5,6-二氢去甲斑蝥素氧代单乙酸钠盐及其合成方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及去甲斑蝥素氧代单乙酸钠盐及其合成方法和应用，属于斑蝥素衍生物 领域。
【背景技术】
[0002] 斑蝥是一种昆虫，又称"放屁虫"，是我国传统中药材中的一种。我国是最早运用斑 蝥作为药材的国家，在《本草纲目》、《神龙本草经》等医药名著里就曾有过关于斑蝥素入药 的记载。
[0003] 斑蜜素（cantharidin，CiqH12O 4)是一种从昆虫体内提取的比较有效果的抗癌物质， 是民间治疗恶性肿瘤的有效成分，它与其他的抗肿瘤药物相比，有许多优点。比如：它和它 的类似物不会抑制人体的免疫功能，另外，可提升人体白细胞等。它对肝癌，卵巢癌，食道癌 等有良好的疗效，它是通过改变蛋白质的活性，抗肿瘤侵袭转移，引起细胞周期阻滞，抑制 肿瘤生长，从而使得其死亡。其抗肿瘤的机制为通过减少癌细胞对氨基酸的摄取，抑制蛋白 质的合成，刺激淋巴细胞、巨噬细胞、多形核细胞产生白细胞介素，从而提高机体免疫力，同 时杀伤肿瘤细胞而达到治疗目的。
[0004] 但斑蝥素对泌尿系统和肠胃系统有较大的毒副作用，斑蝥素既是抗肿瘤的活性成 分，同时也是毒性的主要成分。对其进行恰当的结构修饰，会在保留其抗肿瘤活性的基础 上，大大减低对机体的毒副作用，以去甲斑蝥素衍生物的合成为例。去甲斑蝥素不但保留了 其较强的抗肿瘤活性和升高白细胞的作用，还消除了其对泌尿系统的副作用，后来，以去甲 斑蝥素为先导化合物进行结构改造成为了研究的热点。这种优势在抗肿瘤药物中还是少见 的，所以引起了广泛的关注，陆续合成了许多减少其毒副作用但同时又保留其活性的同类 药物，开发更新高效低毒的衍生物是一个很好的研究方向。
[0005] 对斑蝥素进行结构修饰后用于治疗癌症的衍生物近年来陆续的出现，并开始运用 于临床治疗。如去甲斑蝥素，它比斑蝥素少了两个甲基，其毒性明显减低，而治疗作用却优 于斑蟊素。另外还有斑蝥素钠，去甲斑蝥素钠，甲基斑蝥胺等，这些经结构改造的药物都有 它们 各自的优点，但这些药物的水溶性较差，生物利用度不高。
[0006]目前已经用于临床治疗的斑蝥素药物中（如斑蝥素钠，去甲斑蝥素钠等)，均以开 环的方式存在，从化学结构上看，开环的化合物其相应的溶解度较大，其体内生物利用度也 高。因此对斑蝥素的结构进行修饰，寻找高效低毒的斑蝥素抗肿瘤药物，具有重要的工业应 用价值和广泛的市场前景。ZL201410163619. 4、ZL201410163711. 0、ZL201410163705. 5 等 公开了制备去甲基斑蝥素酸盐的方法。
【发明内容】
[0007] 为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种5, 6-二氢去甲斑蝥素氧代 单乙酸钠盐及其合成方法和应用，在其结构中引入水溶性基团，增加其生物利用度，达到增 加其治疗效果的目的，所得到的5, 6-二氢去甲斑蝥素氧代单乙酸钠盐具一定的抗肝癌效 果。
[0008] 为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案： 5, 6-二氢去甲斑蝥素氧代单乙酸钠盐，结构式为式I :
5, 6-二氢去甲斑蝥素氧代单乙酸钠盐的合成方法，按照如下合成路线进行：以呋喃为 原料，与顺丁烯二酸酐在有机溶剂中反应得到5, 6-二氢去甲斑蝥素A，5, 6-二氢去甲斑蝥 素在有机溶剂中经还原剂还原反应得到5, 6-二氢去甲斑蝥素二醇B，5, 6-二氢去甲斑蝥素 二醇与溴乙酸乙酯得到5, 6-二氢去甲斑蝥素氧代单乙酸乙酯C，最后该酯在碱性条件下水 解生成相应的5, 6-二氢去甲斑蝥素氧代单乙酸钠盐I :
前述合成方法，具体包括以下步骤： (1) 取顺丁烯二酸酐，研细，加入有机溶剂溶解，待完全溶解后滴加呋喃，于35°C~ 45°C反应24h，抽滤，得白色固体产物5, 6-二氢去甲斑蝥素，干燥备用； (2) 室温下，取步骤（1)中的白色固体产物，加入有机溶剂后溶解，冷却至0°C，再缓慢 分批加入LiAlH4，搅拌反应过夜，反应结束后抽滤，用乙酸乙酯、水洗涤充分，得澄清液体 5, 6-二氢去甲斑蝥素二醇，干燥备用； (3) 将5, 6-二氢去甲斑蝥素二醇溶于有机溶剂中，冰水冷却至0°C下，先加入60%NaH， 然后加入溴乙酸乙酯，再在搅拌下继续反应过夜后抽滤，旋干，剩余物经快速柱层析即得 5, 6-二氢去甲斑蝥素氧代单乙酸乙酯。
[0009] (4)取5, 6-二氢去甲斑蝥素氧代单乙酸乙酯悬浮于水中，在碱性条件下水解生成 相应的5, 6-二氢去甲斑蝥素氧代单乙酸钠盐粗品，经柱层析纯化后得到纯品。
[0010] 前述合成方法中，所述步骤（1)中有机溶剂为乙醚、甲苯、苯、乙酸乙酯、二氯甲烷、 氯仿、乙腈、四氢呋喃中的任一种。
[0011] 前述合成方法中，所述步骤（2)中有机溶剂为四氢呋喃或乙醚。
[0012] 前述合成方法中，所述步骤（3)中的有机溶剂为四氢呋喃，N，N-二甲基甲酰胺，二 甲亚砜，乙腈中的任一种。
[0013] 前述合成方法中，所述的碱为有机碱或无机碱。其中有机碱为三乙胺或吡啶等。无 机碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾等。
[0014] 5, 6-二氢去甲斑蝥素氧代单乙酸钠盐在制备抗肝癌药物中的应用。
[0015] 本发明的有益之处在于：本发明提供的5, 6-二氢去甲斑蝥素氧代单乙酸钠盐，经 活性测试证明其具有一定的抗肝癌效果，可作为一种高效低毒的斑蝥素抗肿瘤药物。本发 明的合成工艺选择性好，原料易得，成本低廉，合成路线简单，便于操作实施，并且合成所得 产物毒性小，得率高，产物纯度高，因而该工艺具有高效、便捷、低成本的特点。
【具体实施方式】
[0016] 以下结合具体实施例对本发明作进一步的介绍。
[0017] 本发明中使用的呋喃，顺丁烯二酸酐，LiAlH4, NaH (60%)，溴乙酸乙酯均来自上海 国药集团。所用溶剂来自遵义双巨化工有限公司。除特别说明外，所用试剂均为化学纯。
[0018] 实施例15, 6-二氢去甲斑蝥素氧代单乙酸钠盐I的合成方法。
[0019] 步骤（1)中间体A、即5, 6-二氢去甲斑蝥素的制备：反应式如下所示：
从试剂瓶中取出一定量的顺丁烯二酸酐，置于干燥的研体中研细，再用电子天平称取 研细的顺丁烯二酸酐12. 021g，置于干燥的三口烧瓶中，塞上塞子，再加乙醚搅拌，在乙醚量 为90 mL时顺丁烯二酸酐完全溶解。待顺丁烯二酸酐完全溶解后，用滴液漏斗缓慢加入13 mL呋喃，用时13min。控制温度在38°C开始反应。反应Ih后溶液出现白色固体，且时间越 长白色固体越多。反应至24h后抽滤，得白色固体中间体A，即5, 6-二氢去甲斑蝥素。干燥 称重为17. 459 g，收率85. 75%。熔点：122~123°C，Rf:0. 52(展开剂：石油醚：乙酸乙酯 =3 : O51HNMr(CDCI3) : δ :3.18 (s，2H)，5.47 (s，2H)，6. 58 (s，2H)。
[0020] 上述步骤（I)中用于溶解顺丁烯二酸酐的有机溶剂除了乙醚外，还可用甲苯、苯、 乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、乙腈、四氢呋喃等中的任一种代替；所述反应温度可在35°C~ 45°C之间。
[0021] 步骤（2)中间体B、即5, 6-二氢去甲斑蝥素二醇的制备：
称取已生成的化合物A 2. 0g，于25ml洁净烧瓶中，加入25ml除水的THF，冰浴搅拌至 溶液澄清。缓慢地分四批加入