一种用于生产共轭亚油酸的乳酸菌培养基的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种乳酸菌培养基，具体涉及一种用于生产共辄亚油酸的乳酸菌培养 基。
【背景技术】
[0002] 亚油酸，是人体必须脂肪酸一亚油酸（LinoleicAcid，简称LA)的一组具有共辄 双键的所有几何和位置异构体的统称。近年来，共辄亚油酸作为一种功能性油脂，愈发受到 人们的关注，已经成为药学、化学和食品等领域的研究热点。共辄亚油酸具有抗癌、抗氧化、 抗动脉粥样硬化、降低胆固醇、促进生长等作用。已被广泛应用于功能性食品、药品、保健 品、化妆品等领域。共辄亚油酸应用于临床药品的报道还比较少，但它具有减肥、抗癌、抗动 脉粥样硬化等功能已被证实，相信不久之后它一定会成为治疗这类疾病的良药。共辄亚油 酸对人类健康意义重大，具有广阔的应用前景。
[0003] 共辄亚油酸的天然来源非常广泛，包括多种动物、植物和微生物。许多乳酸菌都 能产生共辄亚油酸，但目前常见的乳酸菌产共辄亚油酸培养基为乳糖MRS培养基，其配方 为酪蛋白胨10. 〇g/L、牛肉浸取物10g/L、酵母提取液5.Og/L、葡萄糖5g/L、乙酸钠5.Og/L、 柠檬酸二胺2. 0g/L、吐温801. 0g/L、磷酸氢二钾2. 0g/L、七水硫酸镁0. 2g/L、七水硫酸锰 0.05g/L、碳酸钙20. 0g/L，pH6. 8,115°C灭菌20min后备用。该培养基营养物质不仅成分复 杂，价格昂贵，而且制作繁琐，不具备工业化生产的能力，且菌株产生的亚油酸产量不高。
[0004] 菊芋别名洋姜地生姜，生态适应性强并且种植简单，繁殖力强，一次播种可以多次 收获，是发展较快的新型农业经济型作物。菊芋是一种营养丰富的农作物，具备开发成微生 物培养基的良好潜力。
【发明内容】
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[0005] 本发明的目的是提供一种用于生产共辄亚油酸的乳酸菌培养基，在现有技术中乳 糖MRS培养基的基础上，用菊芋浸汁代替培养基中的牛肉膏、蛋白胨、柠檬酸铵等营养物 质，选用经济实惠的无机氮源，不仅满足了乳酸菌生长的基本营养需求，并且显著提高了亚 油酸活力，降低了生产成本。
[0006] 为达到上述目的，本发明可以通过如下技术方案来实现：
[0007] -种用于生产共辄亚油酸的乳酸菌培养基包括：菊芋浸汁6-14%、葡萄糖 0. 5-4%、酵母浸出物1-6 %、乙酸钠2-6 %、磷酸氢二钾2 %、硫酸镁0. 05 %、硫酸锰0. 05 %， 上述各组分为质量百分含量，Tween-801ml/L，溶剂为水。
[0008] 优选，一种用于生产共辄亚油酸的乳酸菌培养基包括：菊芋浸汁9-12%、葡萄糖 1-4 %、酵母浸出物1-4 %、乙酸钠2-5 %、磷酸氢二钾2 %、硫酸镁0. 05 %、硫酸锰0. 05 %，上 述各组分为质量百分含量，溶剂为水，Tween-801ml/L。
[0009] 优选，一种用于生产共辄亚油酸的乳酸菌培养基包括：菊芋汁11%、葡萄糖3%、 酵母浸出物1%、乙酸钠3%、磷酸氢二钾2%、硫酸镁0.05% ;硫酸锰0.05%，上述各组分 为质量百分含量，Tween-801ml/L，溶剂为水。
[0010] 优选，一种用于生产共辄亚油酸的乳酸菌培养基，其特征在于包括：菊芋浸汁 10 %、葡萄糖0. 5-4 %、酵母浸出物1-6 %、乙酸钠2-6 %、磷酸氢二钾2 %、硫酸镁0. 05 %、硫 酸锰0. 05%，上述各组分为质量百分含量，Tween-801ml/L，溶剂为水。
[0011] 优选，一种用于生产共辄亚油酸的乳酸菌培养基，其特征在于包括：菊芋浸汁 10 %、葡萄糖2 %、酵母浸出物1-6 %、乙酸钠2-6 %、磷酸氢二钾2 %、硫酸镁0. 05 %、硫酸锰 0. 05%，上述各组分为质量百分含量，Tween-801ml/L，溶剂为水。
[0012] 优选，一种用于生产共辄亚油酸的乳酸菌培养基，其特征在于包括：菊芋浸汁 10%、葡萄糖2 %、酵母浸出物3%、乙酸钠2-6%、磷酸氢二钾2 %、硫酸镁0. 05 %、硫酸锰 0. 05%，上述各组分为质量百分含量，Tween-801ml/L，溶剂为水。
[0013] 优选，一种用于生产共辄亚油酸的乳酸菌培养基，其特征在于包括：菊芋浸汁 10 %、葡萄糖2 %、酵母浸出物3 %、乙酸钠4 %、磷酸氢二钾2 %、硫酸镁0. 05 %、硫酸锰 0. 05%，上述各组分为质量百分含量，Tween-801ml/L，溶剂为水。
[0014] 进一步地，一种用于生产共辄亚油酸的乳酸菌培养基的PH值为6. 8。
[0015] 进一步地，一种用于生产共辄亚油酸的乳酸菌培养基，所用乳酸菌为植物乳酸杆 菌。
[0016] 用上述所描述的乳酸菌培养基来培养乳酸菌生产共辄亚油酸的方法，依次包括如 下步骤：
[0017] (1)菊芋浸汁的制备：准确称量l〇〇〇g菊芋，预煮，然后加水进行榨汁，再加水定容 至1000ml，在115°C下灭菌10分钟，冷却备用。
[0018] (2)培养基配制：按照上述所述的培养基成分的含量，准确称取菊芋浸汁、葡萄 糖、酵母浸出物、乙酸钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰，Tween-80,加入1L蒸馏水，充分搅 拌，至各组分完全溶解，然后调节培养基pH值为6. 8,在115°C灭菌20min后待用。
[0019] (3)发酵培养：取步骤⑵配置好的培养基100ml倒入容量为250ml的三角瓶中， 然后将培养好的种子液以1% (v/v)的接种量接种到三角瓶中的培养基中，39°C静置培养 36h，测定共辄亚油酸的含量。
[0020] 本发明的有益效果是：
[0021] (1)本发明利用菊芋作为乳酸菌发酵生产亚油酸培养基的主要营养物质，在葡 萄糖、酵母浸出物和乙酸钠的协同作用下，不仅可以满足乳酸菌生长的基本营养需求，而 且提高了亚油酸的活力，使得植物乳酸杆菌中共辄亚油酸的产量相对于现有技术提高了 39. 6%。
[0022] (2)本发明在MRS培养基的基础上，用菊芋代替MRS培养基中的牛肉膏、蛋白胨、梓 檬酸铵等营养物质，选用经济实惠的无机氮源，降低了生产成本。
【附图说明】：
[0023] 图1 :菊芋浸汁的质量百分含量对共辄亚油酸含量的影响；
[0024] 图2:葡萄糖的质量百分含量对共辄亚油酸含量的影响；
[0025] 图3 :酵母浸出物的质量百分含量对共辄亚油酸含量的影响；
[0026] 图4:乙酸钠的质量百分含量对共辄亚油酸含量的影响。
【具体实施方式】：
[0027] 下面结合具体实施例对本发明的内容进一步说明。
[0028] 实施例1
[0029] 本实施例的一种用于生产共辄亚油酸的乳酸菌培养基包括：菊芋浸汁6-14%，葡 糖糖3 %，酵母浸出物3 %，乙酸钠4%，磷酸二氢钾2 %，硫酸镁0. 05 %，硫酸锰0. 05 %，上 述各组分为质量百分含量，Tween-801ml/L，培养基的PH值为6. 8。
[0030] 用上述培养基来培养乳酸菌生产共辄亚油酸的方法，依次包括如下步骤：
[0031] (1)菊芋浸汁的制备：准确称量l〇〇〇g菊芋，预煮，然后加水进行榨汁，再加水定容 至1000ml，在115°C下灭菌10分钟，冷却备用。
[0032] (2)培养基配制：按质量百分含量，准确称取菊芋浸汁6-14%、葡萄糖3%、酵母浸 出物3 %、乙酸钠4%、磷酸氢二钾2 %、硫酸镁0. 05 %、硫酸锰0. 05 %，Tween-80lml/L，加入 1L蒸馏水，充分搅拌，至各组分完全溶解，然后调节培养基pH值为6. 8,在115°C灭菌20min 后待用。
[0033] (3)发酵培养：取步骤⑵配置好的培养基100ml倒入容量为250ml的三角瓶中， 然后将培养好的种子液以1% (v/v)的接种量接种到三角瓶中的培养基中，39°C静置培养 36h，测定共辄亚油酸的含量。
[0034] 本实施例以菊芋浸汁为单因素变量，研究菊芋浸汁的加入量对共辄亚油酸含量的 影响，菊芋浸汁单因素变量实验因素如表1所示，菊芋浸汁对共辄亚油酸含量的影响如图1 所示，随着培养基菊芋浸汁质量百分含量的不断增大，共辄亚油酸的含量先增加后减少，培 养基中菊芋浸汁质量百分含量为10 %时共辄亚油酸的含量较高。
[0035] 表1 :以菊芋浸汁为单因素变量的实验因素
[0036]
[0037] 实施例2
[0038] 本实施例的一种用于生产共辄亚油酸的乳酸菌培养基包括：菊芋浸汁10%，葡糖 0. 5-3. 5%，酵母浸出物3%，乙酸钠4%，磷酸二氢钾2%，硫酸镁0. 05%，硫酸锰0. 05%，以 上各组分含量均为百分含量，Tween-801ml/L，培养基的PH值为6. 8。
[0039] 用上述培养基来培养乳酸菌生产共辄亚油酸的方法，依次包括如下步骤：
[0040] (1)菊芋浸汁的制备：准确称量l〇〇〇g菊芋，预煮，然后加水进行榨汁，再加水定容 至1000ml，在115°C下灭菌10分钟，冷却备用。
[0041] (2)培养基配制：按照质量百分含量，准确称取菊芋浸汁10%、葡萄糖0.5-3. 5%、 酵母浸出物3 %、乙酸钠4%、磷酸氢二钾2 %、硫酸镁0. 05 %、硫酸锰0. 05 %，以上各组分含 量均为百分含量，Tween-801ml/L，加入1L蒸馏水，充分搅拌，至各组分完全溶解，然后调节 培养基pH值为6. 8,在115°C灭菌20min后待用。
[0042] (3)发酵培养：取步骤⑵配置好的培养基100ml倒入容量为250ml的三角瓶中， 然后将培养好的种子液以1% (v/v)的接种量接种到三角瓶中的培养基中，39°C静置培养 36h，测定共辄亚油酸的含量。
[0043] 本实施例与实施例1不同的是，在实施例1的基础上，菊芋浸汁质量百分含量为 10 %时，以葡萄糖为单一因素变量，研究葡萄糖的加入量对共辄亚油酸，葡萄糖单因素变量 实验因素如表2所示，葡萄糖对共辄亚油酸含量的影响如图2所示。随着培养基中葡萄糖质 量百分含量的增加，共辄亚油酸的含量先增高后降低，培养基中葡萄糖质量百分含量为2% 时，共辄亚油酸的含量较高。
[0044] 表2:以葡萄糖为单