核酸分离纯化试剂盒组件的制作方法
【技术领域】
[0001 ]本实用新型涉及生物医药领域,更具体地说,它涉及一种应用于吸附柱法提取全血中DNA基因组的试剂盒装置。
【背景技术】
[0002]核酸的分离纯化是分子生物学的重要组成部分,是其下游PCR、酶切、DNA测序等各种实验过程的重要前处理环节,换句话说,核酸质量的好坏直接决定后续试验的成败。传统的核酸分离提纯方法是酚-氯仿抽提核酸,该法提取的缺点是不可避免的存有蛋白质、糖类、盐类以及有机溶剂等杂质的污染;另一种较为常见的核酸提纯方法就是吸附柱法,这种方法操作流程为:
[0003](I)首先,取一定量的血样以及对应量的PBl溶液加入试剂盒内,并震荡I分钟左右;
[0004](2)向上一步的溶液中加入与PBl溶液等量的PB2溶液,再次震荡一段时间;
[0005](3)将步骤二中的液体的一部分注入纯化管柱中,这个部分包括有吸附柱和废液收集管两个部分套接而成,溶液加入到套设在废液收集管中的吸附柱内腔;
[0006](4)将这个纯化管柱放置到离心机上进行离心处理约I分钟的时间,取出内部的吸附柱,并清理掉废液收集管中的废液;
[0007]( 5)向上一步的溶液中加入PB3溶液,再次离心处理,并清理掉废液收集管中的废液;
[0008](6)向上一步的溶液中加入1^4溶液,再次离心处理,并清理掉废液收集管中的废液;
[0009](7)将上述步骤得到的、存储于纯化管柱中的物质离心处理约3分钟,并将吸附柱取出;
[0010](8)将存储有离心处理后物质的吸附柱安装至另一个液体收集管中,向吸附柱中加入少量的PB5溶液,离心处理I分钟左右,此时存储在液体收集管中的液体即为核酸萃取液,是后续实验过程的实验对象。
[0011]上述过程中,步骤4至步骤7中需要多次对纯化管柱进行离心处理,在这个过程存在两个问题,一是吸附柱在离心处理时容易在离心力的作用下脱离废液收集管;二是吸附柱尺寸较小,内部液体的量多则会导致离心不充分、少又会影响最后核酸萃取液的量。申请日为2009.6.16、申请号为200920076350.0的实用新型专利(以下称为对比文件I)中公开了一种核酸分离吸附柱,包括吸附柱、废液收集管,吸附柱套在废液收集管内,吸附层置于吸附柱底部,在吸附柱内设有卡固吸附层的卡扣。其主要解决的是步骤4至步骤7中多次对纯化管柱进行离心处理时,容易出现的吸附柱脱离的废液收集管的问题。
[0012]对比文件I中尚未解决的问题是吸附柱内液体的定量问题,也就是说,从试剂盒到纯化管柱的转移过程需要引入其他定量仪器,以控制进入吸附柱中的溶液的量,以保证离心处理的效果。不仅过程较为麻烦,并且仪器的清洗要求也较为严格,一旦清洗不到位会影响最终的核酸萃取液的效果。
【实用新型内容】
[0013]针对现有技术存在的不足,本实用新型的目的在于提供一种可以无需引入定量仪器,单靠自身结构实现定量转移液体至吸附柱内的核酸分离纯化试剂盒组件。
[0014]为实现上述目的,本实用新型提供了如下技术方案:一种核酸分离纯化试剂盒组件,包括有上下开口的圆形试剂盒、废液收集管以及悬空卡设于废液收集管内部的吸附柱,其特征是:所述圆形试剂盒的底部与卡接于吸附柱的上开口,圆形试剂盒的上开口上设置有用于定量挤压并密封所述试剂盒内部空间的推进装置。
[0015]通过采用上述技术方案,将圆形试剂盒与吸附柱卡接,吸附柱又卡接于废液收集管内,这样,则在核酸提纯的过程中,无需引入任何外部的仪器即可实现液体的转移,尤其是在圆形试剂盒的顶部开口上设置的推进装置,通过推进装置的移动,从而定量的挤压圆形试剂盒的内部空间,从而利用推进的气体压力将圆形试剂盒内部的液体定量的挤入吸附柱内腔,完成【背景技术】中的前七步的内容,整个过程无需计量设备,单靠自身结构即可实现定量转移液体的目的。
[0016]本实用新型进一步设置为:所述圆形试剂盒底部的外圆表面上设置有卡槽,所述吸附柱上相应位置处设置有与卡槽尺寸适配的凸棱。
[0017]通过采用上述技术方案,由于在萃取核酸的过程中需要多次进行离心处理,因此,将吸附柱与圆形试剂盒底部利用卡槽与凸棱结构的配合形成更为紧密的卡接关系,有利于提高在离心处理过程中两者之间的卡接强度。
[0018]本实用新型进一步设置为:所述圆形试剂盒下端呈倒锥形设置,所述卡槽设置于倒锥形面上尺寸与凸棱尺寸适配的位置处。
[0019]通过采用上述技术方案,由于核酸萃取液的配置过程中,通常圆形试剂盒的内的液体量要远大于挤压至吸附柱内的液体的量,并且,由于圆形试剂盒的底部开口,为了防止内部液体在不受挤压时流入吸附柱内,因此圆形试剂盒的底部开口要做的较小,以给予内部液体一个较大的小孔阻尼力。因此,将圆形试剂盒底部设置成倒锥形的结构有利于推进装置挤压圆形试剂盒内腔时,将内部液体挤出,防止圆形试剂盒底部的液体难以流入吸附柱内。
[0020]本实用新型进一步设置为:所述推进装置与圆形试剂盒的上开口螺纹连接。
[0021]通过采用上述技术方案,螺纹结构本身的螺距是一定值,因此,在设计之初已知晓螺纹连接的螺距,这个值可以直接作为推进装置的定量标准,即通过螺距、螺纹的公称直径直接计算出旋转圈数与圆形试剂盒内腔体积变化的关系,从而简单、精确的实现推进装置的定量。
[0022]本实用新型进一步设置为:所述吸附柱上与废液收集管卡接的位置处设置有弹性卡环,所述废液收集管内腔对应位置配和设置有凹槽,当所述吸附柱卡接于废液收集管内时,所述弹性卡环与凹槽之间过盈配合。
[0023]通过采用上述技术方案,由于吸附柱与废液收集管在立新处理时是与圆形试剂盒一起放置到离心设备上的,因此,两者之间的卡接关系也要可靠,弹性卡环与凹槽过硬配合的形式,使两者之间不仅具备卡接力,还有由弹性卡环挤压凹槽带来的压力,因此,两者的接合力更为可靠。
[0024]本实用新型进一步设置为:所述圆形试剂盒的外壁上设置有用于标记圆形试剂盒内部液体体积的刻度线。
[0025]通过采用上述技术方案,由于吸附柱内的液体过多或者过少均会影响最后的核酸萃取液的质量,因此,刻度线的设置有利于精确的控制挤