z的反义DNA;所述肺炎链球菌引物LB-F是所述肺炎链球菌引物LB-Z的反义DNA。
[0028] 本发明提供的成套引物中所述用于检测金黄色葡萄球菌的引物组为金黄色葡萄 球菌正义6引物组、金黄色葡萄球菌反义6引物组、金黄色葡萄球菌正义4引物组或金黄色 葡萄球菌反义4引物组；所述金黄色葡萄球菌正义6引物组由金黄色葡萄球菌引物F3-Z、 金黄色葡萄球菌引物B3-Z、金黄色葡萄球菌引物FIP-Z、金黄色葡萄球菌引物BIP-Z、金黄 色葡萄球菌引物LF-Z和金黄色葡萄球菌引物LB-Z这6条引物组成；所述金黄色葡萄球 菌反义6引物组由金黄色葡萄球菌引物F3-F、金黄色葡萄球菌引物B3-F、金黄色葡萄球菌 引物FIP-F、金黄色葡萄球菌引物BIP-F、金黄色葡萄球菌引物LF-F和金黄色葡萄球菌引 物LB-F这6条引物组成；所述金黄色葡萄球菌正义4引物组由所述金黄色葡萄球菌引物 F3-Z、所述金黄色葡萄球菌引物B3-Z、所述金黄色葡萄球菌引物FIP-Z和所述金黄色葡萄 球菌引物BIP-Z这4条引物组成；所述金黄色葡萄球菌反义4引物组由所述金黄色葡萄球 菌引物F3-F、所述金黄色葡萄球菌引物B3-F、所述金黄色葡萄球菌引物FIP-F和所述金黄 色葡萄球菌引物BIP-F这4条引物组成。
[0029] 本发明提供的成套引物中所述金黄色葡萄球菌引物F3-Z是如下bl)至b2)中的 任一种单链DNA:
[0030]bl)SEQIDNo. 2的第11-30位核苷酸的单链DNA;
[0031]b2)与bl)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0032] 本发明提供的成套引物中所述金黄色葡萄球菌引物B3-Z是如下b4)至b5)中的 任一种单链DNA:
[0033]b4)SEQIDNo. 2的第222-243位核苷酸的反向互补单链DNA;
[0034]b5)与b4)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0035] 本发明提供的成套引物中所述金黄色葡萄球菌引物FIP-Z是如下b7)至b8)中的 任一种单链DNA:
[0036]b7)结构为A-linker-B的单链DNA，所述A是SEQIDNo. 2的第72-95位核苷酸 组成的单链DNA的反向互补单链DNA;所述linker是长度为0-10个核苷酸的单链DNA，所 述B是SEQIDNo. 2的第31-50位核苷酸组成的单链DNA;
[0037]b8)与b7)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0038] 本发明提供的成套引物中所述金黄色葡萄球菌引物BIP-Z是如下blO)至bll)中 的任一种单链DNA:
[0039]blO)结构为A-linker-B的单链DNA，所述A是SEQIDNo. 2的第127-149位核苷 酸组成的单链DNA;所述linker是长度为0-10个核苷酸的单链DNA，所述B是SEQIDNo. 2 的第196-212位核苷酸组成的单链DNA的反向互补单链DNA;
[0040] bll)与bio)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0041] 本发明提供的成套引物中所述金黄色葡萄球菌引物LF-Z是如下bl3)至bl4)中 的任一种单链DNA:
[0042]bl3)SEQIDNo. 2的第54-71位核苷酸的反向互补单链DNA;
[0043]bl4)与bl3)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0044] 本发明提供的成套引物中所述金黄色葡萄球菌引物LB-Z是如下bl6)至bl7)中 的任一种单链DNA:
[0045]bl6)SEQIDNo. 2的第157-178位核苷酸的单链DNA片段；
[0046]bl7)与bl6)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0047] 本发明提供的成套引物中所述金黄色葡萄球菌引物F3-F是所述金黄色葡萄球菌 引物F3-Z的反义DNA;所述金黄色葡萄球菌引物B3-F是所述金黄色葡萄球菌引物B3-Z的 反义DNA;所述金黄色葡萄球菌引物FIP-F是所述金黄色葡萄球菌引物FIP-Z的反义DNA; 所述金黄色葡萄球菌引物BIP-F是所述金黄色葡萄球菌引物BIP-Z的反义DNA;所述金黄 色葡萄球菌引物LF-F是所述金黄色葡萄球菌引物LF-Z的反义DNA;所述金黄色葡萄球菌 引物LB-F是所述金黄色葡萄球菌引物LB-Z的反义DNA。
[0048] 本发明提供的成套引物中所述用于检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的引物组为 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌正义6引物组、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌反义6引物组、耐甲 氧西林金黄色葡萄球菌正义4引物组或耐甲氧西林金黄色葡萄球菌反义4引物组；所述耐 甲氧西林金黄色葡萄球菌正义6引物组由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物F3-Z、耐甲氧西 林金黄色葡萄球菌引物B3-Z、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物FIP-Z、耐甲氧西林金黄色 葡萄球菌引物BIP-Z、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物LF-Z和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 引物LB-Z这6条引物组成；所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌反义6引物组由耐甲氧西林 金黄色葡萄球菌引物F3-F、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物B3-F、耐甲氧西林金黄色葡萄 球菌引物FIP-F、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物BIP-F、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物 LF-F和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物LB-F这6条引物组成；所述耐甲氧西林金黄色葡 萄球菌正义4引物组由所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物F3-Z、所述耐甲氧西林金黄色 葡萄球菌引物B3-Z、所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物FIP-Z和所述耐甲氧西林金黄色 葡萄球菌引物BIP-Z这4条引物组成；所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌反义4引物组由所 述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物F3-F、所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物B3-F、所述 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物FIP-F和所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物BIP-F这4 条引物组成。
[0049] 本发明提供的成套引物中所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物F3-Z是如下cl) 至c2)中的任一种单链DNA:
[0050]cl)SEQIDNo. 3的第12-30位核苷酸的单链DNA;
[0051]c2)与cl)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0052] 本发明提供的成套引物中所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物B3-Z是如下c4) 至c5)中的任一种单链DNA:
[0053]c4)SEQIDNo. 3的第211-234位核苷酸的反向互补单链DNA;
[0054]c5)与c4)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0055] 本发明提供的成套引物中所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物FIP-Z是如下c7) 至c8)中的任一种单链DNA:
[0056]c7)结构为A-linker-B的单链DNA，所述A是SEQIDNo. 3的第97-121位核苷酸 组成的单链DNA的反向互补单链DNA;所述linker是长度为0-10个核苷酸的单链DNA，所 述B是SEQIDNo. 3的第47-71位核苷酸组成的单链DNA;
[0057]c8)与c7)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0058] 本发明提供的成套引物中所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物BIP-Z是如下 clO)至ell)中的任一种单链DNA:
[0059] clO)结构为A-linker-B的单链DNA，所述A是SEQIDNo. 3的第133-156位核苷 酸组成的单链DNA;所述linker是长度为0-10个核苷酸的单链DNA，所述B是SEQIDNo. 3 的第182-206位核苷酸组成的单链DNA的反向互补单链DNA;
[0060]cl1)与ClO)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0061] 本发明提供的成套引物中所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物LF-Z是如下cl3) 至c14)中的任一种单链DNA:
[0062]cl3)SEQIDNo. 3的第72-95位核苷酸的反向互补单链DNA片段，该单链DNA片段 名称为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物LF-Z1 ;
[0063]cl4)与cl3)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0064] 本发明提供的成套引物中所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物LB-Z是如下cl6) 至cl7)中的任一种单链DNA:
[0065]cl6)SEQIDNo. 3 的第 157-181 位核苷酸的单链DNA;
[0066]cl7)与cl6)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0067] 本发明提供的成套引物中所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物F3-F是所述耐甲 氧西林金黄色葡萄球菌引物F3-Z的反义DNA;所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物B3-F 是所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物B3-Z的反义DNA;所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 引物FIP-F是所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物FIP-Z的反义DNA;所述耐甲氧西林金 黄色葡萄球菌引物BIP-F是所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物BIP-Z的反义DNA;所述 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物LF-F是所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物LF-Z的反 义DNA;所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物LB-F是所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引物 LB-Z的反义DNA。
[0068] 本发明提供的成套引物中所述用于检测大肠埃希氏菌的引物组为大肠埃希氏菌 正义6引物组、大肠埃希氏菌反义6引物组、大肠埃希氏菌正义4引物组或大肠埃希氏菌反 义4引物组；所述大肠埃希氏菌正义6引物组由大肠埃希氏菌引物F3-Z、大肠埃希氏菌引 物B3-Z、大肠埃希氏菌引物FIP-Z、大肠埃希氏菌引物BIP-Z、大肠埃希氏菌引物LF-Z和大 肠埃希氏菌引物LB-Z这6条引物组成；所述大肠埃希氏菌反义6引物组由大肠埃希氏菌 引物F3-F、大肠埃希氏菌引物B3-F、大肠埃希氏菌引物FIP-F、大肠埃希氏菌引物BIP-F、大 肠埃希氏菌引物LF-F和大肠埃希氏菌引物LB-F这6条引物组成；所述大肠埃希氏菌正义 4引物组由所述大肠埃希氏菌引物F3-Z、所述大肠埃希氏菌引物B3-Z、所述大肠埃希氏菌 引物FIP-Z和所述大肠埃希氏菌引物BIP-Z这4条引物组成；所述大肠埃希氏菌反义4引 物组由所述大肠埃希氏菌引物F3-F、所述大肠埃希氏菌引物B3-F、所述大肠埃希氏菌引物 FIP-F和所述大肠埃希氏菌引物BIP-F这4条引物组成。
[0069] 本发明提供的成套引物中所述大肠埃希氏菌引物F3-Z是如下dl)至d2)中的任 一种单链DNA:
[0070]dl)SEQIDNo. 4的第11-30位核苷酸的单链DNA;
[0071]d2)与dl)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0072] 本发明提供的成套引物中所述大肠埃希氏菌引物B3-Z是如下d4)至d5)中的任 一种单链DNA:
[0073]d4)SEQIDNo. 4的第200-219位核苷酸的反向互补单链DNA;
[0074]d5)与d4)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0075] 本发明提供的成套引物中所述大肠埃希氏菌引物FIP-Z是如下d7)至d8)中的任 一种单链DNA:
[0076]d7)结构为A-linker-B的单链DNA，所述A是SEQIDNo. 4的第77-96位核苷酸 组成的单链DNA的反向互补单链DNA;所述linker是长度为0-10个核苷酸的单链DNA，所 述B是SEQIDNo. 4的第38-55位核苷酸组成的单链DNA;
[0077]d8)与d7)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0078] 本发明提供的成套引物中所述大肠埃希氏菌引物BIP-Z是如下dlO)至dll)中的 任一种单链DNA:
[0079]dlO)结构为A-linker-B的单链DNA，所述A是SEQIDNo. 4的第101-122位核苷 酸组成的单链DNA;所述linker是长度为0-10个核苷酸的单链DNA，所述B是SEQIDNo. 4 的第163-183位核苷酸组成的单链DNA的反向互补单链DNA;
[0080] dll)与dlO)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0081] 本发明提供的成套引物中所述大肠埃希氏菌引物LF-Z是如下dl3)至dl4)中的 任一种单链DNA:
[0082]dl3)SEQIDNo. 4的第56-76位核苷酸的反向互补单链DNA片段；
[0083]dl4)与dl3)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0084] 本发明提供的成套引物中所述大肠埃希氏菌引物LB-Z是如下dl6)至dl7)中的 任一种单链DNA:
[0085]dl6)SEQIDNo. 4 的第 137-154 位核苷酸的单链DNA ;
[0086]dl7)与dl6)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0087] 本发明提供的成套引物中所述大肠埃希氏菌引物F3-F是所述大肠埃希氏菌引物 F3-Z的反义DNA;所述大肠埃希氏菌引物B3-F是所述大肠埃希氏菌引物B3-Z的反义DNA; 所述大肠埃希氏菌引物FIP-F是所述大肠埃希氏菌引物FIP-Z的反义DNA;所述大肠埃希 氏菌引物BIP-F是所述大肠埃希氏菌引物BIP-Z的反义DNA;所述大肠埃希氏菌引物LF-F 是所述大肠埃希氏菌引物LF-Z的反义DNA;所述大肠埃希氏菌引物LB-F是所述大肠埃希 氏菌引物LB-Z的反义DNA。
[0088] 本发明提供的成套引物中所述用于检测肺炎克雷伯菌的引物组为肺炎克雷伯菌 正义6引物组、肺炎克雷伯菌反义6引物组、肺炎克雷伯菌正义4引物组或肺炎克雷伯菌反 义4引物组；所述肺炎克雷伯菌正义6引物组由肺炎克雷伯菌引物F3-Z、肺炎克雷伯菌引 物B3-Z、肺炎克雷伯菌引物FIP-Z、肺炎克雷伯菌引物BIP-Z、肺炎克雷伯菌引物LF-Z和肺 炎克雷伯菌引物LB-Z这6条引物组成；所述肺炎克雷伯菌反义6引物组由肺炎克雷伯菌 引物F3-F、肺炎克雷伯菌引物B3-F、肺炎克雷伯菌引物FIP-F、肺炎克雷伯菌引物BIP-F、肺 炎克雷伯菌引物LF-F和肺炎克雷伯菌引物LB-F这6条引物组成；所述肺炎克雷伯菌正义 4引物组由所述肺炎克雷伯菌引物F3-Z、所述肺炎克雷伯菌引物B3-Z、所述肺炎克雷伯菌 引物FIP-Z和所述肺炎克雷伯菌引物BIP-Z这4条引物组成；所述肺炎克雷伯菌反义4引 物组由所述肺炎克雷伯菌引物F3-F、所述肺炎克雷伯菌引物B3-F、所述肺炎克雷伯菌引物FIP-F和所述肺炎克雷伯菌引物BIP-F这4条引物组成。
[0089] 本发明提供的成套引物中所述肺炎克雷伯菌引物F3-Z是如下el)至e2)中的任 一种单链DNA:
[0090]el)SEQIDNo. 5的第14-30位核苷酸的单链DNA;
[0091]e2)与el)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0092] 本发明提供的成套引物中所述肺炎克雷伯菌引物B3-Z是如下e4)至e5)中的任 一种单链DNA:
[0093]e4)SEQIDNo. 5的第186-203位核苷酸的反向互补单链DNA;
[0094]e5)与e4)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0095] 本发明提供的成套引物中所述肺炎克雷伯菌引物FIP-Z是如下e7)至e8)中的任 一种单链DNA:
[0096]e7)结构为A-linker-B的单链DNA，所述A是SEQIDNo. 5的第90-108位核苷酸 组成的单链DNA的反向互补单链DNA;所述linker是长度为0-10个核苷酸的单链DNA，所 述B是SEQIDNo. 5的第38-54位核苷酸组成的单链DNA;
[0097]e8)与e7)限定的单链DNA片段具有85%以上的同一性的单链DNA片段。
[0098] 本发明提供的成套引物中所述肺炎克雷伯菌引物BIP-Z是如下elO)至ell)中的 任一种单链DNA:
[0099]e10)结构为A-linker-B的单链DNA，所述A是SEQIDNo. 5的第118-140位核苷 酸组成的单链DNA;所述linker是长度为0-10个核苷酸的单链DNA，所述B是SEQIDNo. 5 的第168-185位核苷酸组成的单链DNA的反向互补单链DNA;
[0100]ell)与elO