一种l-丙氨酰-l-酪氨酸的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药中间体合成技术领域，具体涉及一种L-丙氨酰-L-酪氨酸的制备 方法。
【背景技术】
[0002] L-丙氨酰-L-酪氨酸的英文名称为L-ALANYL-L-TYROSINE，化学名为L-丙氨酰-L-酪氨酸，为白色结晶性固体，其结构如下：
临床上使用的复方氨基酸双肽注射液为肠外营养制剂，通过肠外营养提供氨基酸。应 用于不能口服或经肠道补给营养，以及营养不能满足需要的患者，特别是处于高分解代谢 的患者。
[0003] 丙酪二肽(L-丙氨酰-L-酪氨酸)其合成方法多为酶促合肽，虽然反应效率较高，但 由于酶的专一1性和成本较高，不利于工业化。
[0004] 《化工技术与开发》V〇143，N〇2，Feb，2014以L-酪氨酸和L-丙氨酸为原料，苄氧羰基 保护丙氨酸，甲酯保护酪氨酸，EDCI-HOBt等缩合剂法合成丙酪二肽需要加入大量缩合剂进 行缩合，不加缩合剂反应非常慢，基本不能反应;而如果不进行保护，会产生大量副产物;另 外，该方法总路线复杂，还需要Pd/C催化脱保护，不利于工业化生产。
【发明内容】
[0005] 为了解决上述问题，本发明实施例提供了一种收率高、纯度高、合适工业化生产的 L-丙氨酰-L-酪氨酸的制备方法，该方法在缚酸剂的促进作用下，D-2氯丙酰氯会优先跟酪 氨酸的氨基缩合成酰胺，而不会与其他基团反应，所以本专利路线不用保护，也不用加入缩 合剂进行缩合反应，条件温和，收率较高，非常有利于工业化生产。所述技术方案如下。
[0006] 本发明实施例提供了一种L-丙氨酰-L-酪氨酸的制备方法，该方法包括:L-酪氨酸 与D-2-氯丙酰氯在缚酸剂的作用下进行缩合反应，得到中间体氯丙酰-L-酪氨酸。中间体氯 丙酰-L-酪氨酸经过氨化得到L-丙氨酰-L-酪氨酸成品。
[0007] 更具体地，本发明提供的L-丙氨酰-L-酪氨酸的制备方法包括以下步骤： (1)L-酪氨酸与D-2-氯丙酰氯在缚酸剂的作用下进行缩合反应，使用缚酸剂调节反应 的pH值为8-12;其中，L-酪氨酸与D-2-氯丙酰氯的摩尔比是1:1-1:4,缩合反应的温度为30 °C以下，反应时间3-8h，反应完成后酸化结晶，得到中间体氯丙酰-L-酪氨酸。优选地，L-酪 氨酸与D-2-氯丙酰氯的摩尔比是1:1.1-1: 3。
[0008] (2)将步骤(1)得到的氯丙酰-L-酪氨酸与氨化试剂进行氨化反应;其中，氨化试剂 与氯丙酰-L-酪氨酸的摩尔比为5:1-20:1，氨化反应的温度为40°C_70°C，压力为0.05Mpa-0.50Mpa，氨化反应的时间为6_20h，反应完成后浓缩去除氨，加水低温结晶得到L-丙氨酰-L-酪氨酸粗品，粗品经纯化后得到L-丙氨酰-L-酪氨酸成品。优选地，氨化试剂与氯丙酰-L-酪氨酸的摩尔比为8:1-15:1。
[0009] 其中，本发明实施例中的酸化析晶过程为:缩合反应完成后，降温至1-10°C，调节 pH值至1-5进行结晶，固液分离(如抽滤)和干燥后得到中间体氯丙酰-L-酪氨酸。
[0010] 其中，本发明实施例中的缩合反应的溶剂为水、烃类溶剂、芳烃类溶剂、卤代烃溶 剂或酯类溶剂等。具体地，缩合反应的溶剂选自水、石油醚、苯、甲苯、二甲苯、二氯甲烷、三 氯甲烷、醋酸丁酯或乙酸乙酯等。溶剂的体积与原料的体积比为3:1-10:1。
[0011] 其中，本发明实施例中的缚酸剂为无机碱和有机碱;具体地，缚酸剂选自甲胺、乙 胺、二甲胺、二乙胺、三乙胺、吡啶、吡咯、氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钾或 碳酸氢钠等，尤其是无机碱，氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钾或碳酸氢钠 等。
[0012] 其中，本发明实施例中的氨化试剂选自碳酸氢铵、氨水或其组合，尤其是碳酸氢铵 与氨水的组合。
[0013] 其中，本发明实施例中粗品的纯化过程为(重结晶）:将粗品溶解于精制溶剂中，精 制溶剂与粗品的体积比为1〇:1-20:1，升温至50°080°〇，全溶后降温至0°030°〇结晶，固液 分离(如过滤）、干燥得到L-丙氨酰-L-酪氨酸成品。
[0014] 其中，本发明实施例中的精制溶剂选自水、甲醇、乙醇、异丙醇、N、N_二甲基甲酰 胺、二氧六烷，四氢呋喃、醋酸或氨水等。
[0015] 本发明具有以下优点：本发明利用L-酪氨酸与D-2氯丙酰氯通过加入缚酸剂直接 进行氨基酸缩合，然后经过氨化得到L-丙氨酰-L-酪氨酸。免除了 L-酪氨酸和L-丙氨酸为原 料，苄氧羰基保护丙氨酸，甲酯保护酪氨酸，EDCI-HOBt等缩合剂法合成丙酪二肽需要加入 大量缩合剂(不加缩合剂反应非常慢，基本不能进行)进行缩合，步骤简单，成本更低，后处 理容易，原料易得，对环境友好。经过精制能得到高纯度的L-丙氨酰-L-酪氨酸，HPLC纯度2 99.7%，单杂小于0.1%，总摩尔收率2 70%(见实施例1、6和22)，非常适合工业化生产。
【具体实施方式】
[0016] 为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本发明实施方式作进一步 地详细描述。
[00Π ] 实施例1: 制备氯丙酰-L-酪氨酸(I) 在500mL反应瓶中，加入三氯甲烷180mL，18. IgL-酪氨酸（0.1111〇1)，30.38三乙胺 (0.3mol)，室温滴加25.4gD-2-氯丙酰氯(0.2mol)，不需要持续滴加三乙胺，反应pH值稳定 在8-10之间，反应5小时原料反应完全，降温至1-5°C，调pH至1-2搅拌1小时，抽滤得到固体， 干燥得产物（I )23.2g，收率为92.2%，HPLC纯度2 96%。
[0018] 实施例2: 制备氯丙酰-L-酪氨酸(I) 在250mL反应瓶中，加入醋酸丁酯90mL，9.05g L-酪氨酸（Ο . 05mol)，27.6g碳酸钾 (0.2111〇1)，室温滴加1980-2-氯丙酰氯(0.15111〇1)，反应?!1值在9-11之间，反应7小时原料反 应完全，降温至10-15°C，调节pH至2-3,搅拌1小时，抽滤得到固体，干燥得产物（1)11.99g， 收率为95 · 5%，HPLC纯度2 96%。
[0019] 实施例3: 制备氯丙酰-L-酪氨酸(I) 在2000mL反应瓶中，加入水543g，132g氢氧化钠(3.3mol)，搅拌溶解，降温至室温，然后 加入181g L-酪氨酸（lmol)，0-30°C滴加381g D-2-氯丙酰氯(3mol)，反应pH值在9-12之间， 反应8小时原料反应完全，降温至1-5°C，调节pH至1-2搅拌1小时，抽滤得到固体，干燥得产 物（I)23· lg，收率为93·3%，HPLC纯度 2 96%。
[0020] 实施例4: 制备氯丙酰-L-酪氨酸(I) 在lOOOmL反应瓶中，加入二甲苯180mL，水180ml，然后加入16.8g氢氧化钾(0.3mol)溶 解，降至室温后加入18. lg L-酪氨酸（0. lmol)，然后室温滴加25.4gD-2-氯丙酰氯 (0.2mol)，反应pH值在9-12之间，反应4小时原料反应完全，降温至1-5°C，调节pH至1-2，搅 拌1小时，抽滤得到固体，干燥得产物（I)24.Og，收率为95.6%，HPLC纯度2 96%。
[0021 ] 实施例5: 制备氯丙酰-L-酪氨酸(I) 在lOOOOmL反应瓶中，加入甲苯1800mL，水3600ml，然后加入160g氢氧化钠(4mol)溶解， 降至室温以下加入181g L-酪氨酸（lmol)，然后室温滴加508gD-2-氯丙酰氯(4mol)，反应pH 值在9-13之间，反应8小时原料反应完全，降温至1 -10°C，调节pH至1 -2，搅拌1小时，抽滤得 至個体，干燥得产物（I)246.2g，收率为97.7%，HPLC纯度2 96%。
[0022] 实施例6: 制备L-丙氨酰-L-酪氨酸粗品（Π ) 在1000ml压力容器中，投入氨水460ml，然后加入实施例1制备的氯丙酰-L-酪氨酸 23.2g(0. lmol)，密闭反应，升温至40°C_45°C，压力为0.05Mpa，HPLC确定原料反应完即为终 点，反应时间约15-20h。反应完后，减压浓缩，浓缩干后加入230g水，60°C搅拌溶解后放入冰 箱结晶，次日过滤得到丙酪粗品，干重22.4g，HPLC纯度97.1%。
[0023] 实施例7: 制备L-丙氨酰-L-酪氨酸粗品（Π ) 在500ml压力容器中，投入氨水230