马齿苋中新生物碱Oleracone及其提取分离方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药提取、分离领域，尤其涉及一种从马齿苋药材中提取、分离和鉴别 出的新骨架生物碱及其提取分离方法。
【背景技术】
[0002] 马齿苋（/fertoJacaoJeraceaL.)为马齿苋科植物，2015版《中华人民共和国药 典》中收载马齿苋的干燥地上部分入药，具有清热解毒、凉血止血、止痢等功效，用于热毒血 痢、痈肿疔疮、湿疹、丹毒、蛇虫咬伤、便血、痔血、崩漏下血等。现代药理学研究表明，马齿苋 具有抗菌抗病毒、降血压、降血脂、抗氧化、抗癌、松弛骨骼肌和平滑肌、消炎止痛、调节免疫 功能等作用；这些药理作用与其主要化学成分包括黄酮类、香豆素、萜类、留类、生物碱、氨 基酸、各种色素类和矿物质类等有很大关系。其中生物碱是马齿苋中一类主要的化学成分， 马齿苋中含有去甲肾上腺素、多巴胺、少量多巴、腺苷、尿嘧啶、腺嘌呤、N，N-二环己基脲、尿 囊素、N-反式-阿魏酰基酪胺；还有环二肽生物碱和酰胺类生物碱：马齿苋酰胺A、B、C、D、 E、F、G、H(OleraceinA-Η)等。但是，对本发明中马齿苋新骨架化合物的分离和药理活性 研究未见报道。
[0003] 目前，从马齿苋中分离出的化学成分大多数是已知的，并且是药理活性比较弱的， 因此对马齿苋中新化合物的开发和分离是亟待需要的。
【发明内容】
[0004] 针对上述问题，本发明提供一种简便、环保、快速，纯度高的马齿苋中新生物碱 Oleracone及其提取分离方法。
[0005] 为实现本发明的上述目的，本发明提供一种马齿苋中新生物碱，分子式为 C14H17N02,命名为Oleracone，化学结构式如下。
[0006] 本发明还提供一种马齿苋中新生物碱Oleracone的提取分离方法，包括以下步 骤。
[0007] 步骤1、取马齿苋干燥药材，采用水煎煮提取，水提液过滤，合并滤液直接浓缩，得 药液备用。
[0008] 步骤2、将步骤1中所得药液直接经预处理过的大孔吸附树脂吸附除杂，分别以水 和乙醇洗脱，对乙醇洗脱液进行减压浓缩，得到浓缩液备用。
[0009] 步骤3、将步骤2中浓缩液用乙酸乙酯反复多次萃取，减压回收乙酸乙酯至浸膏， 得到乙酸乙酯萃取物。
[0010] 步骤4、将步骤3中乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析分离，依次用石油醚-丙酮梯度 洗脱得到130个洗脱部位，按顺序记为洗脱部位1-130,经薄层色谱进行检测，显色，合并 90-130洗脱部位，将合并后的洗脱部位经减压浓缩至干，备用。
[0011] 步骤5、将步骤4中所得物再经0DS柱层析分离，用甲醇-水（30/70,v/v)等度洗 脱，得到10个洗脱部位，按顺序记为部位1-10,经薄层色谱进行检测，显色，将洗脱部位3减 压浓缩至干，得浓缩物备用。
[0012] 步骤6、将步骤5中所得浓缩物经S印hadexLH-20 (羟丙基葡聚糖凝胶)，以甲 醇-水（50/50,v/v)等度洗脱得到新骨架生物碱化合物。
[0013] 本发明马齿苋中新生物碱01eracone在制备抗炎药物中的应用。
[0014] 与现有技术相比本发明的有益效果。
[0015] 本发明提供的马齿苋中新生物碱Oleracone及其提取分离方法，依次用水煎煮提 取、大孔吸附树脂、乙酸乙酯萃取、硅胶柱层析、0DS中压柱和S印hadexLH-20,成功的分离 出马齿苋新骨架生物碱，这种化合物可以作为其他化合物合成先导物，以及新药开发和药 理活性研究的原料，也可用于制备抗炎药物。
【附图说明】
[0016] 图1为本发明马齿苋中新生物碱Oleracone的结构式。
[0017] 图2为本发明马齿苋中新生物碱Oleracone的IR谱图。
[0018] 图3为本发明马齿苋中新生物碱Oleracone的质谱谱图。
[0019] 图4为本发明马齿苋中新生物碱Oleracone的13C谱图。
[0020] 图5为本发明马齿苋中新生物碱Oleracone的1Η谱图。
[0021] 图6为本发明马齿苋中新生物碱Oleracone的DEPT谱图。
[0022] 图7为本发明X射线单晶衍射谱图。
[0023] 图8为本发明马齿苋中新生物碱Oleracone的H-HCOSY谱图。
[0024] 图9为本发明马齿苋中新生物碱Oleracone的HSQC谱图。
[0025] 图10为本发明马齿苋中新生物碱Oleracone的N0ESY谱图。
[0026] 图11为本发明马齿苋中新生物碱Oleracone的HMBC谱图。
[0027] 图12为oleracone对LPS刺激RAW264. 7细胞产生N0的抑制作用示意图。
【具体实施方式】
[0028] 下面结合具体实施例进一步详细说明本发明。
[0029] 本实施例提供一种马齿苋中新生物碱Oleracone，分子式为C14H17N02，命名为 Oleracone，结构式请参阅图1〇
[0030] 请参阅图2-11，本发明马齿苋中新生物碱Oleracone的结构鉴定与推导。
[0031] 黄色粉末，易溶于氯仿和甲醇，不溶于水。喷稀碘化铋钾试液呈阳性反应， [a]20D+5-2(c0. 6,Me0H),UV(MeOH)λη3χ: 360,255nm,IRvNH 3425.8,v=CH3193.8, vcH 2949. 8，vc=。1700. 2，vc=c 1590. 1，^NH 1548. 4，JNH 1506. 8,ESI-MS给出M/Z: 232. 1326[M+H]+的准分子离子峰，分子量为231. 1255。结合13CNMR/HNMR以及DEPT数 据，推测该化合物分子式为C14H17N02，不饱和度为7。根据13CNMR谱和DEPT谱显示14 个碳信号，分别为4个伯碳（23. 25,29. 28,29. 28,30. 52)，一个仲碳（48. 35)和两个叔碳 (127. 1，137. 2)，7 个季碳（171. 3, 205. 5,149. 0,158. 4,126. 5,126. 7, 59. 78)。根据分子式 计算，新生物碱的不饱和度为7。新生物碱的1H-NMR低场区有2个烯氢信号：7. 09(1H，s)， 6. 86 (1H，s)，结合13C-NMR谱、DEPT谱，提示具有2个-CH=C-结构片段。1H-NMR高场区 δ1.40(6?s)显示磁等同的两个甲基信号。13C-NMR中δ205. 5及171. 3为两个羰基信号。 对化合物进行X单晶衍射分析，确定其上述结构。其1H-NMR及13C-NMR归属如表1所示，经 文献检索，未见报