D-三七素的制备方法及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药物化学和治疗学领域，特别是涉及一种D-三七素（S卩β-Ν-乙二酰基_ D-α，β-二氨基丙酸)的制备方法及其用途。
【背景技术】
[0002] 血小板减少症是指血小板数低于正常范围所引起的病症，血小板减少症可能源于 血小板产生不足，脾脏对血小板的阻留，血小板破坏或利用增加以及被稀释，无论何种原因 所致的严重血小板减少，都可引起典型的出血:多发性瘀斑，最常见于小腿;或在受轻微外 伤的部位出现小的散在性瘀斑;粘膜出血，鼻出血，胃肠道和泌尿生殖道和阴道出血，和手 术后大量出血，胃肠道大量出血和中枢神经系统内出血可危及生命。
[0003]目前临床上常见的治疗血小板减少药物主要有利可君片、肌苷注射液、重组人白 细胞介素-11等。不过这些药物，在临床用途中或作用效果不明显或者出现种种不尽人意的 副作用，如白介素-11就存在诸如水肿、注射处疼痛、红肿、硬结、结膜充血等副作用。因此寻 找疗效显著、安全可靠的治疗血小板减少症药物是医药工作者值得长期研究的课题。
[0004] 五加科人参属名贵中药材三七有"止血之神药"之称，自古以来为伤科要药，三七 中所含有的主要单体止血活性物质为L-三七素。L-三七素在大量使用的情况下，将显示神 经毒性，而在少量使用时，则不显示神经毒的作用而显示出强力的止血及血小板增加作用， 使用l-2mg即可充分显示治疗效果。三七素有两个手性异构体，但是从天然植物中分离得到 的均为L构型。
【发明内容】
[0005] 有鉴于此，本发明的目的在于提出一种D-三七素（S卩β-Ν-乙二酰基-D-a，β-二氨基 丙酸）的制备方法及其用途，以尚效地制备D-二七素。
[0006]本发明提供的D-三七素的制备方法，包括以下步骤：
[0007] 1)对D-天冬酰胺的氨基进行Fmoc保护，得到第一中间体；
[0008] 2)对所述第一中间体进行Hoffman降解反应，得到第二中间体；
[0009] 3)在有机碱的作用下，将所述第二中间体脱去Fmoc保护，得到第三中间体；
[0010] 4)在强碱条件下，将所述第三中间体与草酸单钾酯进行缩合反应，得到所述D-三 七素。
[0011] 在本发明的一些实施例中，采用9-芴甲基-N-琥珀酰亚胺基碳酸酯对D-天冬酰胺 的氨基进行Fmoc保护。
[0012] 在本发明的一些实施例中，采用[双(三氟乙酰氧基)碘]苯对所述第一中间体进行 Hoffman降解反应，得到第二中间体。
[0013] 在本发明的一些实施例中，所述有机碱选自二乙胺或哌啶。
[0014]在本发明的一些实施例中，所述强碱选自氢氧化锂。
[0015]在本发明的一些实施例中，所述第一中间体的制备方法包括以下步骤：
[0016]将碳酸氢钠加入到D-天冬酰胺中，将9-芴甲基-N-琥珀酰亚胺基碳酸酯溶于丙酮 中；
[0017]将所述9-芴甲基-N-琥珀酰亚胺基碳酸酯的丙酮溶液缓慢滴加入到碳酸氢钠、D-天冬酰胺的混合溶液中，于20_30°C下反应；
[0018] 采用酸液调节产物溶液的pH值至2-4,然后抽滤该产物溶液，得到白色固体，即为 所述第一中间体。
[0019]在本发明的一些实施例中，所述第二中间体的制备方法包括以下步骤：
[0020] 将[双(三氟乙酰氧基)碘]苯溶于乙腈中，将所述第一中间体溶于N，N-二甲基甲酰 胺中，将所述溶解有第一中间体的N，N-二甲基甲酰胺加入到乙腈溶液中；
[0021] 继续向乙腈溶液加入水，然后再继续向乙腈溶液加入吡啶，于20-30°C下反应；
[0022] 反应结束后，蒸除溶剂，然后加入水，采用酸液调节产物溶液的pH值至1-3;
[0023]接着，采用乙醚进行萃取，水层采用碱液调pH值至5-7,冷藏后抽滤得到白色固体， 即为所述第二中间体。
[0024]在本发明的一些实施例中，所述第三中间体的制备方法包括以下步骤：
[0025]将所述第二中间体溶于乙醇中，再继续加入有机碱，20_30°C下反应；
[0026]反应结束后，减压浓缩产物溶液，采用乙醇洗涤；
[0027]向乙醇洗涤后的产物溶液加入甲醇和盐酸甲醇溶液，当有白色固体析出后，经抽 滤、甲醇洗涤得到白色固体，即为所述第三中间体。
[0028]本发明还提供一种药物组合物，其包括米用上述D-二七素的制备方法制得的D-二 七素。
[0029]本发明还提供一种上述药物组合物在制备治疗血小板减少症药物中的用途。
[0030] 从以上所述可以看出，本发明采用高效安全的制备方法合成得到D-三七素，制备 工艺简单，收率较高，通过本发明提供的方法制备得到的化合物D-三七素具有较好的治疗 血小板减少症作用，优于临床用药白介素-11，可以成为治疗血小板减少症的候选药物。
【具体实施方式】
[0031] 为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发 明进一步详细说明。
[0032]本发明提供的D-三七素的制备方法包括以下步骤：
[0033] 1)对D-天冬酰胺的氨基进行Fmoc保护，得到第一中间体S-D-1;
[0034] 2)对所述第一中间体S-D-1进行Hoffman降解反应，得到第二中间体S-D-2;
[0035] 3)在有机碱的作用下，将所述第二中间体S-D-2脱去Fmoc保护，得到第三中间体S- D-3；
[0036] 4)在强碱条件下，将所述第三中间体S-D-2与草酸单钾酯进行缩合反应，得到目标 产物D-三七素。
[0037]D-三七素的合成路线如下：
[0038]
[0039] 实施例1D-三七素的合成方法
[0040] 1)第一中间体S-D-1的合成：
[0041 ] 取0-天冬酰胺一水物(8.78,581111]1〇1)于圆底烧瓶中，加入蒸馏水3001111^，随后加入 碳酸氢钠（l〇.9g，130mmol)充分搅拌;取9-荷甲基-N-琥?自酰亚胺基碳酸酯（20g，60mmol)溶 于150mL丙酮中，将所述9-芴甲基-N-琥珀酰亚胺基碳酸酯的丙酮溶液缓慢滴加入上述圆底 烧瓶中，于25°C下搅拌反应4h;采用浓盐酸调节产物溶液的pH值至3,再抽滤该产物溶液，得 至丨」19.58白色固体，即为第一中间体3-0-1，收率95%。
[0042] 2)第二中间体S-D-2的合成：
[0043] 取(24.9g，56mmol)[双(三氟乙酰氧基)碘]苯(PIFA)于圆底烧瓶中，加入58mL乙腈 溶解；另取（19.2g，54.2mmol)S-D-1，溶于115mLDMF中，并缓慢滴加入所述圆底烧瓶中，剧 烈搅拌至反应液澄清；随后缓慢滴加蒸馏水58mL至所述圆底烧瓶中，搅拌20min后，缓慢滴 加吡啶4.6mL至所述圆底烧瓶中，并于26°C下搅拌反应60h。通过TLC监测原料反应完全，蒸 除溶剂后，加入蒸馏水380mL搅拌均匀，6NHC1溶液调节溶液的pH值至2;再采用乙醚进行萃 取，水层用4NNaOH溶液调pH值为6，4°C冰箱放置2h后，抽滤得到13.3g白色固体，即为第二 中间体5-0-2，收率75%。
[0044] 3)第三中间体S-D-3的合成：
[0045] 取S-D-2 (13.0g，40mmo1)于圆底烧瓶中，加入无水乙醇1OOOmL，随后向反应瓶中滴 加二乙胺200mL，于27°C下反应过夜。TLC检测反应完全后，通过多次减压浓缩乙醇，去除残 留的乙二胺。加入无水甲醇1 〇〇mL搅拌溶解，滴加5mL盐酸甲醇溶液，搅拌反应4h后，有白色 固体析出，抽滤，甲醇洗，得到5.0g白色固体S-D-3，收率90 %。
[0046] 4)目标产物D-三七素的合成：
[0047] 取S-D-3(5.3g，36mmol)于圆底烧瓶中，加入26.5mL50 %甲醇水溶液搅拌均匀，随 后于冰浴下向反应瓶中加入氢氧化锂一水物（2.38,51!11111〇1)，搅拌反应11 1;待反应液溶解 后，缓慢滴加草酸单钾酯(9.7g，65mmol)的32mL50 %甲醇水溶液，并于室温下反应24hJLC 监测反应完全后，抽滤产物溶液，将得到的白色固体溶于冰水中，采用2NHC1调pH值为2.1 ~2.2，使再次析出白色固体，将其于4°C冰箱放置2h后，抽滤，依次进行冰水洗，甲醇洗，丙 酮洗后，烘干得4.6g白色固体D-三七素，收率73 %。
[0048]m·p·206°C。+1 8(C0.06，Η?.0)。
[0049] IR(KBr) :3503,3436,3386,3241,1671,1634,1517,550αιι_1〇
[0050] 4NMR(600MHz，D20)δ: 4 · 04(1Η，dd，J= 7 · 6Hz，3 · 6Hz，H00C-迎-ΝΗ2)，3 · 87(1Η，dd， J= 14 · 9Hz，3 · 7Hz，CH-CH2~NH)，3 · 74( 1H，dd，J= 14 · 8Hz，7 · 7Hz，CH-CH2~NH);13C匪R (150MHz,D20)δ: 177.8,166.1,165.5,54.7