太子参环肽类提取物及在制备治疗copd药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于中医药技术领域，具体涉及一种太子参环肽类提取物的制备方法及其 在制备治疗coro药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 慢性阻塞性肺病（chronic obstructive pulmonary disease，(Χ)Ρ?)，是以气道不 完全可逆性气流受限为特征的疾病，与肺部对香烟、雾霾等有害气体或有害颗粒的异常炎 症反应有关。近年来，coro发病率和死亡率不断增加，已跃居为第4位致死原因，成为全球关 注的健康问题，不少国家将其作为重点防治的慢性疾病项目。
[0003] coro属于中医"喘证"、"肺胀"等范畴，肺气虚是coro的始动因素，并贯穿于整个病 程。对气虚的治疗是中医对coro稳定期的重要治疗策略;肺气虚的改善可以有效减轻症状、 减缓肺功能下降趋势，对于多发、难治、具有反复发作特点的肺系疾病的综合防治有积极作 用。
[0004] 太子参为石竹科植物孩儿参（Pseudostellaria heterophylla (Miq. )Pax ex Pax et Hoffm.)的块根，既能益气，又可养阴，适用于脾肺亏虚气阴不足者，其以清补润燥 见长，在中医治疗慢性呼吸系统疾病中，为治疗肺气虚的核心药物，使用频次很高。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种太子参环肽类提取物的制备方法及其在制备治疗 coro药物中的应用，其以太子参为原料分离得到一种具有改善和治疗coro作用的环肽类提 取物。
[0006] 为实现上述目的，本发明采用如下技术方案： 一种太子参环肽类提取物的制备方法包括以下步骤： 1) 提取:将干燥至恒重的太子参药材粉碎至20目，以其重量5~20倍的乙酸乙酯为溶剂， 采用索氏提取器提取2次，每次1~3h，过滤，合并滤液，减压回收溶剂，得干浸膏； 2) 分离:将所得干浸膏按重量比1:5~10加甲醇溶解，经高压制备色谱分离，获得所述提 取物； 所述高压制备色谱的条件为:C18制备型液相色谱柱；紫外检测器，检测波长为205~ 215nm;以乙腈-0.2wt%磷酸水溶液为流动相进行洗脱，洗脱程序为：1~lOOrnin，乙腈的体积 含量由10%递增至100%;流速2~10 mL/min;自动馏分收集器按5~10 mL为一份进行收集。
[0007] 所述太子参环肽类提取物可用于制备治疗慢性阻塞性肺病(coro)的药物。
[0008] 本发明的显著优点在于:本发明提供了一种利用高压制备色谱制备太子参环肽类 提取物的方法，且经药效学试验证明，所得提取物可有效降低coro模型大鼠肺气道阻力，增 加其动态顺应性，改善咳嗽、气急等症状，有效控制coro病情的发展，适用于制备治疗C0PD 的药物。
【附图说明】
[0009] 图1为实施例1制备的太子参环肽类提取物的UPLC图谱。
【具体实施方式】
[0010] 为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合【具体实施方式】对本发明所述的 技术方案做进一步的说明，但是本发明不仅限于此。
[0011] 实施例1太子参环肽类提取物的制备 1) 提取:将干燥至恒重的太子参药材粉碎至20目，以其重量10倍的乙酸乙酯为溶剂，采 用索氏提取器提取2次，每次3h，过滤，合并滤液，减压回收溶剂，得干浸膏； 2) 分离:将所得干浸膏按重量比1:5加甲醇溶解，经高压制备色谱分离，高压制备色谱 的条件为:C18制备型液相色谱柱；紫外检测器，检测波长为205~215nm;以乙腈-0.2wt%磷酸 水溶液为流动相进行洗脱，洗脱程序为：1~l〇〇min，乙腈的体积含量由10%递增至100%;流速 2~10 mL/min;进样体积50~200 yL;自动馏分收集器按5~10 mL为一份进行收集，得提取物。
[0012] 实施例2提取物的鉴定 1.按文献（"植物环肽的薄层化学识别新方法及其在植物化学研究中的应用"，《科学 通报》，2000年，第45卷第10期)报道的内容，采用薄层色谱-化学的方法对所得提取物进行 鉴定，结果显示其主要含环肽类成分。
[0013]其具体操作为： 取两块25 mmX 50 mm的硅胶板G(板1和板2)，将样品分别点在两块板上，用氯仿-甲醇 (8.5:1.5或9:1)展开后挥掉溶剂，板1放置，板2悬于底部加有约1 mL浓盐酸的密闭磨口玻 璃缸中（耐酸和耐高温玻璃缸），置于已升温至ll〇°C的烘箱中，加热水解1~2 h，冷却后取出 板2,在通风柜中挥掉盐酸，然后将未经水解的板1和加热酸水解的板2同时喷洒含0.2%茚三 酮的丙酮试剂，用电吹风加热几分钟进行显色。如板2在多数情况下显示几个紫红色斑点， 少数情况下显示某些黄色斑点，而板1在相应位置上无显色斑点，提示此样品可能含有环肽 或肽酰胺。
[0014]取50 mmX50 mm硅胶G板(板3)，按照双向薄层层析板点样方法将样品点在板上， 用氯仿-甲醇(8.5:1.5或9:1)作第一向展开剂展开后挥掉溶剂，先按前述方法用浓盐酸高 温水解后冷却，挥掉盐酸，然后在溶剂系统A(氯仿-甲醇-冰醋酸，8:2:2滴)或B(氯仿-甲 醇-水-冰醋酸，7: 3:0.5:4滴）中进行第二向展开;挥掉溶剂后，喷洒含0.2%茚三酮的丙酮 试剂，用电吹风加热几分钟进行显色。如板3在第二向的同一轴上只显示一个红紫色斑点， 表明此植物样品可能含有肽酰胺，而板3在第二向的同一轴上显示多个紫红色或黄色斑点， 表明此样品可能含有环肽成分。
[0015] 2.将所得提取物进行液相色谱-质谱联用分析。图1为其超高效液相色谱(UPLC) 图谱，对保留时间在8-18min内的色谱峰进行质谱分析，根据质谱碎片离子特征，与图谱数 据库和文献进行比对，鉴定出11种环肽： 峰1(保留时间8.63 111丨11)在质谱正离子模式下得到了111/2 502.314[]\1+!1] +，111/2 540.293[M+ACN] +，负离子模式下有m/z 501.369[M-H]-，m/z546.465[M+Formic] -，推断其为 太子参环妝Pesudostellarin A，C25H35N5〇6,分子量501 · 575〇
[0016]峰2(保留时间 10.65 min)在MS中给出了m/z 665.444[M+H] +，m/z 705·438[Μ+ ACN] +，推断其为太子参环肽Heterophy 11 in D，C35H48N6〇7，分子量664.792。
[0017] 峰3(保留时间10.68 111丨11)在质谱正离子模式下采集到111/2 683.458[]\1+!1] +，111/2 705.438[M+Na] +，m/z 721.435[M+ACN] +，在负离子模式下有m/z 681 ·631[Μ-Η] -，m/ z727 · 607 [M+Formic] -，推断其为太子参环肽Pesudostel larin B，C33H46N8O8，分子量 682·767〇
[0018] 峰4(保留时间 10.91 min)在MS中给出了m/z 785.568[M+H] +，m/z 807.563[M+Na ] +，m/z 823.537[M+ACN] +，在负离子模式下有m/z 781·744[Μ-Η] -，m/z 811·764[Μ+ Formic ]-，推断其为太子参环肽Pesudostel larin F，C38H56N8〇iq，分子量784 · 899 〇
[0019] 峰5(保留时间11.96min)在