一种金莲花多糖的提取纯化方法及其作为烟草保润剂的应用_2

文档序号:9342298阅读:来源:国知局
的恒温恒湿箱中平衡48h。称取本发明制备的一定量的金莲花多糖,用蒸 馏水配成5%水溶液,均匀喷洒到已经平衡过的烟丝样品上(多糖质量:烟丝质量=1 :250), 以等量的蒸馏水和相同浓度的丙二醇溶液做对照。将此3组烟丝置于温度为(22±1) °C、 湿度为(60±2)%的恒温恒湿箱中平衡48 h。将平衡好的3组烟丝样品,每组均分成2份, 置于称量皿中。其中,1份样品放入105°C的烘箱中,烘至样品恒重,冷却后称量,根据前后 质量的变化,计算出各加样烟丝的初始含水率。每组另1份样品,准确称量后放入温度为 (22±1) °C、湿度为(40±2)%的恒温恒湿箱中。定时称量烟丝,计算样品的即时含水率,考 察保润剂的物理保润效果。结果(详见表2)显示:在环境相对湿度较低的(40%)条件下,添 加金莲花多糖保润剂、丙二醇与空白烟丝相比,水分散失比较缓慢,而且多糖的保湿能力优 于丙二醇,具有良好的物理保润性能。
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[0024] 本发明样品感官保润性能测试:取平衡[温度为(22±1) °C、相对湿度为 (60%± 2%)、48h]后的单料烟丝若干份,按照占烟丝质量的0、0. 01 %。、0. 05 %。、0. 10 %〇、 0. 50%。、1. 0%。和2. 0%。称取金莲花多糖各加(尽可能少的)等量蒸馏水配制成溶液,用微量 喷雾器均匀地喷加于上述烟丝上。将添加样品后的烟丝在温度(40±1) °C下平衡4h,再在 (100 ± I) °C下烘至含水率(12. 5 ± 0. 5 )%,用卷烟器卷制成烟支放入温度(22 ± I) °C、相对 湿度为(60%±2%)的恒温恒湿箱中下平衡48 h后,评吸;评吸结果详见表3。
[0026]
【附图说明】: 图1葡萄糖标准曲线。
[0027]
【具体实施方式】: 以下结合实施例进一步阐述本发明,但并不限制本发明的内容。
[0028] 实施例1 : 本发明金莲花多糖的提取纯化方法,其详细步骤如下: a、 干燥粉碎:将金莲花干燥后粉碎成40~60目的粉末,得到金莲花粉100g ; b、 浸泡:将步骤a得到的金莲花粉中加入20倍量的水,即金莲花粉与水二者加入的质 量比为1:20,然后在室温条件下浸泡2h ; c、 酶处理:将步骤b浸泡后的金莲花溶液加热至40°C,加入纤维素酶进行酶解处理2h, 纤维素酶的加入量占金莲花粉质量的1. 5% ; d、 超声提取:将步骤c酶解后的金莲花溶液进行超声波提取,提取温度为60°C,超声波 提取功率为300W,超声时间为IOmin ; e、 固液分离:将步骤d超声提取后的提取液进行离心分离,在2°C、8000转/min下,离 心 15min ; f、 浓缩醇沉:将步骤e离心后所得上清液进行减压浓缩,浓缩至原上清液体积的35% ; 然后加入95%乙醇至体系乙醇浓度为60%,加入乙醇后静置22h,静置醇沉后沉淀出金莲花 多糖,然后在2°C,8000转/min下,离心15min得到沉淀即金莲花粗多糖; g、 将步骤f得到的金莲花粗多糖按照1:3的质量比在粗多糖中加入水进行溶解,得到 粗多糖溶液,然后采用聚酰胺柱脱除蛋白质,得到金莲花多糖溶液按照步骤f进行浓缩、醇 沉,静置、离心得到沉淀,所得沉淀经过冷冻干燥,得到精制金莲花多糖6. 27g,收率6. 27%, 多糖含量27. 86%。
[0029] 实施例2 : 本发明金莲花多糖的提取纯化方法,其详细步骤如下: a、 干燥粉碎:将金莲花干燥后粉碎成40~60目的粉末,得到金莲花粉100g ; b、 浸泡:将步骤a得到的金莲花粉中加入22倍量的水,即金莲花粉与水二者加入的质 量比为1:22,然后在室温条件下浸泡3h ; c、 酶处理:将步骤b浸泡后的金莲花溶液加热至45°C,加入纤维素酶进行酶解处理lh, 纤维素酶的加入量占金莲花粉质量的2. 0% ; d、 超声提取:将步骤c酶解后的金莲花溶液进行超声波提取,提取温度为70°C,超声波 提取功率为400W,超声时间为13min ; e、 固液分离:将步骤d超声提取后的提取液进行离心分离,在4°C、9000转/min下,离 心 15min ; f、 浓缩醇沉:将步骤e离心后所得上清液进行减压浓缩,浓缩至原上清液体积的30% ; 然后加入95%乙醇至体系乙醇浓度为70%,加入乙醇后静置24h,静置醇沉后沉淀出金莲花 多糖,然后在4°C,9000转/min下,离心15min得到沉淀即金莲花粗多糖; g、 将步骤f得到的金莲花粗多糖按照1:4的质量比在粗多糖中加入水进行溶解,得到 粗多糖溶液,然后采用聚酰胺柱脱除蛋白质,得到金莲花多糖溶液按照步骤f进行浓缩、醇 沉,静置、离心得到沉淀,所得沉淀经过冷冻干燥,得到精制金莲花多糖7. 13g,收率7. 13%, 多糖含量28. 55%。
[0030] 实施例3 : 本发明金莲花多糖的提取纯化方法,其详细步骤如下: a、 干燥粉碎:将金莲花干燥后粉碎成40~60目的粉末,得到金莲花粉100g ; b、 浸泡:将步骤a得到的金莲花粉中加入25倍量的水,即金莲花粉与水二者加入的质 量比为1:25,然后在室温条件下浸泡4h ; c、 酶处理:将步骤b浸泡后的金莲花溶液加热至54°C,加入纤维素酶进行酶解处理lh, 纤维素酶的加入量占金莲花粉质量的2. 5% ; d、 超声提取:将步骤c酶解后的金莲花溶液进行超声波提取,提取温度为80°C,超声波 提取功率为500W,超声时间为IOmin ; e、 固液分离:将步骤d超声提取后的提取液进行离心分离,在6°C、10000转/min下,离 心 IOmin ; f、 浓缩醇沉:将步骤e离心后所得上清液进行减压浓缩,浓缩至原上清液体积的40% ; 然后加入95%乙醇至体系乙醇浓度为80%,加入乙醇后静置22h,静置醇沉后沉淀出金莲花 多糖,然后在6°C,10000转/min下,离心10min得到沉淀即金莲花粗多糖; g、 将步骤f得到的金莲花粗多糖按照1:4的质量比在粗多糖中加入水进行溶解,得到 粗多糖溶液,然后采用聚酰胺柱脱除蛋白质,得到金莲花多糖溶液按照步骤f进行浓缩、醇 沉,静置、离心得到沉淀,所得沉淀经过冷冻干燥,得到精制金莲花多糖6. 31g,收率6. 31%, 多糖含量28. 39%。
[0031] 实施例4: 本发明金莲花多糖的提取纯化方法,其详细步骤如下: a、 干燥粉碎:将金莲花干燥后粉碎成40~60目的粉末,得到金莲花粉100g ; b、 浸泡:将步骤a得到的金莲花粉中加入22倍量的水,即金莲花粉与水二者加入的质 量比为1:22,然后在室温条件下浸泡3h ; c、 酶处理:将步骤b浸泡后的金莲花溶液加热至35°C,加入纤维素酶进行酶解处理lh, 纤维素酶的加入量占金莲花粉质量的1. 〇% ; d、 超声提取:将步骤c酶解后的金莲花溶液进行超声波提取,提取温度为65°C,超声波 提取功率为350W,超声时间为16min ; e、 固液分离:将步骤d超声提取后的提取液进行离心分离,在2°C、10000转/min下,离 心 15min ; f、 浓缩醇沉:将步骤e离心后所得上清液进行减压浓缩,浓缩至原上清液体积的40% ; 然后加入95%乙醇至体系乙醇浓度为65%,加入乙醇后静置20h,静置醇沉后沉淀出金莲花 多糖,然后在2°C,10000转/min下,离心15min得到沉淀即金莲花粗多糖; g、 将步骤f得到的金莲花粗多糖按照1:5的质量比在粗多糖中加入水进行溶解,得 到粗多糖溶液,然后采用聚酰胺柱脱除蛋白质,得到金莲花多糖溶液按照步骤f进行浓缩、 醇沉,静置、离心得到沉淀,所得沉淀经过冷冻干燥,得到精制金莲花多糖6. 47g,多糖收率 6. 47%,多糖含量 27. 05 %。
[0032] 实施例5 : 本发明金莲花多糖的提取纯化方法,其详细步骤如下: a、 干燥粉碎:将金莲花干燥后粉碎成40~60目的粉末,得到金莲花粉100g ; b、 浸泡:将步骤a得到的金莲花粉中加入20倍量的水,即金莲花粉与水二者加入的质 量比为1:20,然后在室温条件下浸泡2h
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