一种具有神经保护作用的化合物及医用用图
【技术领域】
[0001] 本发明公开一种具有神经保护作用的化合物及医用用途，设及本发明所述的化合 物和药学上可接受的盐，W及它们在治疗对神经毒素损伤的神经细胞系具有明显的修复 作用中的用途、W及在制造用于运类治疗的药物中的用途，属于医药技术领域。
【背景技术】
[0002] 帕金森病（PD)是一种慢性中枢神经系统退化性失调。它会损害患者的肢体功能， 语言能力等，临床表现为休息性震颤、僵直、运动迟缓和姿势不稳定性与认知和情感障碍。 它的病因目前仍不明确，但其主要病理特征为黑质致密部中多己胺能神经元的损失和被称 为路易体的胞浆内包含体的存在。
[0003] 6-径基多己胺化-0HDA)是一种广泛地用于在实验动物中诱导帕金森综合征的化 学物质化ane&Dunnett，2008)。6-0HDA经由多己胺和去甲肾上腺素重吸收转运蛋白进入神 经元。因此，6-0HDA通常与选择性去甲肾上腺素重吸收抑制剂（比如地昔帕明）一起使 用W选择性地仅杀死多己胺能神经元。在体外，多己胺的氧化可导致6-0HDA的产生，所 W6-0HDA被认为是内源性毒素（Jellingeretal.，1995)。确实的证据表明6-0HDA产生活 性氧簇，并降低谷脫甘肤和过氧化物歧化酶的活性度etarbetetal.,2002)。在脑内注射 6-0HDA之后，纹状体神经元在24小时内开始变性，并且在2-3天后纹状体多己胺耗尽。
[0004] 近年来，部分合成小分子物质被证明具有神经保护的活性。
【发明内容】
[0005] 本发明目的在于提供了一种具有神经保护作用的化合物。
[0006] 本发明公开了该化合物的制备方法，可W用于工业化生产。
[0007] 本发明进一步公开了所述化合物在神经保护作用方面的药物应用。
[0008] 本发明的具有神经保护作用的化合物，所述化合物具有W下化学式：
具体化学式为： 化合物 4a 脚=H,r2 =COzEtr3 =Pli, r4 =H, X=巧 化合物 4b 脚=H,r2 =COzEtr3 =Pli, r4 =Pli, X= S) 化合物 4c 脚=H, r2 =C〇2化，R3 =Pli, r4 = S-MeOCsH*,X=S) 化合物 4e 脚=H, r2 =C〇2化，R3 =Pli, r4 = 2-化CeH*,X=S) 化合物 4e 脚=4-Me,r2 =COzEtr3 = Pli,r4 = Pli, X=巧 化合物 4f 脚=4-Br,r2 =COzEtr3 = Pli,r4 = Pli, X= S) 化合物 4g脚=H,r2 =C〇2化，R3 =A-MeOCsHs,r4 =Pli,X=S) 化合物地脚=H,r2 =COzEtr3 =Pli,r4 =Pli,X=Se)
本发明的积极效果在于：公开了化学结构式I在制备神经保护药物中的新用途，可W对神经毒素损伤的神经细胞系具有明显的修复作用，用于制备神经保护药物。
【附图说明】
[0009] 图1为4a对6-0HDA损伤的DPC12细胞的存活率的影响； 图2为4b对6-0HDA损伤的DPC12细胞的存活率的影响； 图3为4c对6-0HDA损伤的DPC12细胞的存活率的影响； 图4为4d对6-0HDA损伤的DPC12细胞的存活率的影响； 图5为4e对6-0HDA损伤的DPC12细胞的存活率的影响； 图6为4f对6-0HDA损伤的DPC12细胞的存活率的影响； 图7为4g对6-0HDA损伤的DPC12细胞的存活率的影响； 图8为4h对6-0HDA损伤的DPC12细胞的存活率的影响。
【具体实施方式】
[0010] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，运些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明范围。此外应理解，在阅读了本发明的内容之后，本领域技术人员可 W对本发明作各种改动或修改，运些等价形式同样落于本申请所附后权利要求书限定的范 围。
[0011] W下试验表明本发明所述化学式的化合物具有明显神经保护作用，可在治疗或预 防老年痴呆和帕金森药物或保健品中应用： 实验例1: 本发明W细胞存活率为指标，通过MlT法检测的结果，反映4a样品对抗神经毒素 6-0HDA的毒性作用大小，W说明其神经保护作用。
[0012] 取对数生长期的PC12细胞，用完全培养基稀释成3*105个/ml的细胞悬液，每孔 100y1接种于96孔板，置于37°C，5%C02培养箱中培养2地。移去培养基，加入100y1的 4a溶液(终浓度10ymol/ml，20ymol/ml，由基础培养基作为溶剂配制)，模型组和对照组分 别加入100y1基础培养基，每组4个复孔。药物预处理化后，在给药组与模型组分别加入 6-0HDA(终浓度为100ymol/1)，培养2地，加入5mg/ml的MTT10y1，37°C培养箱中培养 4h。弃去上清后每孔加入DMSO150yI，震荡均匀，于540nm波长处测定各孔吸光度值来反 映PC12细胞的存活率。 阳01引 上述MlT测定结果显示(参考图1，细胞由4a(IOyM, 20yM，40yM)预处理化，而 后加入100ym6-0HDA处理2地。数据均W对照组的百分比呈现，相比对照组##邮<0. 001， 相比模型组（100ym6-0HDA)卸<0. 05)，在只加入6-0HDA时，细胞存活率较对照组明显下 降，说明6-0HDA对PC12细胞具有明显的损伤作用；4a与6-0HDA共解育时，可W明显抑制 细胞存活率的下降，说明4a具有显著的神经保护作用。
[0014] 6-0HDA损伤PC12细胞模型是研究帕金森病常用的神经细胞模型，结合W上化学 分析，可见，4a具有神经保护作用。 阳〇1引 实验例2: 本发明W细胞存活率为指标，通过MlT法检测的结果，反映4b样品对抗神经毒素 6-0HDA的毒性作用大小，W说明其神经保护作用。
[0016] 取对数生长期的PC12细胞，用完全培养基稀释成3*105个/ml的细胞悬液，每孔 100y1接种于96孔板，置于37°C，5%C02培养箱中培养2地。移去培养基，加入100y1的 4b溶液(终浓度10ymol/ml，20ymol/ml，由基础培养基作为溶剂配制)，模型组和对照组分 别加入100y1基础培养基，每组4个复孔。药物预处理化后，在给药组与模型组分别加入 6-0HDA(终浓度为100ymol/1)，培养2地，加入5mg/ml的MTT10y1，37°C培养箱中培养 地。弃去上清后每孔加入DMSOISOiil，震荡均匀，于540nm波长处测定各孔吸光度值来反 映PC12细胞的存活率。
[0017] 上述MlT测定结果显示(参考图2,细胞由4b(IOyM, 20yM，40yM)预处理化，而 后加入100ym6-0HDA处理2地。数据均W对照组的百分比呈现，相比对照组##邮<0. 001， 相比模型组（100ym6-0HDA)*p<0. 05，***p<0. 001)，在只加入6-0HDA时，细胞存活率较对 照组明显下降，说明6-0HDA对PC12细胞具有明显的损伤作用；4b与6-0HDA共解育时，可 W明显抑制细胞存活率的下降，说明4b具有显著的神经保护作用。
[0018] 6-0HDA损伤PC12细胞模型是研究帕金森病常用的神经细胞模型，结合W上化学 分析，可见，4b具有神经保护作用。
[0019] 实验例3: 本发明W细胞存活率为指标，通过MlT法检测的结果，反映4c样品对抗神经毒素 6-0HDA的毒性作用大小，W说明其神经保护作用。
[0020] 取对数生长期的PC12细胞，用完全培养基稀释成3*105个/ml的细胞悬液，每孔 100y1接种于96孔板，置于37°C，5%C02培养箱中培养2地。移去培养基，加入100y1的 4c溶液(终浓度10ymol/ml，20ymol/ml，由基础培养基作为溶剂配制)，模型组和对照组分 别加入100y1基础培养基，每组4个复孔。药物预处理化后，在给药组与模型组分别加入 6-0HDA(终浓度为100ymol/1)，培养2地，加入5mg/ml的MTT10y1，37°C培养箱中培养 地。弃去上清后每孔加入DMSOISOiil，震荡均匀，于540nm波长处测定各孔吸光度值来反 映PC12细胞的存活率。 阳02U 上述MT测定结果显示(参考图3,细胞由4c(IOyM，20yM，40yM)预处理化，而 后加入100ym6-0HDA处理2地。数据均W对照组的百分比呈现，相比对照组##邮<0. 001， 相比模型组（100ym6-0HDA)***p<0. 001)，在只加入6-0HDA时，细胞存活率较对照组明显 下降，说明6-OHDA对PC12细胞具有明显的损伤作用；4c与6-OHDA共解育时，可W明显抑 制细胞存活率的下降，说明4c具有显著的神经保护作用。
[0022] 6-0HDA损伤PC12细胞模型是研究帕金森病常用的神经细胞模型，结合W上化学 分析，可见，4c具有神经保护作用。
[0023] 实验例4: 本发明W细胞存活率为指标，通过MlT法检测的结果，反映4d样品对抗神经毒素6-0HDA的毒性作用大小，W说明其神经保护作用。
[0024] 取对数生长期的PC12细胞，用完全培养基稀释成3*105个/ml的细胞悬液，每孔 100y1接种于96孔板，置于37°C，5%C02培养箱中培养2地。移去培养基，加入100y1的 4d溶液(终浓度10ymol/ml，20ymol/ml，由基础培养基作为溶剂配制)，模型组和对照组分 别加入100y1基础培养基，每组4个复孔。药物预处理化后，在给药组与模型组分别加入 6-0HDA(终浓度为10