一种库德里阿兹威氏毕赤酵母菌在土壤中的应用及其方法与流程

文档序号:13427621阅读:632来源:国知局
本发明涉及酸性土壤改良
技术领域
,具体涉及一种库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌在土壤中的应用及其方法。
背景技术
:酸性土壤是ph值小于7的土壤总称,包括砖红壤、赤红壤、红壤、黄壤和燥红土等土类。我国热带、亚热带地区,广泛分布着各种红色或黄色土壤的酸性土壤。当地气温高、雨量大,年降雨多在1500mm以上。这种高温多雨、湿热同季的特点,使土壤的风化和成土作用均甚强烈,生物物质的循环十分迅速。我国土壤酸化情况越来越严重,酸化的土地面积已经扩大到我国耕地面积的40%以上,而且经常有成片发生的情况,尤其在我国的南方,随着大量农药和氮素化肥的施用,土壤的酸化面积和程度逐渐趋于严峻。传统酸性土壤改良的方法是单独运用石灰或石灰石粉,施用石灰能明显地使酸性土壤的酸度降低,但有时会使复酸化程度加强。市场上还有一些酸性土壤复合改良剂,主要成分是石灰和某些矿物或工业副产品的混合物,但是这些改良剂中的大多数含有一定量的有毒金属元素,如铅、镉、砷、铬等,存在着对土壤环境的污染问题,造成二次污染,并且成本高。技术实现要素:本发明的一个目的是针对上述问题,提供一种库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌在土壤中的应用及其方法,本发明适用于农药和/或化肥过量喷施和/或有机废水排放造成的酸性土壤的ph值提高,本发明通过库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌接种至酸性土壤中自然繁殖培养30-90天后提高酸性土壤的ph值,能将酸性土壤ph值最高提高至7.1,同时库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌改良酸性土壤不会造成二次污染,还能通过库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌增加土壤的有机质,不仅可以提高酸性土壤的ph,改善土壤结构,还能防止土壤酸化碱化。本发明提供的技术方案为:一种库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌在土壤中的应用,应用于提高酸性土壤的ph值,一般的酸性土壤ph值为4-6,本发明提到的酸性土壤包括农药和/或化肥过量喷施和/或有机废水排放造成的酸性土壤。进一步的是,能提高所述酸性土壤的ph值最高至7.1。进一步的是,所述库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌的培养方法包括以下步骤:步骤一、将库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌种接种至马铃薯葡萄糖琼脂液体培养基中放置于温度为25-30℃恒温箱里培养2-5天;步骤二、将经过步骤一培养的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌分离与蒸馏水混合后接种至粗培养基中放置于温度为25-30℃恒温箱里培养2-5天,得到所述库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌;其中所述粗培养基主要包括以下材料:豆粕、麦麸、稻壳粉、葡萄糖、硫酸锌、硫酸镁、硼、蛋白胨。进一步的是,所述粗培养基主要包括以下质量分数材料:豆粕35-45%、麦麸25-35%、稻壳粉20-30%、葡萄糖0.5-3%、硫酸锌0.5-2%、硫酸镁0.5-2%、硼0.5-2%、蛋白胨0.2-1.5%。本发明还提供一种所述的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌提高酸性土壤ph值的方法,其特征在于,将培养好的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌分离与无菌蒸馏水混合后接种至酸性土壤中,可按任意浓度接种。进一步的是,接种后30-90天,酸性土壤ph值提高至7.1。本发明的有益效果如下:本发明发现库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌的一种用途提高酸性土壤的ph,将库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌接种至酸性土壤中自然繁殖培养30-90天后提高酸性土壤的ph值,能将酸性土壤ph值最高提高至7.1,还能通过库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌增加土壤的有机质,不仅可以提高酸性土壤的ph,改善土壤结构,还能防止土壤酸化碱化,本发明改善酸性土壤安全,成本低,不会造成二次污染,本发明使用成本低,对于酸性土壤的治理效果显著,具有显著的经济效益。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。发明人从某生物科技公司购得库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌种,制备马铃薯葡萄糖琼脂液体培养基:将称量去皮马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂16g;将马铃薯切成小块,放入锅中,加经过灭菌的蒸馏水1000ml,煮沸30min。用纱布滤去马铃薯残渣;将马铃薯滤液放回锅中,加入琼脂,加热熔化;在琼脂熔化的过程中,需要用玻璃棒不断搅拌,并控制火力不要使培养基溢出或烧焦;加入葡萄糖;葡萄糖溶解后,加入经过灭菌的蒸馏水以补充加热过程中损失的水分,定容至1000ml;在以下条件进行灭菌:0.103mpa,121℃,高压蒸气灭菌20分钟;制备粗培养基主要包括以下材料:豆粕、麦麸、稻壳粉、葡萄糖、硫酸锌、硫酸镁、硼、蛋白胨;所述粗培养基主要包括以下质量分数材料:豆粕35-45%、麦麸25-35%、稻壳粉20-30%、葡萄糖0.5-3%、硫酸锌0.5-2%、硫酸镁0.5-2%、硼0.5-2%、蛋白胨0.2-1.5%;优选的是粗培养基主要包括以下质量分数材料:豆粕42%、麦麸30.5%、稻壳粉20%、葡萄糖3%、硫酸锌1.5%、硫酸镁1%、硼1%、蛋白胨1%;按上述优选的质量分数材料称取:豆粕84g、麦麸61g、稻壳粉40g、葡萄糖6g、硫酸锌3g、硫酸镁2g、硼2g、蛋白胨2g,将称取的材料与经过灭菌的蒸馏水混合,在以下条件进行灭菌:0.103mpa,121℃,高压蒸气灭菌20分钟。下面进行菌种培养:步骤一、将库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌种直接接种至马铃薯葡萄糖琼脂液体培养基中放置于温度为27℃恒温箱里培养4天;步骤二、将经过步骤一培养的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌分离与无菌蒸馏水混合后接种至粗培养基中放置于温度为27℃恒温箱里培养4天,得到所述库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌。本发明人通过环保局了解广西由于农药和/或化肥过量喷施和/或有机废水排放造成的酸性土壤分布,酸性土壤ph一般在4.0-6.0,根据不同土壤的不同ph值进行实施试验,宾阳某地的酸性土壤ph为4.0,上林某地的酸性土壤ph为4.2,武鸣某地的酸性土壤ph为4.6,马山某地的酸性土壤ph为5.1,隆安某地的酸性土壤ph为5.5,宾阳某地的酸性土壤ph为5.8,横县某地的酸性土壤ph为6.0,均通过取样测试再进行以下实施例,其中每个实施例0.2亩地酸性土壤作为试验对象。实施例1在广西宾阳某地呈酸性的土壤地,取样测试土壤的初始ph值为4.0(测试方法为ny/t1377-2007土壤的ph测定),将培养好的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌与无菌蒸馏水混合后的菌液,菌液中库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌浓度为1.5×106cfu/ml,直接喷洒在酸性土壤上1000l/亩菌液,环境温度为20-35℃(夏天),50天后土壤的ph达到了7.1,再放置20天,土壤的ph保持7.1,在此过程中每5天搅拌土壤1次,每5天采用ph计测试土壤ph值,将测试得到的数据记录到表1,表1天数0d5d10d15d20d25d30d35dph4.04.34.54.74.95.35.76.1天数40d45d50d55d60d65d70dph6.56.97.17.17.17.17.1实施例2与实施1同一片酸性土壤地的另一部分,在广西宾阳某地呈酸性的土壤地,取样测试土壤的初始ph值为4.0(测试方法为ny/t1377-2007土壤的ph测定),将培养好的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌与无菌蒸馏水混合后,菌液中库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌浓度为1.5×106cfu/ml,直接喷洒在酸性土壤上1000l/亩菌液,环境温度为10-25℃(冬天),60天后土壤的ph达到了7.1,再放置20天,土壤的ph保持7.1,在此过程中每5天搅拌土壤1次,每5天采用ph计测试土壤ph值,将测试得到的数据记录到表2,表2天数0d5d10d15d20d25d30d35d40dph4.04.24.54.75.05.35.65.96.2天数45d50d55d60d65d70d75d80dph6.46.76.97.17.17.17.07.1实施例3在广西上林某地的酸性土壤,取样测试土壤的初始ph值为4.2(测试方法为ny/t1377-2007土壤的ph测定),将培养好的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌与无菌蒸馏水混合后的菌液,菌液中库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌浓度为1.5×106cfu/ml,直接喷洒在酸性土壤上1000l/亩菌液,环境温度为20-35℃(夏天),50天后土壤的ph达到了7.1,再放置20天,土壤的ph保持7.1,在此过程中每5天搅拌土壤1次,每5天采用ph计测试土壤ph值,将测试得到的数据记录到表3,表3实施例4在广西武鸣某地的酸性土壤,取样测试土壤的初始ph值为4.6(测试方法为ny/t1377-2007土壤的ph测定),将培养好的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌与无菌蒸馏水混合后的菌液,菌液中库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌浓度为1.5×106cfu/ml,直接喷洒在酸性土壤上1000l/亩菌液,环境温度为20-35℃(夏天),50天后土壤的ph达到了7.1,再放置20天,土壤的ph保持7.1,在此过程中每5天搅拌土壤1次,每5天采用ph计测试土壤ph值,将测试得到的数据记录到表4,表4天数0d5d10d15d20d25d30d35dph4.64.74.85.05.15.36.16.3天数40d45d50d55d60d65d70dph6.56.97.17.17.17.17.1实施例5在广西马山某地的酸性土壤,取样测试土壤的初始ph值为5.1(测试方法为ny/t1377-2007土壤的ph测定),将培养好的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌与无菌蒸馏水混合后的菌液,菌液中库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌浓度为1.5×106cfu/ml,直接喷洒在酸性土壤上1000l/亩菌液,环境温度为20-35℃(夏天),45天后土壤的ph达到了7.1,再放置20天,土壤的ph保持7.1,在此过程中每5天搅拌土壤1次,每5天采用ph计测试土壤ph值,将测试得到的数据记录到表5,表5天数0d5d10d15d20d25d30dph5.15.35.55.65.86.06.2天数35d40d45d50d55d60d65dph6.46.87.17.17.17.17.1实施例6在广西隆安某地的酸性土壤,取样测试土壤的初始ph值为5.5(测试方法为ny/t1377-2007土壤的ph测定),将培养好的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌与无菌蒸馏水混合后的菌液,菌液中库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌浓度为1.5×106cfu/ml,直接喷洒在酸性土壤上1000l/亩菌液,环境温度为20-35℃(夏天),45天后土壤的ph达到了7.1,再放置20天,土壤的ph保持7.1,在此过程中每5天搅拌土壤1次,每5天采用ph计测试土壤ph值,将测试得到的数据记录到表6,表6天数0d5d10d15d20d25d30dph5.55.75.86.06.16.26.4天数35d40d45d50d55d60d65dph6.76.97.17.17.17.17.1实施例7在广西宾阳某地的酸性土壤,取样测试土壤的初始ph值为5.8(测试方法为ny/t1377-2007土壤的ph测定),将培养好的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌与无菌蒸馏水混合后的菌液,菌液中库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌浓度为1.5×106cfu/ml,直接喷洒在酸性土壤上1000l/亩菌液,环境温度为20-35℃(夏天),40天后土壤的ph达到了7.1,再放置20天,土壤的ph保持7.1,在此过程中每5天搅拌土壤1次,每5天采用ph计测试土壤ph值,将测试得到的数据记录到表7,表7天数0d5d10d15d20d25d30d35d40d45d50d55d60dph5.85.96.16.36.46.66.97.07.17.17.17.17.1实施例8在广西横县某地的酸性土壤,取样测试土壤的初始ph值为6.0(测试方法为ny/t1377-2007土壤的ph测定),将培养好的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌与无菌蒸馏水混合后的菌液,菌液中库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌浓度为1.5×106cfu/ml,直接喷洒在酸性土壤上1000l/亩菌液,环境温度为20-35℃(夏天),40天后土壤的ph达到了7.1,再放置20天,土壤的ph保持7.1,在此过程中每5天搅拌土壤1次,每5天采用ph计测试土壤ph值,将测试得到的数据记录到表8,表8实施例9与实施1同一片酸性土壤地的另一部分,在广西宾阳某地呈酸性的土壤地,取样测试土壤的初始ph值为4.0(测试方法为ny/t1377-2007土壤的ph测定),将培养好的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌与无菌蒸馏水混合后,菌液中库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌浓度为1.5×106cfu/ml,直接喷洒在酸性土壤上100l/亩菌液,环境温度为20-35℃(夏天),80天后土壤的ph达到了7.1,再放置20天,土壤的ph保持7.1,在此过程中每5天搅拌土壤1次,每5天采用ph计测试土壤ph值,将测试得到的数据记录到表9,表9天数0d5d10d15d20d25d30d35d40d45d50dph4.04.14.24.34.54.64.85.15.35.45.5天数55d60d65d70d75d80d85d90d95d100dph5.75.96.26.56.87.17.17.17.17.1实施例10与实施1同一片酸性土壤地的另一部分,在广西宾阳某地呈酸性的土壤地,取样测试土壤的初始ph值为4.0(测试方法为ny/t1377-2007土壤的ph测定),将培养好的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌与无菌蒸馏水混合后,菌液中库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌浓度为1.5×106cfu/ml,直接喷洒在酸性土壤上500l/亩菌液,环境温度为20-35℃(夏天),60天后土壤的ph达到了7.1,再放置20天,土壤的ph保持7.1,在此过程中每5天搅拌土壤1次,每5天采用ph计测试土壤ph值,将测试得到的数据记录到表10,表10天数0d5d10d15d20d25d30d35d40dph4.04.14.34.54.85.15.45.86.2天数45d50d55d60d65d70d75d80dph6.46.76.97.17.17.17.17.1实施例11与实施1同一片酸性土壤地的另一部分,在广西宾阳某地呈酸性的土壤地,取样测试土壤的初始ph值为4.0(测试方法为ny/t1377-2007土壤的ph测定),将培养好的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌与无菌蒸馏水混合后,菌液中库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌浓度为1.5×106cfu/ml,直接喷洒在酸性土壤上1500l/亩菌液,环境温度为20-35℃(夏天),40天后土壤的ph达到了7.1,再放置20天,土壤的ph保持7.1,在此过程中每5天搅拌土壤1次,每5天采用ph计测试土壤ph值,将测试得到的数据记录到表11,表11天数0d5d10d15d20d25d30d35d40d45d50d55d60dph4.04.34.54.85.25.76.26.77.17.17.17.17.1实施例12与实施1同一片酸性土壤地的另一部分,在广西宾阳某地呈酸性的土壤地,取样测试土壤的初始ph值为4.0(测试方法为ny/t1377-2007土壤的ph测定),将培养好的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌与无菌蒸馏水混合后,菌液中库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌浓度为1.5×106cfu/ml,直接喷洒在酸性土壤上2000l/亩菌液,环境温度为20-35℃(夏天),30天后土壤的ph达到了7.1,再放置20天,土壤的ph保持7.1,在此过程中每5天搅拌土壤1次,每5天采用ph计测试土壤ph值,将测试得到的数据记录到表12,表12天数0d5d10d15d20d25d30d35d40d45d50dph4.04.44.85.45.86.57.17.17.17.17.1实施例13与实施1同一片酸性土壤地的另一部分,在广西宾阳某地呈酸性的土壤地,取样测试土壤的初始ph值为4.0(测试方法为ny/t1377-2007土壤的ph测定),将培养好的库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌与无菌蒸馏水混合后,菌液中库德里阿兹威氏毕赤酵母(pichiakudriavzevii)菌浓度为1.5×106cfu/ml,直接喷洒在酸性土壤上2500l/亩菌液,环境温度为20-35℃(夏天),30天后土壤的ph达到了7.1,再放置20天,土壤的ph保持7.1,在此过程中每5天搅拌土壤1次,每5天采用ph计测试土壤ph值,将测试得到的数据记录到表13,表13天数0d5d10d15d20d25d30d35d40d45d50dph4.04.54.85.55.96.67.17.17.17.17.1结论:由实施例看出本发明可以有效的提高酸性土壤的ph值至中性,有效治理土壤酸化,治理成本低廉,速度快,具有显著的经济效益。尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。当前第1页12
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