取代三氨基三嗪类分泌型天冬氨酸蛋白酶抑制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药技术领域，具体地说，是一种新型的取代三氨基三嗪类分泌型天 冬氨酸蛋白酶抑制剂一一N2-(呋喃-2-基甲基）-6-[2-(取代-基甲烯基）肼基]-N4-取 代-1，3, 5-二嘆-2, 4-二胺化合物以及制备方法。
【背景技术】
[0002] 近年来，侵入性真菌感染的发病率和相关的死亡率已经极大程度上增加。临床上， 白念珠菌（致死率：20%~40% )、新型隐球菌（致死率：20%~70% )和烟曲霉菌（致死 率：50%~90% )被确证为侵染性真菌感染的三大主要病因。目前，抗真菌药物大体可分 为四大类：多烯类（如两性霉素 B，作用于真菌细胞膜脂质）、氟胞嘧啶类（如5-氟胞嘧啶， 作用于真菌核酸）、唑类（如氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑，作用于羊毛留醇14 α-去甲基化 酶）和棘白菌素类（如阿尼芬净、卡泊芬净，作用于真菌细胞壁β_1，3葡聚糖合成酶）。然 而，这些抗真菌药物普遍存在抗菌谱窄、副作用强、生物利用度差、易产生耐药性、药物-药 物相互作用严重等问题。例如，两性霉素 B存在严重的肾毒性副作用，并产生大量一氧化 氮，导致神经毒性；唑类化合物的耐药性问题显著；棘白菌素类口服无效，并且对新型隐球 菌无效。因此，寻找具有全新作用机制、抗菌谱广、无交叉耐药性的新型抗真菌化学实体成 为了抗真菌药物研宄中的迫切任务。
[0003] 大量实验证明，分泌型天冬氨酸蛋白酶（secreted aspartic protease，Sap)是白 色念珠菌致病的重要毒力因素，并已经显示了作为抗真菌新靶点的良好前景。Sap2已经被 证实具有多种生物学功能，如为自身细胞提供营养、附着和入侵宿主细胞、破坏宿主的保护 屏障、损害宿主免疫应激反应等。同时，Sap2小分子抑制剂的研宄仍处于起步阶段。
[0004] 为了发现具有全新结构类型的新型Sap2小分子抑制剂，通过基于结构的虚拟筛 选和进一步结构改造，得到N2-(呋喃-2-基甲基）-6-[2-(取代-基甲烯基）肼基]-N4-取 代-1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺化合物，其具有Sap2抑酶活性，目前尚未见有该类化合物的合 成及其Sap2抑酶活性和线虫体内抗真菌活性的报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种取代三氨基三嗪类化合物。
[0006] 本发明的第二个目的是，提供所述的三氨基三嗪类化合物的药学上可接受的盐 类。
[0007] 本发明的第三个目的是，提供所述的三氨基三嗪类化合物的制备方法。
[0008] 本发明的第四个目的是，提供所述的三氨基三嗪类化合物或其药学上可接受的盐 类的应用。
[0009] 为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是：一种取代三氨基三嗪类化合 物，所述的化合物的结构通式为：
[0010]
[0011] 其中=R1为取代的苯环，R2为取代的芳环、萘环或芳香杂环；
[0012] (1)苯环、萘环和芳香杂环各种取代基位置位于除去连接位置的其它任何位置，单 取代或多取代，取代基指：氢、羟基、氨基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、硝基、氰基、三氟甲基 或卤素；其中，卤素包括F、Cl、Br、I ;
[0013] (2)取代芳香杂环独立地表示：喹啉、四氢喹啉、异喹啉、四氢异喹啉、吡啶、噻吩、 噻唑、吡唑、呋喃、噁唑、异噁唑、哒嗪、吡嗪。
[0014] 优选的，所述的化合物选自如下所示的化合物：
[0015]
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[0020]
[0041] 为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：所述的三氨基三嗪类化合物 的药学上可接受的盐类，所述的盐类是所述的化合物的有机碱盐或无机碱盐，无机碱包括 但不限于氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸钾、碳酸钠，有机碱包括但不限于甲胺、乙胺。
[0042] 为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：所述的三氨基三嗪类化合物 的制备方法，包括以下步骤：
[0043] (1)制备 4, 6-二氯-N-(取代）苯基-1，3, 5-三嗪-2-胺（II )
[0044] 三聚氯氰（I )和（取代）苯胺于丙酮中，冰浴搅拌反应2小时，4, 6-二氯-N-(取 代）苯基-1，3, 5-三嗪-2-胺（II );
[0045] (2)制备6-氯-N2-(呋喃-2-基甲基）-N4-(取代）苯基-1，3, 5-三嗪-2, 4-二 胺（III )
[0046] 化合物4,6_二氯-N-(取代）苯基_1，3, 5-三嗪-2-胺（II )、2_呋喃甲胺及5 % 的Na2CO3溶液，室温搅拌反应12小时，得到6-氯-N 2_ (呋喃-2-基甲基）-N4-(取代）苯 基-1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺（III);
[0047] (3)制备N2-(呋喃-2-基甲基）-6-肼基-N4-(取代）苯基-1，3,5-三嗪-2, 4-二 胺（IV)
[0048] 6-氯-N2-(呋喃-2-基甲基）-N4-(取代）苯基-1,3, 5-三嗪-2, 4-二胺（III)和 肼于二氯甲烷中，回流搅拌反应12小时，得到N2-(呋喃-2-基甲基）-6-肼基-N4-(取代） 苯基-1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺（IV );
[0049] (4)制备N2-(呋喃-2-基甲基）-6-[(取代）肼基]-N4-苯基_1，3, 5-三嗪-2, 4-二 胺（V)
[0050] N2-(呋喃-2-基甲基）-6-肼基-N4-(取代）苯基-1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺（IV ) 和不同取代的醛于甲苯中，回流搅拌反应3小时，得到N2-(呋喃-2-基甲基）-6-[(取代） 肼基]-N4-苯基-1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺（V );
[0051] (5)制备N2-(呋喃-2-基甲基）-6-[(取代）肼基]-N4-(取代）苯基-1，3, 5-三 嗪-2, 4-二胺（VI)
[0052] 6-氯-N2-(呋喃-2-基甲基）-N4-(4-甲氧苯基）_1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺和不同 取代的苯甲醛于甲苯中，回流搅拌反应3小时，得到N2-(呋喃-2-基甲基）-6-[(取代）肼 基]-N4-(取代）苯基-1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺（VI);
[0053] (6)制备取代-{2-[(2-{4_[(呋喃-2-基甲基）胺基]_6-[((取代）苯基）胺 基]-1，3, 5-三嗪-2-基}肼基）甲烯基]苯氧基}乙酸（VII)
[0054] N2-(呋喃-2-基甲基）-6-[(取代）肼基]-N4- (4-甲氧苯基）-1，3, 5-三嗪-2, 4-二 胺（VI)和LiOH-H2O于混合溶剂（THF:Me0H:H20 = 3:2:1)中，室温搅拌反应1小时，取 代-{2-[(2-{4-[(呋喃-2-基甲基）胺基]-6-[((取代）苯基）胺基]-1，3,5-三嗪_2_基} 肼基）甲烯基]苯氧基}乙酸（VII)。
[0055] 为实现上述第四个目的，本发明采取的技术方案是：所述的三氨基三嗪类化合物 或其药学上可接受的盐类在制备抗真菌、拓扑异构酶抑制剂、抗肿瘤、抗高血压或抗血栓药 物中的应用。
[0056] 所述的三氨基三嗪类化合物抑制Sap2的活性。
[0057] 本发明优点在于：
[0058] 1、本发明通过基于结构的虚拟筛选和进一步结构改造，合成一种全新的取代三氨 基三嗪类化合物；
[0059] 2、本发明所述化合物是一类全新结构类型的真菌Sap2抑制剂，具有较好的抑酶 活性和线虫体内抗真菌活性，为深入研宄和开发新结构类型抗真菌药物开辟了新的途径， 可用于制备治疗抗真菌感染的药物及与现有抗菌药物联用药物。
【附图说明】
[0060] 图I. (A) Sap2水解底物原理；(B) FRET-pair吸收和激发波谱。
[0061] 图2.纯化前后Sap2的SDS-PAGE。M道：标记蛋白；1道：未诱导蛋白；2道：诱导 蛋白；3道：纯化重组蛋白。
[0062] 图3.化合物27对线虫的Kaplan-Meier生存曲线。
【具体实施方式】
[0063] 本发明提供一种新型的取代三氨基三嗪类抗真菌化合物，包括N2-(呋喃-2-基甲 基）-6-[2-(取代-基甲烯基）肼基]-N4-取代-1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺化合物。
[0064] 本发明化合物的结构通式如下：
[0065]
[0066] 其中=R1为取代的苯环，R2为取代的芳环、萘环或芳香杂环。
[0067] (1)苯环、萘环和芳香杂环各种取代基位置可以位于除去连接位置的其它任何位 置，可以是单取代，也可以多取代，取代基指：氢、羟基、氨基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、硝 基、氰基、三氟甲基或卤素。其中，卤素包括F、Cl、Br、I。
[0068] (2)取代芳香杂环独立地表示：喹啉、四氢喹啉、异喹啉、四氢异喹啉、吡啶、噻吩、 噻唑、吡唑、呋喃、噁唑、异噁唑、哒嗪、吡嗪等。
[0069] 通式化合物优选自札和R