构成分别为：
[0036] LB液体培养基构成为(每L):酵母粉5g;蛋白腺lOg;化C1 5g;采用化抽K)3、Na出P〇3 调节抑至7.0~8.0。
[0037] 选择培养基I的构成为(每L): KW)3〇. 58g;二水合巧樣酸Ξ钢3.27g;化C1 4g;六种 微量元素溶液各3ιΛ;采用Na2HP〇3、Na出P〇3调节pH至7.0~8.0。
[0038] 固体培养基Π 的构成为:于选择培养基I中加入15~20g/L的琼脂粉制成。
[0039] 所述六种微量元素溶液由MgS〇4 · 7出0 3.01g、MnS〇4 ·出0 3.36g、曲B〇3l.l2g、 化S〇4 · 7出0 3g、FeS化· 7出0 0.3gXaCl2〇.6g分别溶于1L去离子水所得。
[0040] 2、菌株的鉴定
[004。 经鉴定，菌株化为革兰氏阴性粗短杆菌，菌体宽为0.6~1.0皿、长为1.0~2.2皿， 有周身鞭毛、无芽抱，其扫描电镜形态见图1;在抑为7.0~8.0的蛋白腺-酵母粉固体培养基 上易生长形成菌落，菌落呈规则圆形、大而湿润、表面光滑呈黏液状、直径约为1~4mm、中屯、 凸起且有核。
[0042] 该菌株的16S rDNA基因序列见序列表，序列长度为1383bp。在Genbank中其基因序 列的登陆号为KU866460。将该序列输入Genbank进行比对，比对结果显示其与linterobacter sp.的序列相似度最高为99%，结合该细菌的形态特征及各项生理特征，确认该菌株属于肠 杆菌化nterobacter sp.)，并将其命名为linterobacter sp.FL。
[0043] 本发明所提供的肠杆菌化nterobacter sp.)FL，于2016年1月12日保藏于中国微 生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、(CGMCC)，地址:北京市朝阳区北辰西路，保藏编 号为CGMCC No.11993。
[0044] 实施例二
[0045] 肠杆菌化nterobacter sp.)化对NO3--N的降解情况
[0046] 将肠杆菌化nterobacter SP.)化置于WKN03为唯一氮源、二水合巧樣酸Ξ钢为唯 一碳源的人工模拟废水中，考察菌株对n〇3^n、tn的去除W及反应过程中n〇2^n(亚硝酸盐 氮）、NH4+-N(氨氮）的累积情况。配水初始T0C(总有机碳）浓度约为800mg/L，TN浓度约为 80mg/L，抑控制在7.0~8.0。接种后于30°C、120巧m条件下恒溫振荡培养72h，每隔1化取样 测定相关指标。由图3可W看出，菌株能W巧樣酸Ξ钢为有机碳源，实现对N(V-N、TN的高效 去除，去除率最高分别可达85%、70%，且反应过程累积极少量的^2^巧日畑4^^。表明菌株 化在好氧条件下对N03 -N具有良好的去除效果。
[0047] 实施例Ξ
[004引肠杆菌化nterobacter sp.)化的胞外聚合物分泌特性分析
[0049] 检验肠杆菌（Ente;robactersp.)FL的胞外聚合物分泌特性，W肠杆菌 化nterobacter sp.)化的胞外聚合物分泌与细菌细胞生长、细胞聚集自沉的关系为例。将 肠杆菌化在人工模拟废水中连续培养84h，每隔12h取样测定OD600、细胞干重W及胞外蛋白 质、多糖含量。
[0050] 其中模拟废水水质情况为(每0:脚〇3〇.58邑;二水合巧樣酸^钢3.27邑;化(：14邑； 酵母粉Ig;牛肉膏2g;六种微量元素溶液(与实施例中相同）各31^;于301：、120巧111条件下恒 溫振荡培养。
[0051] 肠杆菌化在培养液中的生长及胞外聚合物的分泌情况如图4所示。由图4可知菌株 化在该培养条件下生长良好，表现为ODsooW及细胞干重在一定时间内的增加。4化后，随着 时间的增长细胞干重基本保持不变，即整个培养液中细胞含量基本维持不变，而上层培养 液的OD600逐渐下降，表明细胞发生聚集自沉从而使得上层培养液中细胞浓度值降低。此时 细菌分泌产生的胞外蛋白含量也逐渐增加而多糖含量基本维持不变，表明培养液中细胞聚 集自沉作用的发生与胞外蛋白分泌量的增加密切相关。上述实验表明肠杆菌化分泌产生胞 外聚合物，从而促使细胞发生聚集沉降W实现菌水分离。
[0052] 实施例四
[0化3] 肠杆菌化nterobacter sp.)化的聚集自沉特性分析
[0054] 采用W下聚集沉降性能测定实验来分析肠杆菌化nterobacter SP.)化应用于含 NCV-N废水处理过程中的聚集自沉特性：
[0055] 将肠杆菌化在如实施例Ξ的人工模拟废水中培养4她，形成如图2所示的聚集体， 将该聚集体吹散，并将培养液摇匀，取一定量摇匀后的培养液用ο. 9 %生理盐水调节OD600值 约为0.6左右;取上述调节后的培养液30mL于50mL离屯、管中，上下颠倒摇匀后静置，细胞聚 集并沉至容器底部，分别于1、2、3、4、化后取上层液体测定ODsgg。按下式计算聚集沉降率：
[0化6]
[0化7] 式中：At-t时刻的聚集沉降率，％ ;0〇6日日,日一0时刻液体0〇6日日值;ODsoo.t-t时刻液体 〇〇6〇日值;t 一静置沉降时间，h，取1、2、3、4、5。
[005引因微生物的絮凝聚集过程是一个可逆的生理过程，符合伪一级反应动力学方程， 故可按下式拟合并计算聚集沉降速率常数：
[0化9]
[0060] 式中:At-t时刻的聚集沉降率，％;Ae-达到平衡时的聚集沉降率，％;ki-聚集沉 降速率常数，; t-静置沉降时间，h，取1、2、3、4、5。
[0061] 实验结果如图5所示，结果表明肠杆菌化培养48h后，细菌的聚集沉降速率常数最 大为23.3^1，其最大聚集沉降率约40%。表明菌株化具有良好的聚集自沉能力，能一定程度 上实现脱氮反应后的菌水分离。
[0062] 本发明提供的肠杆菌化具有在好氧条件下进行反硝化高效去除废水中N03^N的特 性，反应只积累极少量的N02^-N、NH4+-N，可有效缓解传统两段式硝化-反硝化脱氮工艺对于 溶解氧需求不同的矛盾;且脱氮过程中能自发形成聚集体，具有自沉特性，能实现脱氮反应 后的菌水分离。基于该细菌的运两大特性，将其投入实际运行，可W提高污水处理的脱氮效 率、简化反应工艺运行管理程序、节约污水处理运行成本，具有良好的社会环境保护效益和 较为广阔的应用前景。
[0063] 本发明的上述实施例仅仅是为说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施 方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可W做出其他不 同形式的变化和变动。运里无法对所有的实施方式予W穷举。凡是属于本发明的技术方案 所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。
【主权项】
1. 一株肠杆菌(Enterobacter sp. )FL，保藏编号为CGMCC No. 11993。2. 保藏号为CGMCC No. 11993的肠杆菌FL对含氮有机废水处理的应用，其特征在于，肠 杆菌FL在好氧条件下，通过反硝化作用去除废水中的硝酸盐氮。3. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的含氮有机废水的碳氮比为5~25。4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的含氮有机废水的碳氮比为10~20。5. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的含氮有机废水pH值为5~10。6. 根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的含氮有机废水pH值为7~9。7. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的含氮有机废水的温度为20~40 °C。8. 根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的含氮有机废水的温度为25~35 °C。9. 根据权利要求3-8所述的任一应用，其特征在于，所述的含氮有机废水的碳氮比为10 ~20、？!1值为7~9、温度为20~30°(：;所述的肠杆菌?1^的最大聚集沉降率为40%，其分泌产生蛋 白质含量为10~100 mg/g细胞干重，以及多糖。
【专利摘要】本发明公开了一株肠杆菌及其应用。该菌株为肠杆菌（<i>Enterobacter</i><i></i>sp.）FL，于2016年1月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏编号为CGMCC？No.11993。该肠杆菌FL可应用于含氮有机废水的处理领域，在好氧的条件下通过反硝化作用去除废水中的硝酸盐氮；该肠杆菌脱氮过程中分泌产生以蛋白质、多糖等为主要成分的胞外聚合物，该类聚合物能引发细菌细胞自发聚集沉降，并实现菌水分离。该菌株具有好氧反硝化脱氮的能力，脱氮同时能自聚集形成沉淀，具有聚集自沉特性，使后期构建以该菌株为功能菌的反应器来实现好氧反硝化脱氮、以及泥水分离获得澄清的出水成为可能，具有广阔的应用前景和良好的社会环保效益。CGMCCNO.1199320160112
【IPC分类】C02F101/16, C02F3/34, C12R1/01, C02F3/02, C12N1/20
【公开号】CN105670977
【申请号】CN201610203762
【发明人】赵彬, 汪霞, 田东伟, 田梦, 安强
【申请人】重庆大学
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2016年4月1日