咪唑并吡啶-6-甲酰-氨基酸苄酯、其合成、活性和应用
【专利说明】咪畦并化惦-6-甲醜-氨基酸节醋、其合成、活性和应用 发明领域
[000。本发明涉及5种3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲醜-硝基精氨醜-氨基酸予醋， 涉及它们的制备方法、涉及它们对肿瘤生长的抑制作用，涉及它们的抗炎活性，还涉及它们 的抗血栓活性。本发明属于生物医药领域。
【背景技术】
[0002] 癌症是一组可影响身体任何部位的多种疾病的通称。使用的其它术语为恶性肿瘤 和赏生物。据世界卫生组织统计，癌症是世界上的头号死因之一，尤其是在发展中国家。而 全世界癌症死亡人数预计将继续上升，到2030年将超过1310万。因此，开发新的高效，低 毒，毒副作用小的抗肿瘤药物一直是新药研究的重要课题之一。
[0003] 随着对肿瘤特性和发病本质的认识，发明人曾经公开下式代表的3H-咪哇并[4， 5-C]化巧6甲醜-AA-OBzl(其中AA代表甘氨基酸或其它k氨基酸残基）在1 Umol/kg 剂量下显示良好的抗肿瘤活性。通过进一步研究发明人认识到，在3H-咪哇并[4, 5-C]化 巧-6-甲醜-AA-OBzl的6-甲醜基和AA-OBzl基之间插入妒-N〇2-Arg残基，不仅可W延缓 它的代谢达到提高抗肿瘤活性的目的，而且可W增加抗炎症和抗血栓活性。炎症和血栓都 是危害肿瘤患者预后的并发症。通过送种修饰，获得具有抗肿瘤，抗炎症和抗血栓H重活性 的化合物，具有良好的临床应用前景。根据送些认识，发明人提出了本发明。
[0004]
【发明内容】
[000引本发明的第一个内容是提供3H-咪哇并[4,5-C]化巧-6-甲 醜-NG-N〇2-Arg-AA-〇Bzl(式中AA选自kPhe，kGlu (OBzl)，kVal，kPro和kMet残基）。
[0006]
[0007] 本发明的第二个内容是提供制备3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲 醜-NG-N〇2-Arg-AA-〇Bzl(式中AA选自kPhe，kGlu (OBzl)，kVal，kPro和kMet残基） 的合成方法，该方法包括：
[0008] (1化-组氨酸在稀硫酸催化下与甲醒进行Pictet-Spengler缩合生成6S-4, 5,6， 7-四氨-3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-駿酸；
[0009] (2) 6S-4, 5,6, 7-四氨-3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-駿酸转化为 6S-4, 5,6, 7-四 氨-3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲酸甲醋；
[0010] (3)6S-4,5,6,7-四氨-3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲酸甲醋用高儘酸钟氧化为 3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲酸甲醋；
[0011] (4) 3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲酸甲醋在化OH溶液（2脚中皂化成3H-咪哇并 [4, 5-C]化巧-6-甲酸；
[0012] 巧)3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲酸与NG-N〇2-Arg-〇Bzl偶联得到3H-咪哇并[4， 5-C]化巧-6-甲醜NG-N〇2-Arg-〇Bzl;
[0013] 化)3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲醜-妒-N〇2-Arg-〇Bzl在化OH溶液（2脚中皂 化成3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲醜-NG-N〇2-Arg;
[0014](7)3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲醜-NG-N〇2-Arg与kPhe-OBzl, kGlu(OBzl)-OBzl，kVal-OBzl，kPro-OBzl及kMet-OBzl偶联得到3H-咪哇并[4, 5-C] 化巧-6-甲醜NG-N〇2-Arg-AA-(ffizl。
[001引本发明的第S个内容是评价3H-咪哇并[4,5-C]化巧-6-甲 醜-N6-N〇2-Arg-AA-〇Bzl对肿瘤细胞增殖的抑制作用。
[001引本发明的第四个内容是评价3H-咪哇并[4,5-C]化巧-6-甲 醜-N6-N〇2-Arg-AA-〇Bzl对肿瘤生长的抑制作用。
[0017]本发明的第五个内容是评价3H-咪哇并[4,5-C]化巧-6-甲 醜-N6-NOz-Arg-AA-OBzl的抗炎活性。
[001引本发明的第六个内容是评价3H-咪哇并[4,5-C]化巧-6-甲 醜-NG-N〇2-Arg-AA-〇Bzl的抗血栓活性。
【附图说明】
[001引 图1. 3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲醜-NG-N〇2-Arg-AA-〇Bzl的合成路线.U肥册，&0, H2S04,65°C ;U)MeOH，S0Cl2,0°C ;iii)DMF, NMM, KMn〇4;iv)NaOH，H20,0°C ;v)二环己基 碳二亚胺值CO，I-居基苯并H哇（册Bt)，N-甲基吗晰（NMM)，DMF ^UrM)H，H2〇，(rC ;vii) 二环己基碳二亚胺值CO，I-居基苯并H哇化OBt)，N-甲基吗晰（NMM)，DMF ;8a中AA = kPhe残基，8b中AA=kMet残基，8c中AA=kGlu (OBzl)残基，8d中AA=kVal残基， Se中AA=kPro残基。
【具体实施方式】
[0020] 为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。送些实施例完全是例证性的，它 们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。
[0021] 实施例1制备6S-4,5,6,7-四氨-3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-駿酸似 [0022] 冰浴下将15.Og(96.Smmol)k组氨酸置于250血圆底烧瓶中，加入50血蒸傭水， 再逐滴加入3血浓硫酸，揽拌均匀，完全溶解后加入15血甲醒溶液（40% )，6(TC反应8小 时。反应物冷却至室温，用浓氨水在冰浴下调抑至6,有大量无色沉淀析出，过滤。滤饼用 水洗并干燥，得到15g(93% )标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/z)167[M+田+。
[002引实施例2制备6S-4,5,6,7-四氨-3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲酸甲醋（3)[0024] 冰浴下在500血茄瓶里加100血甲醇，用恒压漏斗缓慢滴加10血二氯亚讽，1小 时后加入5.0邑(30臟〇1)65-4,5,6,7-四氨-3护咪哇并[4,5-(：]化巧-6-駿酸似，室温反 应3天后，TLC显示反应完全，反应混合物减压浓缩，残留物加甲醇溶解并减压浓缩。该操 作重复3次得无色泡状固体，再加己離抽干重复3次得无色粉末，最后用甲醇/己離重结晶 得4. 2g(55%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/z)181[M+田+。
[00幼实施例3制备3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲酸甲醋（4)
[002引冰浴下在100血茄瓶里加2g(7. 9mmol)6S-4,5,6,7-四氨-3H-咪哇并[4,5-c] 化巧-6-甲酸甲醋，加DMF使溶解。向该溶液中滴加ImLH己胺调抑到8,分H次加入 1.5g(9. 4mmol)高儘酸钟。反应6小时后，TLC监测反应完毕。反应物减压浓缩至干，得到 的黑色固体用INHCl溶液溶解，冰浴下滴加2N化OH溶液调抑到7,析出大量无色固体。该 固体W二氯甲焼/甲醇为洗脱剂用硅胶柱纯化，得0. 93g(66. 4% )标题化合物，为无色固 体。ESI-MS(m/z) 177[M+H]+。
[0027]实施例4制备3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-駿酸巧）
[002引冰浴下在100血茄瓶里力日3血化OH溶液（1. 5脚，IOmin后力日入 0. 93g巧.3mmol)3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲酸甲醋（4)，反应1小时后TLC显示反应 完毕，冰浴下向反应液中滴加2NHCl溶液调抑到7,析出大量无色固体。该固体W二氯甲 焼/甲醇为洗脱剂用硅胶柱纯化，得〇.56g(65%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/ z)163[M+H]+。
[0029]实施例 5 制备 3H-咪哇并[4, 5-c]化巧-6-甲醜-L-NG-N〇2-Arg-〇BzU6)
[0030] 称取194mg(l. 2mmo；L)3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-駿酸于100血茄形瓶中，加 入20mLDMF。在冰浴和揽拌下依次加入211mg(l.6mmol)册化及333mg(l.6mmol)DCC，活化 30min。称取 676mg(l. 4mmol)Tos?妒NOzArg-OBzl于 25血小H角瓶中，用DMF溶解后，用 NMM调抑至7,然后将该溶液滴加至茄形瓶的反应液中，最后用NMM调反应液抑值至8。 室温反应过夜，TLC显示反应完毕后，反应混合物减压浓缩至干，残留物加50mL二氯甲焼溶 解，过滤除去二环己基脈值CU),滤液层依次用饱和Na肥化水溶液（20mLX3)和饱和化Cl 水溶液（20mLX3)各洗3遍，己酸己醋层用无水化CI2干燥，过滤，滤液减压浓缩至干，得到 的黄色油状物经硅胶柱层析纯化（二氯甲焼/甲醇为洗脱剂），得到的淡黄色固体，经二氯 甲焼/石油離重结晶得200mg(37%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)454[M-田. Mpl84-186C. [a]D化=12. 2(c= 0. 12，甲醇）.1H-NMR巧OOMHz,DMSO-de) 5/ppm= 13. 19 (s，IH)，9. 04 (s，2H)，8. 57 (s，IH)，8. 52 (s，IH)，8. 26 (s，IH)，7. 44 (m，5H)，5. 18 (d，J= 15. 0Hz，2H)，4. 63(dd，J=甜z，J=I甜z，lH)，3. 16(m，2H)，l. 95(m，2H)，l. 59(s，2H)。
[0031] 实施例6制备3H-咪哇并[4, 5-c]化巧-6-甲醜-kNG-N〇2-Arg(7)
[0032]称取 200mg(0. 44mmol) 3H-咪哇并[4, 5-c]化巧-6-甲醜-kNG-N〇2-Arg-〇Bzl于 IOOmL茄瓶中，加甲醇溶液使原料溶解，冰浴揽拌下滴加2N化OH溶液调抑到11，冰浴下 反应3小时，TLC显示反应完毕。，冰浴下向反应液中滴加饱和硫酸氨钟溶液调抑到7,反 应化合物减压浓缩，残留物用甲醇复溶，滤去不溶物，滤液减压浓缩，得74mg(46% )标题 化合物，为无色固体。ESI-MS(m/z) ;363[M-田；Mpl66-169°C.[a]〇25 = 9. 8(c= 0. 19,甲 醇）.1H-NMR巧00MHz，DMS0-de) 5/ppm=