一株摩西球囊霉及其在促进植物磷吸收中的应用

文档序号:9780586阅读:1177来源:国知局
一株摩西球囊霉及其在促进植物磷吸收中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及一株摩西球囊霉及其在促进植物憐吸收中的应用。
【背景技术】
[0002] 丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizal F^ingLAM)是自然界±壤中普遍存在的 一类有益微生物,约占±壤微生物总量的5-36%,是生物量最大的一类±壤真菌,它能够与 80%W上的陆生植物形成良好的互利共生体(也称为菌根,mycorrhizae)。运种真菌属于球 囊口真菌,能够在植物根系皮层细胞内形成丛枝,部分形成泡囊结构,因此该类真菌被称为 丛枝菌根真菌。
[0003] 丛枝菌根真菌可W促进并提高作物养分的吸收与利用效率,特别是植物憐养分的 吸收利用方面。通过接种丛枝菌根真菌,其根外菌丝的生长可W增加植物根系和±壤的接 触范围,即扩大根际范围,增加吸收表面积,提高±壤憐空间有效性,改善根际环境,从紧实 的±壤中吸收憐养分,此外丛枝菌根真菌侵染增加了根系吸收能力。因此,丛枝菌根真菌真 菌作为一种生物肥料具有极大的潜力应用于实际农业生产中。那么研究并筛选丛枝菌根真 菌中高效吸收养分并能促进作物生长的菌种,对于生物肥料的开发与发展方面有着很重要 的意义。

【发明内容】

[0004] 本发明的目的是提供一株摩西球囊霉及其在促进植物憐吸收中的应用。
[0005] 本发明提供的摩西球囊霉(Glomus mosseae)200705M,已于2015年12月03日保藏 于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、(简称CGMCC,地址为:北京市朝阳区北 辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所),保藏登记号为CGMCC NO. 11662。摩西球囊霉 (Glomus mosseae)200705M CGMCC NO. 11662,简称摩西球囊霉200705M。
[0006] 本发明还保护摩西球囊霉200705M在促进植物憐吸收中的应用。所述植物可为禾 本科植物,具体可为玉米,例如玉米品种"京科懦2000"。
[0007] 本发明还保护摩西球囊霉200705M在促进植物生长中的应用。所述植物可为禾本 科植物,具体可为玉米,例如玉米品种"京科懦2000"。所述促进植物生长具体可体现为促使 植物的重量增加。所述重量具体为干重,更具体为地上部分干重和/或地下部分根系干重。 [000引本发明还提供了一种菌剂,其活性成分为摩西球囊霉200705M。所述菌剂的制备方 法包括如下步骤,将摩西球囊霉200705M与植物在同一培养基质中共培养,收获培养基质, 即为所述菌剂。所述植物可为禾本科植物,具体可为高梁,具体可为高梁品种"教杂1号'。所 述培养基质可为等体积混合的河沙与沸石的混合物。所述共培养的时间可为Ξ个月。所述 共培养的条件可为:20-27°C,每天光照14小时,黑暗10小时。所述菌剂中含有摩西球囊霉 200705M抱子、被侵染根段及根外菌丝。所述菌剂的制备方法具体可为:挑取摩西球囊霉 200705M单个抱子,接种于lOOOg灭菌后的等体积混合的河沙与沸石的混合物中,并播种20 粒高梁种子,培养Ξ个月后(培养条件:溫度20-27°C,每天光照14小时,黑暗10小时),收获 沸石河沙混合物(其中含有抱子、被侵染根段及根外菌丝),即为菌剂。
[0009] 本发明还保护一种菌剂的制备方法,将摩西球囊霉200705M与植物在同一培养基 质中共培养,收获培养基质,即为所述菌剂。所述植物可为禾本科植物,具体可为高梁,具体 可为高梁品种"教杂1号"。所述培养基质可为等体积混合的河沙与沸石的混合物。所述共培 养的时间可为Ξ个月。所述共培养的条件可为:20-27°C,每天光照14小时,黑暗10小时。所 述菌剂中含有摩西球囊霉200705M抱子、被侵染根段及根外菌丝。所述菌剂的制备方法具体 可为:挑取摩西球囊霉200705M单个抱子,接种于lOOOg灭菌后的等体积混合的河沙与沸石 的混合物中,并播种20粒高梁种子,培养Ξ个月后(培养条件:溫度20-27°C,每天光照14小 时,黑暗10小时),收获沸石河沙混合物(其中含有抱子、被侵染根段及根外菌丝),即为菌 剂。
[0010] 本发明还保护W上任一所述菌剂在促进植物憐吸收中的应用。所述植物可为禾本 科植物,具体可为玉米,例如玉米品种"京科懦2000"。
[0011] 本发明还保护W上任一所述菌剂在促进植物生长中的应用。所述植物可为禾本科 植物,具体可为玉米,例如玉米品种"京科懦2000"。所述促进植物生长具体可体现为促使植 物的重量增加。所述重量具体为干重,更具体为地上部分干重和/或地下部分根系干重。
[0012] 本发明通过盆栽试验的方法研究了摩西球囊霉200705M侵染植物玉米形成菌根后 对±壤中憐养分的吸收W及对玉米生长的影响。试验结果表明丛枝菌根真菌菌株摩西球囊 霉200705M能够显著增强玉米根系对憐养分的吸收能力,促进玉米植株的生长。本发明对于 农业生产具有重大价值。
【附图说明】
[oou]图1为抱子照片。
[0014]图 2 为Gm-PO 组、Gm-P50 组、CK-P0 组和 CK-P50 组的照片。
[0015]图 3 为Ga-PO 组、Ga-P50 组、CK-P0 组和 CK-P50 组的照片。
[0016] 图 4 为Geb-PO 组、Geb-P50 组、CK-P0 组和 CK-P50 组的照片。
[0017] 图 5 为Ds-PO 组、DS-P50 组、CK-P0 组和 CK-P50 组的照片。
【具体实施方式】
[0018] W下的实施例便于更好地理解本发明,但并不限定本发明。下述实施例中的实验 方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为自 常规生化试剂商店购买得到的。W下实施例中的定量试验,均设置Ξ次重复实验,结果取平 均值。河沙与沸石均为商购获得,粒径均为l-2mm。实施例中采用白色塑料花盆,规格为 260mmX200mm。实施例中的高梁种子为高梁品种"教杂1号"。实施例中的玉米种子为玉米品 种"京科懦2000"。
[0019] 聚丛球囊霉(Glomus aggregatum)BGC XJ0抓用Ga表示,象牙白球囊霉(Glomus eburneunOBGC XJ0她用Geb表示,沾屑多样抱囊霉(Diversispora spur州m)BGC XJ06E用Ds 表示,上述Ξ个菌株均获自北京市农林科学院植物营养与资源研究所"丛枝菌根真菌种质 资源库"。
[0020] 实施例1、菌株的分离、鉴定和保藏
[0021] -、菌株的分离
[0022] 1、2007年9月,从新疆昌吉采集骆驼刺根际±壤。
[0023] 2、称取100克步骤1得到的±壤,放入装有1000ml水的大烧杯中,揽拌,静置10秒后 过Ξ层分样筛(上筛20目,中筛60目,下筛300目),用水收集300目筛子上的残留物于培养皿 中,在体式显微镜下挑取单个抱子,接种于等体积混合的河沙与沸石的混合物中,并种植高 梁,培养Ξ个月后,收获含有抱子、被侵染根段及根外菌丝的沸石河沙混合物。
[0024] 3、称取20克步骤2得到的沸石河沙混合物,放入装有1000ml水的大烧杯中,揽拌, 静置10秒后过Ξ层分样筛(上筛20目,中筛60目,下筛300目),用水收集300目筛子上的残留 物于培养皿中,在体式显微镜下挑取抱子,置于载玻片上,在生物显微镜下,观察抱子形态。 [00巧]得到一株菌,将其命名为200705M。
[00%] 二、菌株的鉴定
[0027] 形态鉴定结果:
[0028] 抱子在盆栽培养物中单生,或1-2极少3个丛生在抱子果中;抱子果多为不规则球 形,直径260-360μπι,黄栋-浅褐色,内含1-2个抱子,由松散的网状菌丝形成抱被,抱被厚大 约12-23μπι;抱子淡黄-黄栋色,球形或近球形,很少不规则,大小为115-160-225WI1;
[0029] 抱壁3层:外壁L1无色透明,易脱落,厚约1.7-2.1皿,16山6丘'3试剂中呈浅粉红色 至深粉红色;L2无色透明,0.8-1.3μπι;内壁L3浅黄-黄褐色,层状壁,厚1.0-2.5WI1;
[0030] 抱子内含物为大小不等的油滴或颗粒;连抱菌丝漏斗形,连点宽10-20(-28)μπι,连 点处菌丝壁稍增厚;连抱菌丝底部有一厚凹隔。
[0031] 抱子照片(放大倍数为30)见图1。
[0032] 分子鉴定结果:18S ribosomal RNA的编码序列如序列表的序列1所示。
[0033] 上述鉴定结果表明,200705M为丛枝菌根真菌中的摩西球囊霉(Glomus mosseae)。
[0034] Ξ、菌株的保藏
[OO%] 摩西球囊霉(Glomus mosseae)200705M,已于2015年12月03日保藏于中国微生物 菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、(简称CGMCC,地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3 号,中国科学院微生物研究所),保藏登记号为CGMCC NO. 11662。摩西球囊霉(Glomus mosseae)200705M CGMCC ^.11662,简称摩西球囊霉2007051,用6111表示。
[0036] 实施例2、菌株的应用
[0037] -、相关材料的准备
[0038] 1、制备培养基质
[0039] ±壤采自北京市大兴区长子营镇林间沙地,基础养分含量见表1。
[0040] 表1供试±壤基本理化性状
[0041]
[0042] ±壤风干后过2mm网筛,然后105°C下湿热间歇灭菌2次,惊干后每千克混入如下成 分:200mg的N(由NH4NO3提供)、150mg的K(由K2SO4提供)、lOOmg的Mg(由MgS〇4 · 7此0提供)、 5mg的Zn(由aiS〇4 · 7出ο提供)、5mg的Μη(由MnS〇4提供)、5mg的Cu(由CuSO巧出ο提供),充分混 匀,得到无憐培养基质。
[0043] ±壤风干后过2mm网筛,然后105°C下湿热间歇灭菌2次,惊干后每千克混入如下成 分:200mg的N(由NH4NO3提供)、150mg的K(由K2SO4提供)、lOOmg的Mg(由MgS〇4 · 7此0提供)、 5mg的Zn (由 aiS〇4 · 7出0提供)、5mg的Μη (由MnS〇4提供)、
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