本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及一种蒿甲醚溶解液的制备方法及其应用。
背景技术：
蒿甲醚粉剂不能直接溶解于细胞培养基中。蒿甲醚针剂在市场很难购买的。因此，在细胞实验时，将蒿甲醚粉剂溶解于细胞培养基就成为一个难题。因此，寻找蒿甲醚好的溶剂和配制方法成为实验目标。尽管文献显示蒿甲醚有很多溶剂，但是溶剂步骤多、时间久，大约需要72小时，或者需要仪器协助才能有效溶解。因此，我们亟需找到一种成本低，且能够快速高效溶解蒿甲醚的方法。
技术实现要素：
为解决上述技术问题，本发明的首要目的在于提供一种蒿甲醚溶解液的制备方法，该制备方法得到的蒿甲醚溶解液安全无毒，蒿甲醚溶解速度快（溶解时间为2-10分钟），且蒿甲醚溶解度高（蒿甲醚溶解液a的溶解度≥533.3mg/ml，蒿甲醚溶解液b的溶解度≥333.3mg/ml）。
本发明的另一目的是提供上述蒿甲醚溶解液的制备方法制备得到的蒿甲醚溶解液的应用。
本发明采用的技术方案如下：
本发明所述的蒿甲醚溶解液的制备方法，包含如下步骤：
a）将无水乙醇与橄榄油按照比例进行混合，静置≥5分钟，上方为无水乙醇层，下方为橄榄油层；
b）取无水乙醇层液体，加入称量好的蒿甲醚粉中，溶解蒿甲醚，溶解时间为2-10分钟，成为蒿甲醚溶解液a；
c）取橄榄油层液体，加入称量好的蒿甲醚粉中，溶解蒿甲醚，溶解时间为2-10分钟，成为蒿甲醚溶解液b。
其中，所述步骤a）中无水乙醇与橄榄油的混合比为16:1-1:6。
其中，所述步骤b）中蒿甲醚粉与无水乙醇层液体的质量体积比为1mg/ml-560mg/ml。
其中，所述步骤b）中蒿甲醚溶解液a的溶解度≥533.3mg/ml。
其中，所述步骤c）中蒿甲醚粉与橄榄油层液体的质量体积比为1mg/ml-360mg/ml。
其中，所述步骤c）中蒿甲醚溶解液b的溶解度≥333.3mg/ml。
本发明还公开了上述蒿甲醚溶解液的制备方法制备得到的蒿甲醚溶解液在蒿甲醚的各种实验和临床应用、蒿甲醚针剂配制中的应用。
本发明与现有技术相比，具有如下有益效果：
1）本发明制备得到的蒿甲醚溶解液，安全无毒，蒿甲醚溶解速度快（溶解时间为2-10分钟），且蒿甲醚溶解度高（蒿甲醚溶解液a的溶解度≥533.3mg/ml，蒿甲醚溶解液b的溶解度≥333.3mg/ml）。
2）本发明的制备方法，工艺简单易操作，生产成本低，适于工业化规模生产。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明，但本发明的实施方式并不受下述实施例的限制。
本发明实施例和对比例所用的原料均来源于市购。
各性能指标的测试方法：
蒿甲醚的溶解度的测试方法：采用三种方法：逐渐加入观察法、称重法、hplc法（高效液相色谱法）。
1、逐渐加入观察法
称取不同质量的蒿甲醚分别加入有1ml溶剂的1.5ml离心管中，观察最高溶解情况，期间首先肉眼观察是否有析出，之后采用光学显微镜在显微镜下观察是否有晶体析出，之后算出溶解度。
2、称重法
（1）取一个1.5ml离心管a，称量，质量为a。加1ml溶剂入a离心管，称量，质量为b。计算1ml溶剂质量=b-a.
（2）称取大质量的蒿甲醚加入含有溶剂的离心管中，溶解，离心，收集上清到新的离心管中。
（3）取一个1.5ml离心管d，称量，质量为d。取1ml溶液加入d离心管中，称量，质量为e。计算溶液中蒿甲醚质量f为=e-d-（b-a）.
（4）蒿甲醚溶解度=f/ml=（e-d-b+a）/ml
3、hplc法（高效液相色谱法）在研究中，我们没有采取此方法。根据原理，此方法得出蒿甲醚溶解度将高于前面两种方法。
实施例1：
一种蒿甲醚溶解液的制备方法，包含如下步骤：
a）将无水乙醇与橄榄油按照无水乙醇与橄榄油的混合比为1:3进行混合，静置15分钟，上方为无水乙醇层，下方为橄榄油层；
b）取无水乙醇层液体，按照蒿甲醚粉与无水乙醇层液体的质量体积比为533.3mg/l，加入称量好的蒿甲醚粉中，溶解蒿甲醚，溶解时间为3分钟，成为蒿甲醚溶解液a，蒿甲醚溶解液a的溶解度为533.3mg/ml；
c）取橄榄油层液体，按照蒿甲醚粉与橄榄油层液体的质量体积比为333.3mg/l，加入称量好的蒿甲醚粉中，溶解蒿甲醚，溶解时间为3分钟，成为蒿甲醚溶解液b，蒿甲醚溶解液b的溶解度为333.3mg/ml。
实施例2：
一种蒿甲醚溶解液的制备方法，包含如下步骤：
a）将无水乙醇与橄榄油按照无水乙醇与橄榄油的混合比为1:1进行混合，静置15分钟，上方为无水乙醇层，下方为橄榄油层；
b）取无水乙醇层液体，按照蒿甲醚粉与无水乙醇层液体的质量体积比为539mg/l，加入称量好的蒿甲醚粉中，溶解蒿甲醚，溶解时间为3分钟，成为蒿甲醚溶解液a，蒿甲醚溶解液a的溶解度为539mg/ml；
c）取橄榄油层液体，按照蒿甲醚粉与橄榄油层液体的质量体积比为338mg/l，加入称量好的蒿甲醚粉中，溶解蒿甲醚，溶解时间为3分钟，成为蒿甲醚溶解液b，蒿甲醚溶解液b的溶解度为338mg/ml。
实施例3：
一种蒿甲醚溶解液的制备方法，包含如下步骤：
a）将无水乙醇与橄榄油按照无水乙醇与橄榄油的混合比为1:6进行混合，静置1小时，上方为无水乙醇层，下方为橄榄油层；
b）取无水乙醇层液体，按照蒿甲醚粉与无水乙醇层液体的质量体积比为536mg/l，加入称量好的蒿甲醚粉中，溶解蒿甲醚，溶解时间为5分钟，成为蒿甲醚溶解液a，蒿甲醚溶解液a的溶解度为536mg/ml；
c）取橄榄油层液体，按照蒿甲醚粉与橄榄油层液体的质量体积比为337mg/l，加入称量好的蒿甲醚粉中，溶解蒿甲醚，溶解时间为5分钟，成为蒿甲醚溶解液b，蒿甲醚溶解液b的溶解度为337mg/ml。
对比例1：
将蒿甲醚粉与橄榄油按照质量体积比为100mg/ml进行混合，溶解蒿甲醚，室温溶解时间为12小时，大部分蒿甲醚粉无法溶入橄榄油，制成蒿甲醚溶解液，蒿甲醚溶解液的溶解度为10mg/ml。
对比例2：
将蒿甲醚粉与无水乙醇按照质量体积比为200mg/ml进行混合，溶解蒿甲醚，溶解时间为30分钟，成为蒿甲醚溶解液，蒿甲醚溶解液的溶解度为200mg/ml。
对比例3：
将蒿甲醚加入溶剂中，涡旋0.5h混匀，37℃水浴中振荡72h达平衡，离心，取上清获得溶液。相同溶剂下，橄榄油中蒿甲醚的溶解度是250mg/ml，乙醇中蒿甲醚的溶解度是177mg/ml。参考文献：[1]王晓蕾,孙艺丹,王锐利,白小红,张淑秋.蒿甲醚在不同介质中的平衡溶解度及表观油水分配系数的测定[j].药物评价研究,2013,36(02):114-118。