伊贝母中的异甾体类生物碱化合物及其制备方法和用图
【技术领域】
[0001] 本发明为植物化学领域，具体为中药有效成分的提取、分离与制备工艺领域，尤其 设及从伊贝母药材中提取、分离具有药理活性的五个新的异酱体类生物碱化合物。
【背景技术】
[0002] 伊贝母是百合科植物伊贝母(Fritillaria pallidiflora Schrenk)或新疆贝母 (化itilIania wall!jewii Regel)的干燥鱗茎，其植物主产地为新疆，前者分布在新疆西北 部伊宁、缓定、霍城一带，后者分布在新疆天山地区。古代维吾尔医用当地贝母治疗疾病，18 世纪后期，在维吾尔医药中有临床使用历史。伊贝母已收载于《中国药典》(2000年版)一部， 《维吾尔药志》上册，伊贝母具有清热润肺，化疲止咳等功效。伊贝母产量高、生物碱含量在 同类贝母中相对较高，抗病力强和药材价格低廉，特别是其平喘、桂疲、镇咳等生理活性较 强，近年来，对伊贝母的研究倍受关注。
[0003] 目前国内外有关伊贝母化学成分的提取分离和结构鉴定及其相关的药理学研究 尚处于初始阶段。因此对伊贝母中具有生物活性的化学成分进行提取分离研究很有必要， 对伊贝母平喘作用的探究具有很大的学术价值。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于，提供伊贝母药材中的异酱体类生物碱化合物及其制备方法和 应用，该化合物W伊贝母药材为原料，用溶剂提取，酸溶碱沉后，溶剂萃取，通过硅胶柱层析 法、聚酷胺柱层析法、反相柱层析法或葡聚糖凝胶LH-20柱层析法中的S种或四种方式进行 分离，采取薄层层析法检测分析，得到5个新的异酱体类生物碱化合物。所述的5个新的异酱 体类生物碱化合物在制备治疗平喘药物中的用途。
[0005] 本发明所述的一种伊贝母药材中的异酱体类生物碱化合物，该化合物的结构式 为：
[0006]
[0007]
[000引其中结构式（虹）中：Ri释基或葡萄糖巧基，R2氨，R3氨、甲基或径基，R冲基或径基， Rs氨，Rs氨或甲基，化氨或甲基;所设及的5个化合物为：
[0009] 化合物1的化学名称为22,26-亚氨基-17,23-酸-5a-介襲芦胺-6-酬-30，140-二径 基-1化，13a-环氧；
[0010] 化合物2的化学名称为20S，22S，25S，5a-襲芦胺-14，15，16，17-脱四氨-30，230-二 径基-6-酬；
[0011] 化合物3为Ri径基，R2氨(0)，R3甲基，1?4径基，Rs氨(0)，Rs甲基，R?氨，化合物名称为 22R，25R-5a-瑟烧-30，200-二径基-6-酬；
[001 ^ 化合物4为Ri葡萄糖巧基，R2氨(0 )，基，R冲基，Rs氨(0 )，Rs氨，R?甲基，化合物 名称为22R，25S-5a-瑟烧-20a-径基-6-酬-30-D-葡萄糖巧；
[001引化合物5为R淹基，R2氨(a)，R3氨，R4径基，Rs氨，Rf5甲基，R?氨，化合物名称为25R-5 口-瑟烧-30,200-二径基-6-酬。
[0014] 所述伊贝母中的异酱体类生物碱化合物的制备方法，按下列步骤进行：
[0015] a、W伊贝母药材为原料，粉碎后，在室溫或溫度45°C，用体积浓度为75-95%的乙 醇或甲醇水溶液渗漉提取或用5倍量的氯仿进行回流提取，然后真空浓缩得到浓缩液；
[0016] b、将步骤a得到的浓缩液依次用体积浓度为5%盐酸和氨水进行处理，再用氯仿萃 取3-5次，真空蒸干溶剂，得到萃取物浸膏；
[0017] C、将步骤b得到的萃取物浸膏经硅胶柱层析法、聚酷胺柱层析法、反相柱层析法或 葡聚糖凝胶LH-20柱层析法的S种方式进行分离，即得到5个异酱体类生物碱化合物1为22， 26-亚氨基-17,23-酸-5a-介襲芦胺-6-酬-30,1处-二径基-1化，13a-环氧;化合物2为20S， 22S，25S，5a-襲芦胺-14，15，16，17-脱四氨-30，230-二径基-6-酬;化合物3为R泥基，R2氨-0，R3甲基，1?4径基，Rs氨-0，Rs甲基，R?氨的22R，25R-5a-瑟烧-30，200-二径基-6-酬;化合物4 为Ri葡萄糖巧基，R2氨-e，R3^基，R冲基，Rs氨-e，Re氨，R7甲基的22R，25S-5a-瑟烧-20曰-径 基-6-酬-30-D-葡萄糖巧;化合物5为化径基，R2氨-a，R3氨，1?4径基，化氨，Rs甲基，R?氨的25R-5a-瑟烧-30，200-二径基-6-酬。
[0018] 步骤C中硅胶柱层析法为常压或加压柱层析，填料为硅胶，洗脱剂为=氯甲烧和甲 醇的混合物，采用等度洗脱或梯度洗脱。
[0019] 步骤C中聚酷胺柱层析法为常压或加压柱层析，洗脱剂为甲醇、水或两者的混合 物，采用等度洗脱或梯度洗脱。
[0020] 步骤C中反向柱层析法为常压或加压柱层析，洗脱剂为体积浓度10-90%甲醇水溶 液和12%乙腊酸水溶液，或体积浓度45%甲醇=乙胺水溶液和53%甲醇=乙胺水溶液，采 取等度洗脱或梯度洗脱。
[0021] 步骤C中葡聚糖凝胶LH-20柱层析法的洗脱剂为甲醇、S氯甲烧、体积比1:1的甲 醇氯甲烧，采用等度洗脱。
[0022] 所述伊贝母中的异酱体类生物碱化合物在制备治疗平喘的药物中的用途。
[0023] 本发明所述的伊贝母中的异酱体类生物碱化合物及其制备方法和用途，所得的5 个异酱体类生物碱化合物采用薄层层析法检测分析进行结构确定。
[0024] 本发明所述的伊贝母中的异酱体类生物碱化合物及其制备方法和用途，其中：
[0025] 化合物1，为淡黄色粉末状固体，薄层板喷W改良舰化祕钟显色剂溶液，显橘黄色， HR-T0F-MS(m/z)给出的准分子离子峰[M+H]+460.3062( cal. 460.3063)，确定分子式为 C細4iN〇5 ;
[0026] Ih NMR和13c NMR数据见表1和表4;
[0027] 根据Ih NMR和1化醒R及二维谱数据确定化合物1的结构为22,26-亚氨基-17,23-酸-5a-介襲芦胺-6-酬-30，1处-二径基-1化，13a-环氧；
[00%]化合物2,为白色粉末状固体，薄层板喷W改良舰化祕钟显色剂溶液，显橘黄色， HRTOF-MS(m/z)给出的准分子离子峰[M+HT426.3000 (cal. 426.3008 )，确定分子式为 C27H43NO2 ；
[0029] Ih NMR和"C NMR数据见表2和表4;
[0030] 根据Ih醒R和I3C醒R及二维谱数据确定化合物2的结构为205,225,255,5〇-襲芦 胺-14，15，16，17-脱四氨-30，230-二径基-6-酬；
[0031] 化合物3,为白色粉末状固体，薄层板喷W改良舰化祕钟显色剂溶液，显橘黄色， HRT0F-MS(m/z)给出的准分子离子峰[M+H]+430.3318(cal. 430.3321)，确定分子式为 C27H43NO3 ；
[0032] Ih NMR和"C NMR数据见表2和表4;
[0033] 根据Ih醒R和1化醒R及二维谱数据确定化合物3的结构为22R，25R-5a-瑟烧-30， 200-二径基-6-酬；
[0034] 化合物4,为白色粉末状固体，薄层板喷W改良舰化祕钟显色剂溶液，显橘黄色， HRT0F-MS(m/z)给出的准分子离子峰[M+H]+592.3852(cal. 592.3849)，确定分子式为 C33H53NO8；
[0035] Ih NMR和"C NMR数据见表3和表4;
[0036] 根据Ih NMR和1化NMR及二维谱数据确定化合物4的结构为22R，25S-5a-瑟烧-20a- 径基-6-酬-30-D-葡萄糖巧；
[0037]化合物5,为白色粉末状固体，薄层板喷W改良舰化祕钟显色剂溶液，显橘黄色， HRT0F-MS(m/z)给出的准分子离子峰[M+H]+414.3379(cal. 414.3372)，确定分子式为 C27H43NO2 ；
[003引 Ih NMR和I3C NMR数据见表3和表4;
[0039] 根据Ih NMR和1化NMR及二维谱数据确定化合物5的结构为25R-5a-瑟烧-30,200-二径基-6-酬。
[0040] 5个新的化合物结构鉴定实验：
[0041 ]表 1.化合物 1 的Ih NMR数据[600MHz，S(ppm)(J = Hz)]
[0042]
[0043] a気代氯仿;b気代二甲亚讽
[0044] 表2.化合物2和3的Ih NMR数据[600MHz,S(PPm)(J = Hz)]
[0045]
[0046] a気代氯仿
[0047] 表3.化合物4和5的Ih NMR数据[4:400MHz;5:600MHz，S(ppm)(J = Hz)]
[004引
[OC... ……'乂，…，、，AT
[0化0]表4.化合物 1-5的 1化 NMR数据[l-3,5:150MHz;4:100MHz，S(ppm)] 「nnc；i 1
[0052] a気代氯仿;b気代二甲亚讽;e気代化晚;d気代甲醇。
【附图说明】
[0053] 图1为本发明