利用工业化生产食用菌废弃菌渣发酵提取黄腐酸的新方法

文档序号:9575216阅读:1178来源:国知局
利用工业化生产食用菌废弃菌渣发酵提取黄腐酸的新方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物技术领域,特别涉及利用工业化生产食用菌的废弃菌渣提取黄腐 酸的新方法。
【背景技术】
[0002] 黄腐酸(化IvicAcids,代号FA)主要是一类含活性官能团的大分子芳香-脂肪 族居基駿酸的复杂混合物。其具有分子量小、活性基因高、改良±壤、提高地温、促使根系发 达,有效地调节±壤酸碱度、解决±壤板结等方面的独特功效。在气候干燥情况下,缩小作 物气孔开张度,抗旱保收。其应用主要如下:
[0003] 黄腐酸与其它无机化肥(如氮、磯、钟等)配合使用,能固氮、解磯、缓释钟,促使有 效成份转化,尽快被作物吸收利用,提高各种有效成份利用率在80%W上。
[0004] 黄腐酸在蔬菜上的应用;主要是防止蔬菜±壤重巷污染,重巷病菌感染;能有效 地破坏±壤病菌繁殖;增强±壤团粒结构,促使作物根系发达,多生根,生新根,提高植株抗 病能力,刺激蔬菜生长,增强作物光合作用,使蔬菜生长旺盛,提高单位面积产量,增加菜农 收入。黄腐酸在果树上的应用:能促使果树根系发达,提高肥料利用率,提高坐果率,增强 鲜果色泽,改善果实品质,收获后耐储存,防止根腐病,对果树的病棵、病枝有很好的调理作 用。
[0005] 国内外关于黄腐酸的研究比较多,前期主要侧重于从泥炭、风化煤、褐煤中进行提 取。主要的提取方法有化学提取法(针对不同的原料选择相应的化学试剂进行提取)、化学 氧化法、高温氧化法等。近些年随着生化黄腐酸的兴起,采用不同微生物对农作物废弃枯杆 W及农产品和经济作物加工废料进行发酵和生物转化,使有机废弃物能够转化成黄腐酸W 及其它能够被植物利用营养物质。
[0006] 总的来说国内外对黄腐酸的提取W及黄腐酸对农作物的作用做了大量的工作,但 是关于食用菌废弃物黄腐酸的提取,国内外还没出现相应的研究。目前国内工业化生产食 用菌产量已经达到每年2000万吨W上,而作为废弃物食用菌菌渣则含有较高的腐殖酸、菌 体多糖、氨基酸等活性物质,大部分企业采用直接丢弃或者W低廉的价格卖给发电厂等,没 有形成对食用菌废弃物的环保、安全和高效的利用。
[0007] 目前,我国工业化生产的食用菌菌渣产量巨大,然而如何对菌渣进行环保有效的 处理,却一直没有得到很好的解决;每年大量的菌渣和废菌棒或就地堆置,或直接施入田 中,不仅造成了农业有机资源的巨大浪费;而且造成杂菌繁殖、觸虫滋生,破坏了周围生态 环境,,,也给附近食用菌产业造成了巨大危胁。
[0008] 因此,迫切需要提供一种简单、高效、处理时间短、适用范围广的食用菌菌渣回收 利用方法。

【发明内容】

[0009] 针对上述问题,本发明利用工业化生产平茹、杏鲍茹、金针茹、白玉茹的废弃物菌 渣为主要原料,辅助添加适当的碳源,根据食用菌菌渣分解原理、微生态平衡原理选择性能 优良的有益菌种对菌渣进行再发酵,菌种之间互生互利,互不枯抗,发酵周期约1个月,使 微生物能够充分分解菌渣里的纤维素等植物难W直接利用的物质,使其转化为植物能利用 的营养物质。经测定其发酵后黄腐酸含量达到35%W上,经过提取可得到黄腐酸粗品30% (占干物质百分比)左右,使食用菌菌渣得到充分的利化因此本发明对于国内食用菌废弃 物黄腐酸的提取,具有重要经济和环境意义。
[0010] 为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
[0011] 一种利用工业化生产食用菌废弃菌渣提取黄腐酸的新方法,采用枯草芽抱杆菌、 热带假丝酵母菌、拟康氏木霉菌、对食用菌废弃菌渣进行混合发酵,从发酵后的菌渣中提取 黄腐酸。
[0012] 优选的是,所述食用菌为平茹、杏鲍茹、金针茹或白玉茹中的一种或多种。
[0013] 上述方法包括如下步骤,
[0014] (1)取枯草芽抱杆菌、热带假丝酵母菌、拟康氏木霉菌、分别进行二级培养,得相应 的二级种子液;
[0015] (2)将枯草芽抱杆菌、热带假丝酵母、拟康氏木霉、的二级种子液分别接种到 10化-100化的发酵罐中,发酵28--4她,得相应的发酵种子液;
[001引 做菌渣的培养:称取菌渣、水、款皮、糖,发酵种子液加入菌渣中,充分揽拌置于 通风发酵池,于20~4(TC下通风发酵4-5天,得菌渣培养物;
[0017] (4)黄腐酸的提取:取发酵好的菌渣加入摩尔浓度为0.Imol/L的化0H溶液,于提 取池中60~65°C处理6~7个小时,过滤,将滤液泉入沉淀池,然后用浓硫酸调至抑值为 2,静置1-化,过滤,分离,上清液即为黄腐酸溶液,沉淀为踪黑腐殖酸;
[0018] (5)将上清液抑调至中性,喷雾干燥,即得淡黄色的黄腐酸粉末。
[0019]优选的是,步骤(2)中,所述枯草芽抱杆菌、热带假丝酵母菌、拟康氏木霉菌的接 种量之比为5~6;5~6;8~9;
[0020] 优选的是,步骤(3)中,所述湿菌渣、款皮和糖的质量比为30-40 ;1-5 ;0. 5-1 ;所 述枯草芽抱杆菌:热带假丝酵母菌:拟康氏木霉菌的接种量之比为1~2:1~3:1~2; [002。 优选的是,步骤(6)中,所述发酵好的菌渣和化0H溶液的质量比为1~5:5~30。
[0022] 优选的是,步骤(1)中,所述的种子培养基为LB液体培养基或±豆汁液体培养基。
[0023] 进一步地,所述的LB液体培养基的配制方法为;称取化化lOg,蛋白腺lOg,酵母 提取物5g,分别加入1000ml水中,调节抑值为7. 0,121~125°C灭菌20~25min;
[0024] 所述的化化、蛋白腺、酵母提取物的质量比为;2~5 ;2~5 ;1。
[0025] 优选的是,步骤(4)中,所述的待接种菌渣的水分含量为50% -70%。
[0026] 本发明有益的效果是:
[0027] 1.本发明主要利用微生物对菌渣进行发酵转化生产生化黄腐酸,使食用菌生产中 的废料得到了很好的利用,并且进行了工业扩大,创造了相应的经济价值并且使资源得到 了循环利用。
[0028] 2.本发明的黄腐酸产量高达30%W上。最佳发酵时间为4-5天。喷雾干燥后黄 腐酸粉经容量滴定法测定其含量达到85% -90%。
【附图说明】
[0029] 图1本发明生产黄腐酸红外光谱图
[0030] 图2市售生化黄腐酸红外光谱扫描图
【具体实施方式】
[0031] 下面结合附图对本发明进行进一步的阐述。应该说明的是,下述说明仅是为了解 释本发明,并不对其内容进行限定。
[0032] 实施例1:
[0033] 1菌种
[0034] 枯草芽抱杆菌度acillussubtilis)为中国微生物菌种保藏管理中必的编号为 CGMCC1. 210的菌株;枯草芽抱杆菌CGMCC1. 210产α-淀粉酶活力很强。
[0035] 拟康氏木霉(Trichodermapseudokoningii)为中国工业微生物菌种保藏管理中 必的编号为CMCC3. 6612的菌株;产纤维素酶活力很高
[0036] 热带假丝酵母(Candidatropicalis)为中国工业微生物菌种保藏管理中必的编 号为CMCC2. 402的菌株;可同化五碳糖。
[0037] 2具体方法
[0038](1)培养基:枯草芽抱杆菌种子培养基:LB培养基;热带假丝酵母、拟康氏木霉种 子培养基;PDA培养基;
[0039](2)-级种子液的制备;将枯草芽抱杆菌、接种于LB培养基中32°C培养1她,热带 假丝酵母和拟康氏木霉菌菌种分别接种于PDA中,3(TC分别培养摇瓶培养32-4化作为种 子液;
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