糖基吡喃腈类化合物及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种糖基化喃腊类化合物及其用途，具体地说，设及一种经Ξ氮挫链 接糖基的化喃腊类化合物及其在癌症诊断中的应用。
【背景技术】
[0002] 癌症作为一类世界性的医学难题是当今威胁人类生命的重大疾病之一。对于癌细 胞的早期发现可促成癌症的早期诊断及治愈，并大幅改善癌患病人的预后。研究表明癌细 胞表面含有可与特定糖类物质结合的特异糖蛋白受体，而运些糖一受体间的相互识别作用 诱发了癌细胞随后一系列的生理学发展如细胞发育和分化、细胞黏附与运动，尤其是癌细 胞的转移。对于特种癌细胞表面糖受体蛋白的灵敏检测可达到癌症早期诊断的目的。
[0003] 然而目前对于此类癌细胞糖生物探针的制备鲜有文献报道，同时，研究糖-受体 间作用的技术手段具有一定的局限性。例如近期发展的"糖微阵列"技术需要将被研究的 糖类分子修饰到特定固体材料表面并应用巧光标记的蛋白、细胞或病原体来检测其相互作 用。运类手段除需要大量的耗材、实验工作外，还需要专业技术人员进行生物样品标记，而 对于样品的修饰可导致对其原有生物特性的损害。
[0004] 因此，对于祀向癌细胞表面跨膜糖识别受体蛋白的简易、经济、高效探测是当今学 术界面临的一项重要难题。
【发明内容】
[0005] 本发明的发明人经广泛及深入的研究，设计并应用高效的"点击化学"手段，W廉 价、高生物相容度并具备长激发波的化喃腊衍生物值CM)为巧光染料合成了系列经Ξ氮挫 连接糖基的DCM化合物。将运些化合物与二硫化钢进行自组装，形成基于某些光学机制而 使巧光泽灭的糖基DCM-二硫化钢巧光生物传感平台，其可用于表面含有特异糖识别受体 癌细胞及肿瘤组织的"巧光增强式"检测。
[0006] 本发明一个目的在于，提供一种结构新颖的糖基化喃腊类化合物。
[0007] 本发明所述糖基化喃腊类化合物，其为式I所述化合物、或其异构体，
[0008]
[0009] 式I中，Ri为Cl~C4直链或支链烷基，R2为式II所示基团：
[0010]
[0011]其中，Rs~R5分别独立选自：氨做、径基（-0H)、乙酷基取代的氨基
中一种。
[0012] 本发明另一个目的在于，掲示上述糖基化喃腊类化合物的一种用途，即式I所述 化合物、或其异构体在制备检测凝集素、癌细胞表面糖受体蛋白和肿瘤组织的巧光生物传 感器（或称巧光"关开式"生物传感器）中应用。
[0013] 此外，本发明还有一个目的在于，提供一种制备式I所述化合物的方法，所述方法 的主要步骤是：在有硫酸铜和抗坏血酸钢存在、15°C~35°C和揽拌条件下，由式III所示化 合物与式IV所示化合物反应，得到目标化合物（式I所述化合物）。
[0014]
【附图说明】
[0015] 图1.用于细胞检测的薄层二硫化钢的透射电镜图；
[0016] 图2.薄层MoSz与化合物IA、IB和1C复合材料的细胞标记图；
[0017] 图3.薄层MoSz与化合物IA复合材料的选择性组织切片标记图。
【具体实施方式】
[0018] 在本发明一个优选的技术方案中，Ri为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正下基或叔下 基等。
[0019] 在本发明另一个优选的技术方案中，R2为式II所示基团，其中，R3为H，R4和Rs分 别独立选自：
^一种；
[0020]在更优选的技术方案中，Rs为H，R4为-0H或
[0021] 在更进一步的技术方案中，R2为下列基团中一种：
[0022]
[002引其中，A地N为
的简记式。
[0024] 在本发明又一个优选的技术方案中，本发明提供了一种用于检测凝集素、癌细胞 表面糖蛋白受体和肿瘤组织的巧光生物传感器（或称巧光"关开式"生物传感器）的构建方 法。所述的巧光生物传感器主要由本发明提供的糖基化喃腊类化合物（式I所示化合物， 或其异构体）通过范德瓦尔兹力吸附于薄层二硫化钢上，发生自组装行为而得到。
[00巧]其中，所述薄层二硫化钢的水分散液由主要步骤如下的方法制得：
[0026] 将适量二硫化钢粉末置于乙醇/水的混合液中，室溫下，超声3小时，离屯、，取离屯、 管上层液体，得到薄层二硫化钢的乙醇/水分散液，减压蒸馈除去乙醇后，放入烘箱烘干， 制得薄层二硫化钢粉末，将粉末置于超纯水（电阻率大于18ΜΩcm1的水）中，超声10分 钟，即得薄层二硫化钢的水分散液。
[0027] 此外，前文所述制备方法中所设及的式III所示化合物与式IV所示化 合物，其制备方法，请分别参见：Gan,Z. -H&Roy,R.Can.J.Chem. 2002, 80, 908-916 ; Shaikh,N.etal.Mol.Divers. 2011, 15, 341-345 ;和vanKasteren,S.I.etal.Nature 2007,446, 1105-1109。
[0028] 下面通过实施例对本发明作进一步阐述，其目的仅在于更好理解本发明的内容。 因此，所举之例不限制本发明的保护范围。
[0029] 实施例1
[0030] 式IA所示化合物（简记为化合物IA，下同）的制备：
[0031]
[0032] 将化合物IVA(141mg，0. 65mmol)和化合物IIIA(285mg，0. 71mmol)置于 10血叔 下醇中，再依次加入N，N-二甲基甲酯胺（DMF) (2血）、水（2血）和化S〇4· 5&0 (325mg， 1.3mmol)，抗坏血酸钢（Vc化）（509mg，2. 6mmol)，氣气保护下，室溫揽拌过夜。薄板层析 灯LC)跟踪反应，至原料点消失，所得混合液经浓缩至浆状，加入5血乙醇，再浓缩至浆状， 如此反复Ξ次。残余物经硅胶柱层析分离提纯（二氯甲烧：甲醇=15:1，V/V)，得到341mg 黑红色固体（化合物ΙΑ)，得率为85%。
[0033] 古匪R(400MHz,MeOD)δ7.95 (S, 1Η), 7.49 (S, 1Η), 7.46 (S, 1田，7.41 (d，J= 15. 9Hz,IH)，6. 76 (d,J= 15. 9Hz,IH)，6. 67 (s,IH)，6. 65 (d,J= 2.OHz, 2H)，6. 51 (d,J= 2. 0Hz，lH)，5. 49(s，lH)，4. 75(d，J = 12. 7Hz，lH)，4. 64(t，J = 5. 9Hz，2H)，4. 20(d，J = 7. 7Hz, IH)，3. 93 (t, J = 5.細z, 2H)，3. 78 (d, J = 2. 5Hz, IH)，3. 77 - 3. 73 (m, IH)，3. 69 (dd, J =11. 4, 5. OHz, IH), 3. 51(dd, J = 9. 7, 7. 7Hz, IH), 3. 46 - 3. 43(m, IH), 3. 43 - 3. 37(m, IH), 2. 89(s，3H), 1.40(s，9H) ;"C NMR(400MHz，Me孤）δ 173. 9, 162. 3, 158.6, 151.8, 146. 0, 139. 9, 131. 1，126. 2, 124.6, 116. 7, 116.6, 114. 5, 113. 1，106. 4, 103. 9, 103. 1，76.8, 74. 9, 72. 5， 70. 3, 62.8, 62.6, 57. 4, 53. 2, 38.6, 37. 7, 30.8, 28. 4.
[0034]服-E幻HMS (πι/ζ):理论值（calcd for)〇32&具〇/619. 2880,实验值（found) 619. 2884。
[00对 实施例2
[003引化合物IB的制备：
[0037]
[0038] 将化合物IVB(150mg，0. 58mmol)和化合物IIIB(228mg，0. 64mmol)置于 10血叔 下醇中，依次加入DMF(2血）、水（2血）和CuS〇4· 5&0 (290mg，1. 16mmol)，Vc化(455mg， 2. 32mmol)，氣气保护下，室溫揽拌过夜。TLC跟踪反应，至原料点消失，所得混合液经浓缩至 浆状，加入5mL乙醇，再浓缩至浆状，如此反复Ξ次。残余物经硅胶柱层析分离提纯（二氯 甲烧：甲醇=10:1，V/V)，得到283mg黑红色固体（化合物IB)，得率79 %。
[0039] iH匪R(400MHz,MeOD)δ8. 10 (d,J= 8. 2Hz, 0. 5H)，7. 89 (S, 1H)，7. 44 (t,J =12.0Hz，3