大规模培养绿色巴夫藻的大量元素营养盐配方的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明属于水产养殖领域，尤其是一种适用于大规模培养绿色巴夫藻的大量元素营养盐配方。
【背景技术】
[0002]微藻作为可再生的生物质能源也得到了越来越多的关注，规模化培养微藻产业化也有相关的研究并取得一定进展，，但由于规模化培养微藻容易受到光照、培养条件等因素的影响，现有的微藻产业化模式仍存在效率低、成本高的不足。
[0003]绿色巴夫藻属于金藻门、巴夫藻目，由于其无细胞壁、个体微小、繁殖快、营养丰富，适于幼体摄食和消化，并且具有合成高度不饱和脂肪酸的能力，最突出的是富含水产经济动物幼体生长和发育所必需的二十二碳六烯酸，在饵料强化方面起了直接或间接作用。因而它是一种优质的单胞藻饵料，广泛应用于虾、蟹、贝类幼体及海水仔鱼的人工育苗。
[0004]目前实验室及生产上培养绿色巴夫藻多采用基础的F/2培养基进行培养，F/2培养基主要是由 NaN03、NaH2PO4.H20、Na2S13.9H20、Na2EDTA、FeCl3.6H20、CuSO4.5H20、ZnSO4.7H20、CoCl2.6H20、MnCl.4H20、Na2MoO4.2H20、维生素 B1、维生素 B12、生物素、自然海水组成。F/2培养基存在着易受污染、培养密度低等缺点，容易导致培养效率低下，所培养的细胞营养成分不稳定，严重影响育苗进程和育苗质量。
[0005]现有的技术未能解决绿色巴夫藻培养过程中的这一不足。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是针对目前绿色巴夫藻培养的现状，提供一个适合绿色巴夫藻大规模培养的大量元素的营养盐培养基础及制备，本发明的培养基用于绿色巴夫藻的规模化培养，可以促进绿色巴夫藻的生长、提高培养密度、提高培养效率，获得的绿色巴夫藻细胞营养成分稳定，还具有培育密度高、培育持续时间长、降低养殖成本低的特点。
[0007]本发明的技术方案如下:一种适用于大规模培养绿色巴夫藻的大量元素营养盐配方，其中各组分及其含量以每m3海水中含有该组分g数计，如下=(NH2)2CO 25~35g/m3，NH4HCO3 55?65g/m3，Na2HPO4 8~12g /m3，FeCl3 2.2-2.8g /m3，EDTA_2Na 9.0-1Og/ m3。
[0008]优选的配方组成可以是:该营养盐配方以每m3海水中含有该组分g数计，如下:(NH2)2CO 30g/m3，NH4HCO3 60g/m3，Na2HPO4 1g /m3，FeCl3 2.5g /m3，EDTA_2Na 9.5g/ m3。
[0009]优选的配方组成还可以是:该营养盐配方以每m3海水中含有该组分g数计，如下:(NH2)2CO 32g/m3，NH4HCO3 58g/m3，Na2HPO4 8g /m3，FeCl3 2.8g /m3，EDTA_2Na 10g/m3。
[0010]优选的配方组成还可以是:该营养盐配方以每m3海水中含有该组分g数计，如下:(NH2)2CO 28g/m3，NH4HCO3 62g/m3,Na2HPO4 Ilg /m3，FeCl3 2.4g /m3，EDTA_2Na 9.6g/ m3。
[0011]本发明的营养盐配方用于绿色巴夫藻的大规模培养方法包括如下步骤:
(O将用于大规模培养绿色巴夫藻的面积为200m2跑道式生物反应器进行彻底的清理和消毒，而后将经过砂滤、泡沫分离、精密过滤器和紫外线消毒的海水引入，海水水深25~30cm，再按照20ppm的剂量将强氯精加入海水中，进行消毒和曝气一昼夜；
(2)海水经步骤(I)处理后，按照30ppm的剂量加入硫代硫酸钠；
(3)根据权利要求1所述配方，按海水水体体积，称量以下各组分:(NH2)2OKNH4HCO3,Na2HPO4, FeCl3, EDTA_2Na，将各组分加入海水中，接入经过检测的合格的绿色巴夫藻藻种，接种量按体积比为藻种:海水=1:50~100，接种完毕，使用轮浆进行搅拌，轮浆由电动机驱动，同时通入CO2以调节pH值。
[0012]所述搅拌速度为:50~100rpm。
[0013]所述pH 值为 8-8.2。
[0014]所述组分的加入方式可以是:依次加入二分之一的(NH2)2OK二分之一的Na2HPO4、二分之一的EDTA_2Na、二分之一的NH4HC03、二分之一的FeCl3, 1min后，再加入二分之一的(NH2)2C0、二分之一的 Na2HPO4、二分之一的 NH4HC03、二分之一的 FeCl3、二分之一的EDTA-2Na。
[0015]所述组分加入海水后，将海水在频率60~80Hz条件下进行超声处理10~20min。
[0016]本发明具有如下有益效果:本发明可以促进绿色巴夫藻的生长、提高培养密度、提高培养效率，获得的绿色巴夫藻细胞营养成分稳定，还具有培育密度高、培育持续时间长、降低养殖成本低的特点，相对于现有技术，可以明显提高绿色巴夫藻的细胞密度，明显延长绿色巴夫藻的培养时间；在培养过程中，将营养盐加入海水后再结合超声波处理海水，利用超声波的空化作用促进营养液的有效、快速、均匀溶解，且可控制海水中营养盐成分微小颗粒的均匀分布，有利于微藻的吸收，促进其良好代谢，获得良好的生长。
【具体实施方式】
[0017]下面通过实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围。
[0018]为了使本发明的目的、技术方案和优点更加明确，下面对本发明的优选实施例进行详细的描述。
[0019]实施例1采用以下步骤进行绿色巴夫藻的大规模培养:
(1)将用于面积为200m2跑道式生物反应器进行彻底的清理和消毒，而后将经过砂滤、泡沫分离、精密过滤器和紫外线消毒的海水引入，海水水深25cm，再按照20ppm的剂量将强氯精加入海水中，进行消毒和曝气一昼夜；
(2)海水经步骤(I)处理后，按照30ppm的剂量加入硫代硫酸钠；
(3)按以下配方，根据海水水体体积，称量各组分，以每m3海水中含有该组分g数计:(NH2)2CO 30g/m3，NH4HCO3 60g/m3，Na2HPO4 1g /m3，FeCl3 2.5g /m3，EDTA_2Na 9.5g/
3
m ；
(4)将各组分加入海水中，开启轮浆以转速50r/min搅拌lOmin，再以频率70Hz进行超声处理15min，静置5min后，接入经过检测的合格的绿色巴夫藻藻种，接种量按体积比为藻种:海水=1:50，接种完毕，使用轮浆进行搅拌，转速50rpm，轮浆由电动机驱动，同时通入CO2以调节海水pH值8。
[0020]实施效果:本实验方式所培养的绿色巴夫藻细胞密度高，达到了 6X 16个/ml，培养时间持续了 5天。