三磷酸腺苷二钠的制备工艺的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物制剂技术领域，具体涉及三磷酸腺苷二钠的制备工艺。
【背景技术】
[0002]三磷酸腺苷二钠，化学名:腺嘌呤核苷一 5’ 一三磷酸酯二钠盐三水合物，分子式:C10H14N5Na2O13P3.3H20，分子量:605.19，是核苷酸衍生物，参与体内脂肪、蛋白质、糖、核酸以及核苷酸的代谢。当体内吸收、分泌、肌肉收缩及进行生化合成反应等需要能量时，三磷酸腺苷即分解成二磷酸腺苷及磷酸基，同时释放出能量。三磷酸腺苷二钠能够穿透血-脑脊液屏障，能提高神经细胞膜性结构的稳定性和重建能力、促进神经突起的再生长。三磷酸腺苷二钠是辅酶类药物，临床用于因组织损伤、细胞酶活力下降所致的各种疾病。如心力衰竭，心肌炎、心肌梗塞、脑动脉硬化、冠状动脉硬化、进行性肌萎缩、脑出血后遗症、急慢性肝炎、肝硬化和听力障碍等，还用于进行性肌萎缩、脑溢血后遗症、心功能不全、心肌疾病及肝炎等治疗。
[0003]中国专利CN200710019776.8，公开了一种三鱗酸腺苷二钠的生产方法，包括下列步骤:(1)先加自来水于反应锅中，同时开动搅拌，用夹套加热至43-45?，然后投放蔗糖、葡萄糖、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾，使其溶解，停止加热，用循环水降温，当温度降至40-42?以下时，投放速冻酵母泥，并用夹套加热缓慢升温；(2)用二倍于硫酸镁体积的自来水溶解硫酸镁，另外用水:腺苷液=12:1的比例先将自来水加热至80°C，将腺苷溶解；(3)当反应锅内温度至25±1°C时，依次投放硫酸镁、腺苷液，并将反应料液加热至38-40°C，停止加热，保温2h，此时开始取样测定腺苷的转达化率，当反应达到三磷酸腺苷二钠一条带时，反应结束；(4)灭活、调酸碱，反应结束立即放掉夹套中热水，一边通冷却水降温，一边投放冰于反应锅中，降温至6-8°C时停止加冰，用磷酸调节pH3.0-4.0，静置I小时后，再调节PH6.5-7.5，再静置30分钟后开始压榨，当反应液压榨结束后，再用纯化水顶洗滤饼，30分钟后，取水顶液检测，当三磷酸腺苷二钠浓度< 0.1%时即停止水顶，然后将水顶液与压榨液混匀，检验三磷酸腺苷二钠浓度0.5-1%、透光度多90%方为合格，将混合液送分离工段处理；(5)树脂分离:上样:将上述混合液加纯净水稀释至0.3-0.5%上树脂柱，上样8小时后每2小时检测流出液中ATP浓度，当上样流出液中ATP ^ 0.1 %时停止上样，改水顶，2小时后再进行上样，直到上样结束；水洗杂质:上样结束，用纯化水正进洗涤至流出液A257S 0.5 ;然后反进水洗至树脂上层无混浊机械杂质且流出液A 257S 0.5结束；稀盐洗杂质:水洗结束，用0.05%稀氯化钠溶液反进流洗，每2小时取样，测流出液中ATP浓度，当流出液中ATP浓度多0.1 %时，反进流洗杂质结束，改正进，每2小时取样，测流出液中ATP浓度，若浓度多0.5%时，开始洗脱；洗脱:当液位降至树脂上沿20cm处时，用2%浓盐液进行洗脱，收集洗脱液，结束后送至脱色；(6)脱色:洗脱液先用二十万分子量的中空纤维超滤膜进行第一次超滤去蛋白，再添加活性炭，搅拌30分钟以上后静置30分钟，然后将脱色液送至精密过滤器超滤除热原；(7)超滤、结晶:超滤:将脱色液再用纳膜式超滤器进行第二次超滤除热原，再送去:结晶；结晶:超滤液先用3N盐酸调节pH至5.0,然后用夹套热水升温至30-32°C，同时开始搅拌，温度达到32°C，开始加入95%乙醇，并保持温度30_32°C，当锅内出现白色混独时，停止加乙醇，继续搅拌半小时，然后开夹套冷却，将料液冷却至室温；离心结晶液，湿品先用乙醇淋洗，再用无水乙醇浸泡，最后离心30分钟甩干，将湿品放入湿品存入室中，母液送蒸馏回收岗位进行回收；将湿品均匀地铺入盘中，放入烘箱内，真空干燥温度控制在38-42°C，16小时后取出将其捣碎，而后每5小时翻料I次，待湿品烘至40小时后，取样品送分析室测快速失重，当快速失重〈5%，即可出料；将干品放入干品存放室中保存，得产品。
[0004]现有技术中，例如ATP等药品一般是按照国家食品要监督管理局或者药典等指导文件建议的工艺步骤进行生产，如果药品生产企业对已经拿到批文的产品变更生产工艺，需要重新报批，会增加人力物力成本。因此，既然有指导文件的建议，药品生产厂家一般不会随意变更生产工艺。但是随着时代的发展，技术的进步，以及环保节能的要求，对现有技术的改进也在不断进行当中，每一次改进都是对现有技术的不断完善，相应的也是在节约成本。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是为了解决现有技术的不足，提供三磷酸腺苷二钠的制备工艺。
[0006]本发明所述三磷酸腺苷二钠的制备工艺，包括如下步骤:
[0007]I)生化反应
[0008](I)氯化镁溶液、腺苷溶液、苯扎溴铵溶液的制备:
[0009]①用少量反渗透水溶解氯化镁制成氯化镁溶液；
[0010]②用适量室温的反渗透水溶解腺苷制成腺苷溶液；
[0011]③用适量的反渗透水溶解苯扎溴铵稀释成5%苯扎溴铵溶液；
[0012](2)投放速冻酵母:加反渗透水于反应锅中，开动搅拌用夹套热水加热至40-450C，投放蔗糖及磷酸二氢钾和磷酸氢二钾，使其溶解，待其全部溶解后，停止加热，开循环水降温，当温度降至40°C以下时，投放速冻酵母，并用夹套热水缓慢升温；
[0013](3) ATP生化反应:当反应锅内温度升至20°C ± I时，依次投放氯化镁溶液、苯扎溴铵溶液、腺苷溶液，反应开始计时，将反应液继续加热至36-39°C，保温，待有气泡溢出，开始取样测定ATP转化率，当反应达到ATP —条带时，反应结束；
[0014](4)灭活、调酸碱:反应结束，立即放掉夹套热水，迅速投放大量冰于反应锅内，并通冷却水降温，当温度降至4°C以下，用磷酸调pH至2.5-3.0，I小时后，再用液碱调pH至5.5-6.0，调好碱后30分钟开始压榨，压榨完毕，再用反渗透水顶洗滤饼，水顶液合并压榨液，检验含量、透光度，合格送分离工段处理；
[0015]2)树脂分离
[0016](I)串柱上样:将压榨液及水顶液稀释至0.2-0.45%，上D296树脂柱，流速为4-6L/min，定时检测流出液，查看是否有ATP漏出；当流出液中ATP浓度多0.03%时，停止上样，用反渗透水正顶至流出液ATP浓度< 0.01 %后，继续上样，如此反复直至上样结束；
[0017](2)水洗杂质:串柱上样结束，用反渗透水正进洗涤至流出液A257miS 0.2 ;然后反进水洗至树脂上层无浑浊机械杂质且流出液A257nmS 0.2后结束；流速控制在4-6L/min ；
[0018](3)稀盐洗杂质:水洗结束，用 ρΗ2.0-2.2 的 0.04mol/LNaCl—0.01mol/L HCl 稀盐液反进流洗，流速为6-10L/min ;每小时取样，测流出液中ATP浓度，当流出液中ATP浓度^ 0.03%时，反进洗杂质结束；改正进，正进流速不变，每小时取样一次，测流出液中ATP的浓度，当流出液中ATP浓度多0.025 %时，每半小时取样一次监测；当流出液pH跳至2-4，且ADP基本洗尽或只有ATP时，洗涤结束，开始洗脱；
[0019](4)洗脱:用 ρΗ3.5-3.8 的 lmol/LnaCl-0.01mol/L HCl 浓盐液进行洗脱，当洗脱流出液ATP浓度>0.38%时，收集洗脱液，送脱色；当洗脱流出液ATP浓度〈0.38%时，即停止收集；
[0020]3)精制
[0021](I)脱色:洗脱液根据色泽加入0.1-0.5%活性炭和0.1-0.3%硅藻土搅拌I小时脱色，离心分离过滤后，脱色液经检验合格后送超滤除蛋白；
[0022](2)超滤:将脱色液用〈I万分子量的超滤膜进行超滤除蛋白，合格后送去结晶；
[0023](3)结晶:超滤液先用CP级HCl调pH至2.5-3.3，再用> I万分子量的超滤膜进行超滤除蛋白，合格后放入结晶釜，开动搅拌，开始加入95% (v/v)乙醇，出现白色混浊前酒精加入速度控制在100L/h ;出现白色混浊时，停止加酒精，搅拌半小时，然后继续加酒精