Chem, 226:497-509)从粪便提取总脂质。如图IOc和IOd中显示的，在⑶CArg处理的小鼠 中粪便中的脂肪含量显著较高（第12-13周）。因此，不受任何特定的作用理论或机制约 束，看起来像是⑶CArg至少部分地抑制睾丸脂肪吸收。相反地，如由HFD+⑶CArg组中的比 HFD组中的显著地高的血浆白蛋白水平指示的，看起来像是蛋白吸收不因补饲CDCArg而折 损（图IOe)。CDCArg对胰岛素抵抗的影响利用腹膜内葡萄糖耐受测试（IPGTT)来评价。 在研究的第八和第十四周期间在小鼠中评价葡萄糖耐受（在用CDCArg开始处理之前和之 后）。在空腹12小时的小鼠中通过腹腔内注射葡萄糖（2g/kg的20%溶液）进行IPGTT。 通过切割尾尖获得血液样品并在0、30、60、90和120分钟后测量葡萄糖浓度。⑶CArg通过 降低IPGTT中的葡萄糖峰值并减小血糖反应曲线下的面积来改善代谢参数（图11)。
[0329] -保护肝脏免于HFD :与HFD组相比，在HFD+CDCArg组中SGPT和SGOT水平显著较 低（图12a，b)，而血浆中的碱性磷酸酶水平无显著变化（图12c)。一致地，在HFD+CDCArg组 中肝脏重量也显著地较低。有趣的是，在HFD+⑶CArg组中的肝脏重量甚至低于对照（LFD) 组中的（图12d)。与以上结果一致，组织学评价揭示了 HFD+⑶CArg组中的肝脏小泡性和大 泡性脂肪变性少于HFD组中的（图12e)。在对照组中也观察到小叶炎症，但在HFD+⑶CArg 组中未观察到。
[0330] -对肝脏中的能量消耗基闵和脂肪牛成基闵的影响：
[0331] 基因表达分析显示⑶CArg激活与能量消耗相关的基因，即，PGCla (过氧化物 酶体增殖物激活受体γ共激活物I-α )和PPAR α (过氧化物酶体增殖物激活受体α )， 其可以加速线粒体的脂肪氧化。另外，发现CDCArg抑制调节新生脂肪生成的关键基因 SREBPlc(固醇调节元件结合蛋白Ic)的蛋白表达（图13)。在任何处理中均未观察到在 AMPK(5'腺苷单磷酸激活蛋白激酶）激活上的统计差异。但是，磷酸化的AMPK(pAMPK)与 AMPK的比率倾向于在HFD+CDCArg处理组中较高。
[0332] PPARa和PGCla的基因表达分析通过经由反转录和实时PCR定量mRNA水平来进 行。GAPDH(甘油醛3-磷酸脱氢酶）被用作看家标准化基因。使用以下引物：
[0333] PPAR-a f-5'-GTCACACAATGCAATTCGCTTT-3'（SEQ ID NO :1)
[0334] PPAR-a r-5'-TTTGCTTTTTCAGATCTTGGCA-3'（SEQ ID NO :2)
[0335] PGC-I a f-5,-AAACCCTGCCATTGTTAAG-3,（SEQ ID NO :3)
[0336] PGC-I a r-S，-TGACAAATGCTCTTCGCTTT-3,（SEQ ID NO :4)
[0337] GAPDHf-5'-GCATCTTGGGCTACACTGAG-3'（SEQ ID NO :5)
[0338] GAPDHf-S，-AGAGTGGGAGTTGCTGTTGA-3,（SEQ ID NO :6)
[0339] 通过使用β -肌动蛋白作为对照的蛋白质印迹分析来分析SREBPlc。Abs: 抗 SREBP-lSanta Cruse (Sc-367);第二山羊抗兔 IgG，Jackson ImmunoResearch，鼠 抗肌动蛋白（612656)BD Transduction Laboratories。第二山羊抗鼠 IgG，Jackson ImmunoResearch0
[0340] AMPK和pAMPK的水平利用蛋白质印迹分析来分析。
[0341] 前面对特定实施方案的描述将如此充分地揭示本发明的一般性质，以致其他人通 过应用现有知识可以容易地修改和/或改编此类特定的实施方案用于多种应用，而不需要 过多的实验且不偏离一般性概念，并且因此，此类改编和修改应该并意图被理解为在所公 开的实施方案的等同物的意义和范围之内。要理解，本文中采用的措辞或术语是为了描述 的目的而不是限制性目的。用于实现各种所公开的化学结构和功能的手段、材料和步骤可 以采用多种替代形式，而不偏离本发明。
【主权项】
1. 一种用于治疗与代谢综合征相关的疾病或素乱的药物组合物，所述药物组合物包含 作为活性成分的具有式III的结构的化合物或其药学上可接受的盐：其中： (i)A选自：B是 0H; m是1到10的整数； Ria每次出现独立地代表精氨酸、赖氨酸、组氨酸或鸟氨酸的侧链； Rib是脈基下胺的侧链；且 R2代表H、C1-C4烷基或M，其中Μ是反离子； 或 m)A是-OR4; B是：η是1到10的整数； X是0或ΝΗ; R3每次出现独立地代表精氨酸、赖氨酸、组氨酸或鸟氨酸的侧链；且R4代表Η、C1-C4烷基或Μ，其中Μ是反离子。2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述化合物选自由W下组成的组： (i)具有式（la)的结构的化合物或其药学上可接受的盐：(ii) 具有式（扣）的结构的化合物或其药学上可接受的盐：(iii) 具有式（Ic)的结构的化合物或其药学上可接受的盐：其中Rla和Rib如W上所定义。3.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述化合物具有式（II)或其药学上可接受 的盐的结构：其中R4如W上所定义。4. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中X是NH。5. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中X是0。6. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中R2和R4各自是乙基。7. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述化合物是碟脱氧胆酸的衍生物。8. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述化合物是熊脱氧胆酸的衍生物。9. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中R2和R4各自独立地选自锭、碱金属阳离子 和碱±金属阳离子。10. 根据权利要求9所述的药物组合物，其中Μ选自由化\Mg"、Ca"和锭组成的组。11. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述化合物选自由W下组成的组：9 及其药学上可接受的盐。12. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述化合物具有化合物（1)的结构。13. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中与代谢综合征相关的所述疾病或素乱选 自由W下组成的组：肥胖、超重、血脂异常、高血糖症、高瘦素血症、高膜岛素血症、糖尿病前 期、2型糖尿病、高血压和脂肪肝素乱。14. 根据权利要求13所述的药物组合物，其中与代谢综合征相关的所述疾病或素乱选 自由肥胖和超重组成的组。15. 根据权利要求13所述的药物组合物，其中与代谢综合征相关的所述疾病或素乱是 血脂异常。16. 根据权利要求13所述的药物组合物，其中与代谢综合征相关的所述疾病或素乱选 自由糖尿病前期、2型糖尿病和高血糖症组成的组。17. 根据权利要求13所述的药物组合物，其中与代谢综合征相关的所述疾病或素乱是 脂肪肝疾病。18. 根据权利要求17所述的药物组合物，其中所述脂肪肝素乱是非酒精性脂肪肝病 (NAFLD)〇19. 一种药物组合物，所述药物组合物由胆汁酸与至少一个碱性氨基酸或脈基下胺的 缀合物组成，所述缀合物在药学上可接受的载体中作为的唯一活性成分。20. 根据权利要求19所述的药物组合物，用于治疗与代谢综合征相关的疾病或素乱。21. -种药物组合物，所述药物组合物包含：胆汁酸与至少一种碱性氨基酸或与脈基 下胺的缀合物作为活性成分，及药学上可接受的载体，所述药物组合物用于治疗与代谢综 合征相关的疾病或素乱。22. 根据权利要求20或21所述的药物组合物，其中与代谢综合征相关的所述疾病或素 乱选自由W下组成的组：肥胖、超重、血脂异常、高血糖症、高瘦素血症、高膜岛素血症、糖尿 病前期、2型糖尿病、高血压和脂肪肝素乱。23. 根据权利要求22所述的药物组合物，其中与代谢综合征相关的所述疾病或素乱选 自由肥胖和超重组成的组。24. 根据权利要求22所述的药物组合物，其中与代谢综合征相关的所述疾病或素乱是 血脂异常。25. 根据权利要求22所述的药物组合物，其中与代谢综合征相关的所述疾病或素乱选 自由糖尿病前期、2型糖尿病和高血糖症组成的组。26. 根据权利要求22所述的药物组合物，其中与代谢综合征相关的所述疾病或素乱是 脂肪肝素乱。27. 根据权利要求26所述的药物组合物，其中所述脂肪肝素乱是非酒精性脂肪肝病 (NAFLD)〇28. 根据权利要求19-27中任一项所述的药物组合物，其中胆汁酸与至少一个碱性氨 基酸的所述缀合物还包含与所述至少一个碱性氨基酸连接的脈基下胺。29. 根据权利要求19-27中任一项所述的药物组合物，其中所述胆汁酸选自由W下组 成的组：碟脱氧胆酸、石胆酸、胆酸、脱氧胆酸、熊脱氧胆酸、熊胆酸、猪胆酸、猪脱氧胆酸、鼠 胆酸、脱氨胆酸、7-酬脱氧胆酸、二酬胆酸、Ξ酬胆酸、异石胆酸、酬石胆酸、脱氨石胆酸、另U 胆烧酸或其盐。30. 根据权利要求29所述的药物组合物，其中所述胆汁酸选自由碟脱氧胆酸或熊脱氧 胆酸组成的组。31. 根据权利要求19-27中任一项所述的药物组合物，其中所述碱性氨基酸选自由精 氨酸、赖氨酸、组氨酸和鸟氨酸组成的组。32. 根据权利要求31所述的药物组合物，其中所述碱性氨基酸是精氨酸。33. 根据权利要求19-27中任一项所述的药物组合物，其中所述缀合物包含多于一个 碱性氨基酸。34. 根据权利要求19-27中任一项所述的药物组合物，其中所述缀合物还在所述胆汁 酸和氨基酸之间或在所述胆汁酸和脈基下胺之间包含接头。35. 根据权利要求19-27中任一项所述的药物组合物，其中所述缀合物是式（la)、式 (lb)或式（Ic)的化合物。36. 根据权利要求19-27中任一项所述的药物组合物，其中所述缀合物是式（II)的化 合物。37. 根据权利要求19-27中任一项所述的药物组合物，其中所述缀合物选自由W下组 成的组：化合物（1)、化合物（2)、化合物（3)、化合物（4)、化合物巧）、化合物（6)和化合物 (7)及其药学上可接受的盐。38. -种药物组合物，所述药物组合物包含：胆汁酸与至少一个碱性氨基酸或与脈基 下胺的缀合物作为活性成分，及药学上可接受的载体，所述药物组合物用于促进减重或抑 制增重。39. -种药物组合物，所述药物组合物包含：胆汁酸与至少一个碱性氨基酸或与脈基 下胺的缀合物作为活性成分，及药学上可接受的载体，所述药物组合物用于降低受试者中 的血液葡萄糖水平。40. -种化合物，所述化合物选自由W下组成的组： (i) 具有式（la)的结构的化合物或其药学上可接受的盐：其中 m是1到2的整数； Ria每次出现独立地代表精氨酸、赖氨酸、组氨酸或鸟氨酸的侧链；且R2代表H、C1-C4烷基或M，其中Μ是反离子； (ii) 具有式（扣）的结构的化合物或其药学上可接受的盐：其中 Rib是脈基下胺的侧链； (iii) 具有式（Ic)的结构的化合物或其药学上可接受的盐：其中Rla和Rib如W上所定义；和 (iv) 具有式（II)的结构的化合物或其药学上可接受的盐：其中 X是0或NH;η是1到2的整数； R3(在η次出现中的）每次出现独立地代表精氨酸、赖氨酸、组氨酸或鸟氨酸的侧链；且R4代表Η、C1-C4烷基或Μ，其中Μ是反离子。41. 根据权利要求40所述的化合物，其中X是ΝΗ。42. 根据权利要求40所述的组合物，其中X是0。43. 根据权利要求40所述的化合物，其中R2和R4各自是乙基。44. 根据权利要求40所述的化合物，所述化合物是碟脱氧胆酸的衍生物。45. 根据权利要求40所述的化合物，所述化合物是熊脱氧胆酸的衍生物。46. 根据权利要求40所述的化合物，其中r2和R4各自选自锭、碱金属阳离子和碱±金 属阳离子。47. 根据权利要求46所述的化合物，其中Μ选自由化\Mg"、化"和锭组成的组。48. 根据权利要求40所述的化合物，所述化合物选自由W下组成的组：化合物（1)、化 合物（2)、化合物（3)、化合物（4)、化合物巧）、化合物（6)和化合物（7)及其药学上可接受 的盐。49. 根据权利要求48所述的化合物，其中所述化合物具有化合物（1)的结构。
【专利摘要】提供了用于使用胆汁酸与碱性氨基酸或诸如胍基丁胺的脱羧氨基酸的缀合物治疗与代谢综合征相关的疾病或紊乱的组合物和方法。还提供了包含鹅脱氧胆酸与选自精氨酸、赖氨酸、组氨酸、鸟氨酸的氨基酸或诸如胍基丁胺的脱羧氨基酸的胆汁酸-碱性氨基酸缀合物。
【IPC分类】A61P3/00, A61K31/575, C07J9/00
【公开号】CN105408343
【申请号】CN201480042199
【发明人】奥伦·蒂洛希, 艾拉·沃洛辛, 什洛莫·莎森, 迈克尔·奥博赛格, 撒迦利亚·马达尔
【申请人】耶路撒冷希伯来大学伊森姆研究发展有限公司
【公开日】2016年3月16日
【申请日】2014年6月5日
【公告号】EP3004132A1, US20160120880, WO2014195950A1