一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙v纯度的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及罗汉果加工领域，具体涉及一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法。
【背景技术】
[0002]罗汉果甜苷又称罗汉果甜甙，萃取于广西特产经济植物一罗汉果，其甜度为蔗糖的300倍，其热量为零，具有清热润肺镇咳、润肠通便之功效，对肥胖、便秘、糖尿病等具有防治作用。
[0003]罗汉果甜甙中的单体甙V是罗汉果甜甙的主要甜味成分。目前，提取罗汉果甜甙的方法有很多，但因其本身原料的原因，在提取过程中脱味脱色效果不理想，萃取出的罗汉果粉粉色偏深，并有不愉快的青涩味，即单体甙V纯度不高，不适合工业用甜味剂要求。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种能有效去除罗汉果甜苷的青涩味，并脱除色泽，提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法。
[0005]为实现上述目的，本发明采用如下技术方案:
一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法，包括以下步骤:
1)提取:将罗汉果原料进行破碎处理，再将破碎后的原料与体积浓度为30-35%的乙醇按重量比1:9-10混合均匀，在温度70-75°C下，用三级单罐套式提取方法提取45-60min，过滤，得到含有罗汉果甜甙V (Mogroside V)的提取液，并将提取液冷却至25_30°C ；
2)预浓缩:将上述冷却后的提取液浓缩至提取液体积的1/5-1/4，得到浓缩液；
3)酶解:在上述浓缩液中加入酸溶液调节浓缩液pH至4.0-4.5，然后加入BrewersCompass复合酶，所述复合酶添加量为浓缩液重量的0.5_1%。，然后升温至50-55°C，酶解30-40min ;酶解后浊度从大于4000NTU降至1-2NTU，单体甙V浓度提高10_15%，同时降低了苦涩味。
[0006]4) 一次过滤:将上述酶解后的浓缩液离心，采用l-2um的陶瓷膜过滤，得到一次滤液；
5)树脂吸附、洗脱:将大孔吸附树脂装入吸附柱中，然后将上述一次滤液以2-3BV/h的流速流过吸附柱进行吸附，主要是吸附一次滤液中的皂甙类、色素及其他呈味物质，每根吸附柱吸附40-50倍吸附柱体积的一次滤液，吸附结束后用吸附柱体积3-4倍的洗脱液洗脱吸附柱上吸附的皂甙类成分、色素及其他呈味物质，所述洗脱液为浓度70-75%的乙醇，洗脱流速为l_2BV/h，收集洗脱液，所述洗脱液中的皂甙类成分为后续脱味(脱盐)脱色的有效物；
6)浓缩、二次过滤:将上述收集的洗脱液浓缩至百利度为25-30%的浓缩液，再将浓缩液经l_2um陶瓷膜过滤，得到二次滤液；
7)树脂柱脱盐:采用D280大孔树脂为脱盐树脂，将其装入树脂柱中，将上述二次滤液以1.5-2BV/h的流速流过树脂柱，并收集流出液，然后用浓度70-75 %的乙醇为洗脱液进行洗脱并收集洗脱液，洗脱液用量为D280大孔树脂体积的2.0-2.2倍，合并流出液和洗脱液，所得脱盐液电导率为l-5us/cm ；
8)树脂柱脱色:采用D392大孔树脂为脱色树脂，将其装入树脂柱中，将上述合并后的流出液和洗脱液以1.5-2BV/h的流速流过树脂柱，进行脱色得到脱色液，所得脱色液为淡黄至无色；
9)活性炭脱色:在上述脱色液中加入其重量5-8%的活性炭，在温度45-50°C下脱色50-60min，然后离心，弃沉淀，收集离心液，所得离心液为无色；
10)灭菌:将上述离心液灭菌、干燥，得到含高纯度MogrosideV的罗汉果甜苷。
[0007]进一步，所述步骤I)中的罗汉果原料为成熟的鲜罗汉果或干罗汉果。
[0008]所述干罗汉果的水分含量小于10%。
[0009]所述干罗汉果的制备方法如下:将新鲜的罗汉果在温度45_50°C下烘烤12-14 h，然后升温至65-70°C，烘烤22-24h，再降温至50_55°C，烘烤至水分含量小于10%，得到干罗汉果。
[0010]进一步，步骤2)和步骤6)中所述的浓缩均为真空浓缩。
[0011]所述步骤3)中的酸溶液为浓度2-2.5%的柠檬酸溶液或lmol/L的盐酸溶液。
[0012]所述步骤4)和步骤9)中所述离心的转速均为6500-7000r/min。
[0013]所述步骤5)中的大孔吸附树脂为HPD750大孔吸附树脂，其装柱量为罗汉果原料的 1/10-1/9。
[0014]所述步骤7)的D280大孔树脂的装柱量为罗汉果原料的1/40-1/38，所述步骤8)的D392大孔树脂的装柱量为罗汉果原料的1/40-1/38。
[0015]所述步骤10)中灭菌是指温度134-138°C下灭菌30_35s，所述干燥为喷雾干燥。
[0016]本发明步骤I)通过低浓度酒精浸提方式，能够保证罗汉果单体甙V的浸出，又能降低其他杂质的溶出，降低后续分离纯化难度。后续一般通过一次吸附分离即可将产品的罗汉果单体甙V含量提高至45%以上，比现有水提工艺提高了 20%左右。
[0017]本发明步骤2)通过低温真空预浓缩，避免破坏料液中的有效成分。同时，预浓缩至一定浓度再进行后续吸附纯化，可将传统吸附纯化所需时间(48h左右)缩短至1h左右，提高工作效率并且物料不发生变质。
[0018]本发明步骤3)所述Brewers Compass复合酶购买至DSM公司(帝斯曼公司)，Brewers Compass复合酶主要含有纤维素酶、果胶酶，酸性蛋白酶及β _葡聚糖酶等，果胶酶及蛋白酶主要起澄清、降低粘性及改善风味作用，纤维素酶及葡聚糖酶能提高有效物质的溶出，本发明通过酶解，可以除去物料中果胶和其他大分子粘性物质，如蛋白质，及多肽等苦味物质，降低过柱吸附时上柱压力，并降低杂质成分。本发明的酶解澄清方法，与传统的絮凝剂澄清方法相比，对罗汉果单体甙V的损耗几乎为0，澄清效果高效迅速，一般30min左右即可完成澄清，并且可提高罗汉果单体甙V得率10-15%左右。通过酶解工艺，可以解决传统工艺中甜苷出现后浑的问题。
[0019]本发明步骤5)的吸附柱经洗脱液洗脱后，依次采用5%Na0H的水溶液清洗，5%的盐酸水溶液清洗可实现回收循环利用。步骤7)脱盐(脱味)树脂采用5%的盐酸水溶液清洗实现回收循环利用。步骤8)脱色树脂经洗脱液流经吸附后，依次采用饱和NaCL溶液洗脱色树脂，5%NaOH的水溶液清洗实现循环利用。
[0020]本发明采用以上的技术方案，料液流经吸附柱的过程中，吸附柱对料液中的主要有效物进行吸附，同时吸附物料中的呈味物质，再用洗脱液洗脱吸附柱上的有效物，最后将洗脱液经脱盐(脱味)树脂吸附呈味物质、经脱色树脂去除色素，最后通过活性炭吸附，进一步去除杂质。由于罗汉果提取液中主要的呈味物质为盐类、多肽、多酚类物质，主要杂质为色素类成分，通过本发明方法，最后制得的产品中mogroside V含量大于60%，总阜式大于90%，产品色泽雪白，总多酚含量小于1%，因此，能有效改善产品口感，增加有效物含量。
[0021]本发明在脱除不愉快味道及色素的同时，最大程度的保留了物料的有效成分，提高了产品的外观及口感，产品颜色雪白，无异味，口感清甜，后甜绵长，类白砂糖，甜度为砂糖的500-1000倍，同时热量几乎为0，可应用于代糖产品及减肥保健食品中。
【具体实施方式】
[0022]一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法，包括以下步骤:
1)提取:将罗汉果原料进行破碎处理，再将破碎后的原料与体积浓度为30-35%的乙醇按重量比1:9-10混合均匀，在温度70-75°C下，用三级单罐套式提取方法提取45-60min，过滤，得到含有Mogroside V的提取液，并将提取液冷却至25_30°C ；
2)预浓缩:将上述冷却后的提取液通过单效真空蒸发器浓缩至提取液体积的I/5-1/4，得到浓缩液；
3)酶解:在上述浓缩液中加入酸溶液调节浓缩液pH至4.0-4.5，然后加入BrewersCompass复合酶，所述复合酶添加量为浓缩液重量的0.5-1%,升温至50-55 °C，酶解30-40min ；
4)一次过滤:将上述酶解后的浓缩液在6500-7000r/min的转速下离心，然后用l_2um的陶瓷膜过滤，得到一次滤液；
5)树脂吸附、洗脱:将HPD750大孔吸附树脂装入吸附柱中，然后将上述一次滤液以2-3BV/h的流速流过吸附柱进行吸附，主要吸附一次滤液中的皂甙类、色素及其他呈味物质，每根吸附柱吸附40-50倍吸附柱体积的一次滤液，吸附结束后用吸附柱体积3-4倍的浓度70-75%的乙醇为洗脱液洗脱吸附柱上吸附的皂甙类成分、部分色素及其他呈味物质，洗脱流速为l_2BV/h，收集洗脱液；
6)浓缩、二次过滤:将上述洗脱液通过单效真空蒸发器进行浓缩，得到百利度为25-30%的浓缩液，再将浓缩液经l_2um陶瓷膜过滤，得到二次滤液；
7)树脂柱脱盐:采