一种利用led节能灯和摇床培养球等鞭金藻的方法
【专利说明】
[0001 ]技术领域本发明属于水产养殖领域，尤其涉及一种利用LED节能灯和摇床培养球等鞭金藻的方法。
【背景技术】
[0002]球等鞭金藻分类上隶属金藻门、普林藻纲、等鞭藻目、等鞭藻科、等鞭藻属;单细胞生活，细胞裸露，形状多变，多呈椭圆形，幼细胞有一略扁平背腹面，侧面观为长椭圆形或长方形。细胞前端生出两条等长尾鞭型鞭毛，鞭毛平滑无附着物和膨胀体，长度为细胞的1-2倍，鞭毛基部有液泡。胞内有2个大而伸长侧生色素体，形状和位置随体形而变。一个暗红、卵圆形眼点位于细胞中央，偶有靠近细胞前端。细胞核一个，常位于细胞中间。贮藏物是油滴和白糖素，油滴分布在细胞质中，白糖素位于细胞后端。细胞长4.4-7.1微米，宽2.7-4.4微米，厚2.4-3微米。主要行无性二分裂繁殖。广泛用于饲喂贻贝、牡蛎、泥蚶等，是贻贝、海湾扇贝、刺参、对虾幼体良好饵料。
[0003]关于等鞭金藻培养方法，过去杨海波等公开了鞭金藻的培养方法(申请号CN201510282183.5)，所述方法包括向培养体系中添加浓度为412?1372mmol/L的甘油的步骤。培养体系中加入浓度为412?1372mmol/L的甘油，培养至生长平衡期收获藻细胞，细胞蛋白含量和产量最高分别达细胞干重的32 %和0.56g干重/L，分别比对照组提高61.9 %和86.7%。该方法简单易行，为等鞭金藻细胞内高价值蛋白生产提供了新方法，且为生物柴油副产物甘油的利用提供了新途径，但成本较高，操作麻烦。另外，清华大学的胡洪营等公开了一种金藻的培养方法(申请号CN200810223060.4)，该发明以植物浸提液为有机物培养基，在室温，自然光照的条件下或置于人工气候箱中，对金藻藻种进行培养，采收后用于控制水华。吞噬水华藻类实验表明通过此方法获得的金藻可用于治理水华。该发明培养金藻所用培养基原材料易得、廉价、能耗少、产量高，且培养中无需特殊设备，易实现;所培养金藻可满足水华治理要求，但占地面积大，易污染。
[0004]为了克服目前技术不足，本发明提供了一种利用LED节能灯和摇床培养球等鞭金藻的方法，所公开的培养球等鞭金藻的营养液配方更科学、合理，培养球等鞭金藻生长快，产量高，占地面积小，投资少，成本低，易于操作，不易污染，生产不受季节限制，藻细胞内高不饱和脂肪酸EPA、DHA含量高，用于照明的电能消耗降低42%。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种利用LED节能灯和摇床培养球等鞭金藻的方法，本目的是通过如下技术方案实现的:
[0006]步骤I球等鞭金藻培养液的配制球等鞭金藻培养液由以下重量份数的配料组成:尿素0.2-0.5份，磷酸二氢钾0.03-0.07份，葡萄糖酸锰0.0003-0.0008份，醋酸锌0.04-0.09份，碘酸钾0.01-0.04份，硫酸钴0.00005-0.00009份，砸酸钠0.0002-0.0007份，钼酸钠0.004-0.009 份，五氧化二钒 0.0003-0.0007 份，维生素 BI 0.001-0.004 份，维生素 B120.005-0.008份，维生素H 0.001-0.005份，叶酸0.0002-0.0006份，肌醇0.0007-0.0009份，复合中草药液1-3份，萘乙酸0.0OO1-0.0004份，煮沸冷却的海水100份。其中复合中草药液制备方法:按重量比取银翘1-3份，野菊2-7份，青蒿3-8份，甘草2-7份，芦根1-5份，纯净水100份，加热，煮沸，然后文火继续煮沸3分钟，停火，冷却到室温，弃药渣，取药液。培养液中各组分的生理功能如下:尿素，磷酸二氢钾主要提供球等鞭金藻金藻生长所需要的氮、磷；葡萄糖酸锰，醋酸锌，碘酸钾，硫酸钴，砸酸钠，钼酸钠，五氧化二钒主要提供微量元素锰，锌，碘，钴，砸，钼，钒;维生素BI，维生素B12，维生素H，叶酸，肌醇主要提供各种维生素;复合中草药液主要用于杀灭和抑制藻液中的细菌、病毒和原生动物:萘乙酸是一种植物生长刺激素，对球等鞭金藻生长有很好促进作用。
[0007]步骤2球等鞭金藻接种取一容积为5000毫升的三角烧瓶，洗刷干净，加入步骤I所述的球等鞭金藻培养液2500毫升，然后取处于指数生长期、干净、无污染、生长旺盛的球等鞭金藻接种，接种密度8万个细胞/毫升，轻轻摇匀，用两层干净报纸和橡皮筋封住瓶口，待用；
[0008]优选地，步骤2为:
[0009]球等鞭金藻接种方法:取一容积为5000毫升的三角烧瓶，洗刷干净，将洗刷干净后的三角烧瓶再采用消毒剂消毒20分钟，所述消毒剂为中草药复合消毒剂;所述中草药复合消毒剂组成成分(重量份数比):红背菜2-4份，鱼腥草6-9份，柴胡5-8份，连钱草7-12份，藿香10-15份，苍术7-12份，地肤子8-15份，紫花地丁5_7份，麦冬3_6份，板蓝根0.5-0.9份，百部10-14份，穿心莲5-8份，蒲公英2-6份，桑黄1-3份;所述消毒剂的制备方法为:按重量配比称取各中药后加入药材15-30倍重量份的纯净水，煮沸，然后文火继续煮沸3分钟，停火，冷却到室温，弃药渣，即得所述消毒剂。
[0010]步骤3球等鞭金藻培养将步骤2所述的三角烧瓶连同其中的藻液置于一摇床上，放进微藻培养室内进行培养，微藻培养室内空调控温，LED节能灯提供照明，以LED节能灯的瓦数和灯泡的数量多少来调节光照强度;共培养9天，前5天设置光照强度60001UX，温度250C，光周期设为L12+D12，即12小时光照，12小时黑暗，然后再12小时光照，12小时黑暗，循环往复；后4天设置光照强度80001uX，温度26°C，光周期设为L16+D8，即16小时光照，8小时黑暗，然后再16小时光照，8小时黑暗，循环往复;其中摇床在照明和黑暗期间一直开动，避免藻细胞下沉，过度拥挤，缺少光照、营养和气体而死。到第6天末，添加步骤I所述的球等鞭金藻培养液200毫升，以补充消耗掉的营养盐;到第7天末，添加蒸馏水150毫升，以补充挥发掉的水分。到第9天末，球等鞭金藻密度可达到5000万± 1000万个细胞/毫升，停止培养，关闭摇床和LED节能灯，取开橡皮筋和报纸，将藻液轻轻摇匀，从瓶口倒出，培养完毕。
[0011]有益结果
[0012]与传统技术相比，本发明所公开的培养球等鞭金藻的营养液配方更科学、合理，培养球等鞭金藻生长快，产量高，占地面积小，投资少，成本低，易于操作，不易污染，生产不受季节限制，藻细胞内高不饱和脂肪酸EPA、DHA含量高，用于照明的电能消耗降低42%。
【附图说明】
[0013]图1利用LED节能灯和摇床培养球等鞭金藻的方法图；
[0014]瓶口处用2层干净报纸和橡皮筋封住。
【具体实施方式】
[0015]下面结合实施例进一步对该技术进行说明。
[0016]一种利用LED节能灯和摇床培养球等鞭金藻的方法，本目的是通过如下技术方案实现的:
[0017]步骤I球等鞭金藻培养液的配制球等鞭金藻培养液由以下重量份数的配料组成:尿素0.2-0.5份，磷酸二氢钾0.03-0.07份，葡萄糖酸锰0.0003-0.0008份，醋酸锌0.04-0.09份，碘酸钾0.01-0.04份，硫酸钴0.00005-0.00009份，砸酸钠0.0002-0.0007份，钼酸钠0.004-0.009 份，五氧化二钒 0.0003-0.0007 份，维生素 BI 0.001-0.004 份，维生素 B120.005-0.008份，维生素H 0.001-0.005份，叶酸0.0002-0.0006份，肌醇0.0007-0.0009份，复合中草药液1-3份，萘乙酸0.0001 -0.0004份，煮沸冷却的海水1000份。其中复合中草药液制备方法:按重量比取银翘1-3份，野菊2-7份，青蒿3-8份，甘草2-7份，芦根1-5份，纯净水100份，加热，煮沸，然后文火继续煮沸3分钟，停火，冷却到室温，弃药渣，取药液。培养液中各组分的生理功能如下:尿素，磷酸二氢钾主要提供球等鞭金藻金藻生长所需要的氮、磷；葡萄糖酸锰，醋酸锌，碘酸钾，硫酸钴，砸酸钠，钼酸钠，五氧化二钒主要提供微量元素锰，锌，碘，钴，砸，钼，钒;维生素BI，维生素B12，维生素H，叶酸，肌醇主要提供各种维生素;复合中草药液主要用于杀灭和抑制藻液中的细菌、病毒和原生动物;萘乙酸是一种植物生长刺激素，对球等鞭金藻生长有很好促进作用。
[0018]步骤2球等鞭金藻接种取一容积为5000毫升的三角烧瓶，洗刷干净，加入步骤I所述的球等鞭金藻培养液2500毫升，然后取处于指数生长期、干净、无污染、生长旺盛的球等鞭金藻接种，接种密度8万个细胞/毫升，轻轻摇匀，用两层干净报纸和橡皮筋封住瓶口，待用；
[0019]优选地，步骤2为:
[0020]球等鞭金藻接种方法:取一容积为5000毫升的三角烧瓶，洗刷干净，将洗刷干净后的三角烧瓶再采用消毒剂消毒20分钟，所述消毒剂为中草药复合消毒剂;所述中草药复合消毒剂组成成分(重量份数比):红背菜2-4份，鱼腥草6-9份，柴胡5-8份，连钱草7-12份，藿香10-15份，苍术7-12份，地肤子8-15份，紫花地丁5_7份，麦冬3_6份，板蓝根0.5-0.9份，百部10-14份，穿心莲5-8份，蒲公英2-6份，桑黄1-3份;所述消毒剂的制备方法为:按重量配比称取各中药后加入药材15-30倍重量份的纯净水，煮沸，然后文火继续煮沸3分钟，停火，冷却到室温，弃药渣，即得所述消毒剂。
[0021]步骤3球等鞭金藻培养将步骤2所述的三角烧瓶连同其中的藻液置于