来代替上述因子的方法（Miyoshi N et al.，Cell Stem Cells 8,633-638(2011))也是公知的。
[0081] 作为用于将初始化因子导入MAIT细胞的方法，还有将上述因子以蛋白质的形式 导入的方法，但优选以编码其的核酸〇)NA、RNA、DNA/RNA嵌合体）的形态使用。该核酸（优 选cDNA)插入能够在作为宿主的MAIT细胞中发挥功能的质粒载体或病毒载体中来构建表 达载体，被供至核初始化工序。
[0082] 作为表达载体，只要在MAIT细胞中能够对初始化因子基因进行有效的转录和表 达，并诱导之后的初始化（iPS细胞化）即可，作为本发明中优选的示例，可以举出仙台病毒 载体（SeV)。仙台病毒是具有单链的非分段负链RNA作为基因组的病毒，在细胞生物学领域 中被广泛利用。仙台病毒载体能够将基因导入许多哺乳动物的细胞或组织中，载体基因组 以RNA的状态停留于细胞质中，因此具有不会对宿主染色体产生影响的优点。用于构建仙 台病毒载体的试剂盒制品有市售，本领域技术人员可以适当获得。
[0083] -般而言，作为使用病毒载体将基因有效地导入培养体系的方法，除了腺病毒外， 还广泛已知使用逆转录病毒的方法。本发明人等进行了研宄，结果发现，通过在使用MAIT 细胞的本发明中使用仙台病毒载体，能够极其有效地将MAIT细胞初始化从而得到iPS细 胞，进而不发生基因组改变，因此可以得到在安全性方面也优异的iPS细胞。
[0084] 另外，为了导入多个初始化因子，通常制作在个别的载体中插入有1个或多个基 因的载体，对这些多种载体同时进行处理，更优选使用将多个初始化基因搭载于1个载体 中从而能够表达所有基因的载体。此处，"多个初始化因子"是指，从上述0ct3/4基因、Klf 家族基因、Myc家族基因及Sox家族基因这4种因子中选择的至少2种以上的因子，优选 为0ct3/4基因、Klf家族基因及Sox家族基因这3种因子，进一步优选全部4种因子。能 够同时表达这样的多种初始化基因的仙台病毒载体是公知的，例如有如下报道：在仙台病 毒载体中从转录开始位置起以c-Myc - Klf4 - 0ct3/4 - Sox2的配置搭载了初始化因 子的 SeVdp(MK0S)302L(序列号 13)、以 Klf4 - 0ct3/4 - Sox2 - c-Myc 的配置搭载了初 始化因子的SeVdp(KOSM)(序列号14)等能够以极高的效率由成纤维细胞等诱导和建立 iPS 细胞（W02010/134526;Nishimiura K et al.，J. Biol. Chem. 286, 4760-4771 (2011)、 W02012/0063817)。另外，基于与这些载体有关的见解，构建对初始化因子的配置、插 入位置、其他附加序列进行了任意设计的仙台病毒载体，并用于本发明。例如，实施 例1中所用的SeVdp (KOSM) 302L是指下述仙台病毒载体：其与SeVdp (K0SM)同样地以 Klf4 - 0ct3/4 - Sox2 - c-Myc的配置搭载了初始化因子，关于插入位置、其他附加序列采 用了 SeVdp(KOSM)和 SeVdp(MK0S)302L 的特点。
[0085] 这样，通过使用仙台病毒载体等将初始化因子导入MAIT细胞，从而可以得到MAIT 细胞来源的iPS细胞，这种MAIT细胞来源的iPS细胞自身也是本发明的方式之一。将MAIT 细胞初始化而得到的iPS细胞（MAIT-iPS细胞）表达MAIT细胞特异的TCRa链基因和/ 或其产物（下文中，将该特性称为"具有MAIT细胞特异的TCRa链"），在这点上，与ES细 胞或iPS细胞等以往存在的多能干细胞是不同的。如后所述，具有MAIT细胞特异的TCRa 链基因的多能干细胞通过置于可诱导向T细胞分化的条件下，从而能够选择性地得到具有 与MAIT细胞类似的特性的MAIT样细胞，极其有用。
[0086] 对于将MAIT细胞初始化而得到的MAIT-iPS细胞，接着通过基于公知方法的细胞 回收、分离、纯化法等可以高纯度且大量地进行回收。
[0087] 在另一方式中，本发明涉及一种iPS细胞，其具有MAIT细胞特异的TCRa链基因。 如上所述，这种iPS细胞可以通过使用仙台病毒载体等表达载体将初始化因子导入MAIT细 胞而得到，除了这样将作为体细胞的MAIT细胞初始化的方法以外，还考虑通过将MAIT细胞 特异的TCR基因导入ES细胞或一般的利用常规方法制作的iPS细胞等多能干细胞中而得 到。该情况下，作为多能干细胞，不仅是ES细胞，还可以使用哺乳动物的成体脏器或组织的 细胞、骨髄细胞、血液细胞、进而胚胎或胎儿的细胞等来源的、具有与ES细胞类似的性状的 所有多能干细胞。该情况下，与ES细胞类似的性状可以用ES细胞特异的表面标记分子的 存在或畸胎瘤形成能力等ES细胞特异的细胞生物学性质或ES细胞特异的基因表达、或对 象细胞中的多个基因群的表达方式类似性的高度等来规定。
[0088] 在一个方式中，本发明涉及一种MAIT样细胞的制作方法，将MAIT-iPS细胞等具有 MAIT细胞特异的TCRa链基因的iPS细胞分化诱导，可以得到MAIT样细胞。如此得到的 分化细胞具有与MAIT细胞同样的特性，在本发明中称为MAIT样细胞。特别是，本发明中， 将对MAIT-iPS细胞进行分化诱导而得到的MAIT样细胞称为iMAIT细胞（学术上也称为 "reMAIT细胞"）。
[0089] 本发明中，在将具有MAIT细胞特异的TCRa链基因的iPS细胞分化诱导而得到 MAIT样细胞的情况下，可以无限制地使用由以iPS细胞为代表的多能干细胞分化诱导T细 胞的公知的方法。关于NKT细胞，迄今为止有下述报道：通过核移植制作由NKT细胞的核移 植得到的ES细胞，将该细胞分化诱导而得到NKT样细胞；进而，使用逆转录病毒载体将小鼠 NKT细胞初始化而制作iPS细胞，将该iPS细胞分化诱导而得到NKT样细胞。
[0090] 本发明中，作为通过分化诱导得到MAIT样细胞时的培养法，只要是得到MAIT样 细胞的方法就可以使用任意方法，例如可以举出与饲养细胞的共培养法、悬浮培养法、悬滴 (hanging drop)培养法、旋转培养法、软琼脂培养法、微载体培养法等。在本发明的优选方 式中，将iPS细胞分化诱导而得到MAIT样细胞的情况下，优选利用共培养进行，具体来说， 将0P9细胞等基质细胞作为饲养细胞进行共培养，进而与强制表达作为Notch配体的DLL1 的(P9细胞（0P9/DLL1)进行共培养，或者从最初开始与0P9/DLL1细胞进行共培养，从而可 以由MAIT-iPS细胞高效地得到MAIT样细胞。
[0091 ] 对于如此得到的MAIT样细胞，接着利用公知的方法进行细胞回收、分离、纯化。由 本发明得到的MAIT样细胞是与生物体内的MAIT细胞显示出几乎同等的形态学、生理学和 /或免疫学特征的细胞。生理学和/或免疫学特征不特别限定于此，MAIT样细胞的鉴定可 以通过确认MAIT细胞特异的1种或2种以上的标记物的表达来进行。关于标记物的表达， 对其方法没有特别限制，可以通过使用抗体的免疫染色法或逆转录酶介导的聚合酶链反应 (RT-PCR)、杂交分析等公知的细胞组织生物学方法以及分子生物学方法来确认。纯化MAIT 样细胞的方法只要是公知的细胞分离纯化法就可以使用任意方法，作为其具体例，可以举 出流式细胞术或磁珠、洗淘分离（panning)法等基于抗原-抗体反应的方法、或使用鹿糖、 Percoll等载体的基于密度梯度离心的细胞分级法("Monoclonal Antibodies 〖principles and practice, Third Edition" Acad. Press, 1993 Antibody Engineering ：A Practical Approach" IRL Press at Oxford University Press,1996)〇
[0092] 具体而言，MAIT样细胞与MAIT细胞同样地对抗TCR Va 7. 2抗体（3C10)、抗CD161 抗体、抗IL_18Ra抗体等为阳性（3C10+/⑶161+/IL-18Ra+)。另一方面，生物体内的MAIT 细胞的CCR7的表达为阴性，与此相对，虽然较弱但抗原未致敏的（刚制作后的）MAIT样细 胞确认到了 CCR7的表达，确认到在生物体内MAIT细胞与MAIT样细胞之间存在差异。另 外，例如在外周血来源的MAIT细胞中，作为效应记忆型T细胞的标记物的⑶45R0的表达为 阳性，作为初始型T细胞的标记物的CD45RA的表达为阴性或者仅在极少一部分细胞中为阳 性，与此相对，在抗原未致敏的（刚制作后的）MAIT样细胞中几乎未确认到CD45R0的阳性 细胞，强烈确认到⑶45RA的表达。这样可知，MAIT样细胞虽然与生物体内MAIT细胞呈现 出几乎同样的性状，但具有一部分不同的性状。
[0093] 另外，确认到：由本发明建立的MAIT样细胞具备与生物体内MAIT细胞几乎同样 的细胞表面抗原、基因表达、细胞因子产生能力，通过移入小鼠中，从而集中存在于肠道或 肝脏等组织中并增殖。另外，确认到MAIT样细胞具有与MAIT细胞同样的抗菌/抗感染性。 即，确认到由本发明建立的MAIT样细胞具备与生物体内MAIT细胞同样的功能及特性。
[0094] 在一个方式中，本发明涉及一种MAIT样细胞。本发明的MAIT样细胞在进行MAIT 细胞的功能分析方面可以用作重要的研宄工具。另外，本发明的MAIT样细胞可以用于对 促进MAIT细胞的产生及分化诱导、再生、生存、增殖等的新因子或物质、试剂进行鉴定的筛 选。
[0095] 本发明的MAIT样细胞对药物等各种生理活性物质及功能未知的新基因产物等的 药理评价和活性评价有用。例如，可以用于与MAIT细胞的功能调节有关的物质或试剂、进 而对MAIT细胞具有毒性或伤害性的物质或试剂的筛选。特别是，在现状下，难以为了进行 MAIT细胞的功能分析而准备充分的MAIT细胞，MAIT细胞的特性尚未被充分阐明，结果由本 发明制备的MAIT样细胞成为用于实施上述筛选的有用细胞源。另外，还有报道称集聚于人 癌或多发性硬化症巢的Tcl7细胞（具有IL-17产生能力的CD8+细胞）的大部分为MAIT细 胞，进而阐明MAIT细胞的功能并进行药物开发是有用的。
[0096] 在另一方式中，包含由本发明制备的MAIT样细胞的检测试剂盒对上述筛选有用。 另外，关于MAIT细胞的功能分析中所用的单克隆抗体的制作、控制MAIT细胞的增殖、活化、 成熟化的激动剂或拮抗剂的筛选，也可以使用本发明的MAIT样细胞来实施。
[0097] 作为供筛选的待测物质，没有特别限制，例如可以举出低分子化合物、高分子化合 物、有机化合物、无机化合物、蛋白质、肽、基因、病毒、细胞、细胞培养液、微生物培养液等。
[0098] 在另一方式中，使用由本发明制备的MAIT样细胞，将其与通过间接体内疗法（ex vivo)由自我免疫性疾病、癌、感染等显示出免疫异常的患者外周血所制备的淋巴细胞（单 核细胞、树突细胞、B细胞、NK细胞、T细胞等）付之共培养，由此还能够将MAIT样细胞或者 患者淋巴细胞表面抗原分布图的变化或/和转录因子、细胞因子/趋化因子等的产生能力 变化作为指标，应用于其病状、药物效果、或预后的预测等诊断中。
[0099] 此外，对本发明的MAIT样细胞来说，可以将其自身进行细胞移植并用于细胞移植 疗法中，或者可以作为包含MAIT样细胞作为实质性有效成分的细胞疗法剂进行给药。MAIT 细胞会使对于细菌感染和真菌感染的抵抗性亢进，因此，例如通过细胞移植或给药本发明 的MAIT样细胞，可以提高对于细菌感染或真菌感染的抵抗性。另外，据报道MAIT细胞有可 能参与自我免疫性疾病或癌等，例如通过细胞移植本发明的MAIT样细胞，从而有可能治疗 人自我免疫性疾病或癌。即，在一个方式中，本发明涉及MAIT样细胞在细胞移植疗法中的 使用、细胞移植疗法用的MAIT样细胞、包括对MAIT样细胞进行细胞移植的疗法、包含MAIT 样细胞作为实质性有效成分的细胞疗法剂等。这种细胞移植疗法或细胞给药疗法的对象患 者为需要提高对于细菌感染的抵抗力的患者、接受了脏器移植治疗或血液干细胞等各种细 胞移植治疗的患者、自我免疫性疾病患者、癌患者等，优选为患者具有的血液中的MAIT细 胞比标准少和/或MAIT细胞的活性降低的患者。
[0100] 在本发明的实施中，关于分子生物学或重组DNA技术等基因工程学的方法 和一般的细胞生物学方法及现有技术，只要不特别示出，则实施者可以参考该领域的 标准性书籍。作为这样的书籍，例如可以举出"Molecular Cloning :A Laboratory Manual"（Sambrook&Russell、Cold Spring Harbor Laboratory Press、第 3 版、2001)； "Current Protocols in Molecular biology" （Ausubel et al.编、John Wiley&Sons、 1987) ;"Methods in Enzymology" 系列（Academic Press) ;"PCR Protocols :Methods in Molecular Biology"（Bartlett&Striling 编、Humana P