程如附图18所示。
[0025]所述附图12中塑封膜带有进样孔，其直径为10.0 mm，其位置与纸芯片进样区头部相对应。
[0026]所述附图16中每个酶识别催化微通道中的氧化酶打印图案的尺寸为2.0-4.0 mmX1.0-3.0 mm的长方形。
[0027]所述附图16中每个酶识别催化微通道中的氧化酶打印图案距离化学发光检测区的距离为1.0-5.0 _。
[0028]所采用的滤纸为常用的滤纸。
[0029]所采用的喷蜡打印机为常用的富士施乐喷蜡打印机。
[0030]所采用的激光切割机为常用的Epilog_Zing_16激光切割机。
[0031]步骤(8)中所述的化学发光试剂墨为化学发光试剂修饰的贵金属纳米粒子溶液。所采用的化学发光试剂为常用的化学发光试剂，可为鲁米诺。所采用的贵金属纳米粒子为常见的贵金属纳米粒子，可为金纳米粒子。
[0032]步骤(8)中所述的氧化酶打印墨为氧化酶修饰的贵金属纳米粒子溶液，所采用的氧化酶分别为葡萄糖氧化酶、果糖氧化酶、半乳糖氧化酶、乳糖氧化酶、乳酸氧化酶、单酚氧化酶、多酚氧化酶、黄嘌呤氧化酶、胆固醇氧化酶、血红素氧化酶、抗坏血酸氧化酶、细胞色素氧化酶、D-氨基酸氧化酶、L-氨基酸氧化酶、单胺氧化酶、二胺氧化酶、NADH氧化酶、NADPH氧化酶、赖氨酰氧化酶、丙酮酸氧化酶、乙醇氧化酶、乙醛氧化酶、胆碱氧化酶、谷胱甘肽氧化酶、肌酐氧化酶、3-α-类固醇氧化酶、胆红素氧化酶、白蛋白氧化酶、球蛋白氧化酶、丙胺酸氧化酶、脂肪酸氧化酶和尿酸氧化酶。所采用的贵金属纳米粒子为常见的贵金属纳米粒子，可为金纳米粒子。
[0033]利用上述制备的微流控化学发光纸芯片实现多组分的现场即时检测的步骤为:
(I)将微流控化学发光纸芯片放入掌上发光检测仪的暗盒中。
[0034](2)将样品溶液滴加到微流控化学发光纸芯片的进样区内。然后盖上暗盒盖，开始检测。通过依次出现的32个化学发光峰值的大小来依次判断葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、乳酸、单酚、多酚、黄嘌呤、胆固醇、血红素、抗坏血酸、细胞色素、D-氨基酸、L-氨基酸、单胺、二胺、NADH、NADPH、赖氨酰、丙酮酸、乙醇、乙醛、胆碱、谷胱甘肽、肌酐、3-α -类固醇、胆红素、白蛋白、球蛋白、丙胺酸、脂肪酸和尿酸是否存在及含量。
[0035]本发明中，样品溶液会在中空通道和纸的毛细作用力的驱动下，流经三十二个酶识别催化微通道。被测物经氧化酶的特异性识别催化后，产生的过氧化氢流入化学发光检测区并与化学发光试剂发生化学反应，产生光信号。由于样品溶液到达酶识别催化微通道的时间不同，导致所产生的过氧化氢到达化学发光检测区的时间亦不同，该设计可将不同被测物产生的发光信号从时间上区分开，进一步实现了一个发光检测窗口下的多组分同时检测。
[0036]本发明的有益效果:
1.在微流控纸芯片实验室中引入了高灵敏度的化学发光检测方法，拓展了微流控纸芯片实验室的检测范围，提高了微流控纸芯片实验室的检测灵敏度与准确度。
[0037]2.采用全打印的制备模式，简化了微流控化学发光纸芯片制备步骤，降低了制备成本，提高了微流控化学发光纸芯片的检测可重复性。
[0038]3.所采用的打印图案可进行大规模集成打印，实现每个页面上打印多个图案用于同时制备多个微流控化学发光纸芯片。
[0039]4.打印墨中含有贵金属纳米粒子，借助贵金属纳米粒子的催化作用，可提高酶识别催化能力与化学发光效率，进一步提高该微流控化学发光纸芯片的灵敏度。
[0040]5.构建了高通量的微流控化学发光纸芯片，提高了微流控化学发光纸芯片的检测通量与检测能力。
[0041]6.在微流控纸芯片实验室中引入了中空通道技术，极大地提高了溶液在纸通道内的流速，大大降低了检测时间，明显提高了检测效率。而且通过控制流速调节镜像疏水蜡颜色的深浅，可以控制溶液在纸通道内的流速，便于对多组分高通量化学发光检测过程进行控制。
[0042]7.由于滤纸的多孔性质，因此酶识别催化微通道还具有纸层析分离的功能，将大颗粒杂质直接过滤掉。联合氧化酶分子的特异性识别催化能力，该微流控化学发光纸芯片可实现无前处理的直接样品加入检测，简化了检测步骤，节省了样品前处理成本。
[0043]8.对微流控化学发光纸芯片进行塑封后的，可防止在运输、储存及使用过程中对微流控化学发光纸芯片造成污染，且该设计与中空通道结合后，将进一步提高溶液在纸通道内的流速，从而进一步降低检测时间，提高检测效率。此外，该设计使得微流控纸芯片实验室更加便于携带与使用。
【附图说明】
[0044]图1为微流控化学发光纸芯片的疏水蜡批量打印图案。
[0045]图2为微流控化学发光纸芯片的化学发光试剂批量打印图案。
[0046]图3A为微流控化学发光纸芯片的葡萄糖氧化酶批量打印图案。
[0047]图3B为微流控化学发光纸芯片的果糖氧化酶批量打印图案。
[0048]图3C为微流控化学发光纸芯片的半乳糖氧化酶批量打印图案。
[0049]图3D为微流控化学发光纸芯片的乳糖氧化酶批量打印图案。
[0050]图3E为微流控化学发光纸芯片的乳酸氧化酶批量打印图案。
[0051]图3F为微流控化学发光纸芯片的单酚氧化酶批量打印图案。
[0052]图3G为微流控化学发光纸芯片的多酚氧化酶批量打印图案。
[0053]图3H为微流控化学发光纸芯片的黄嘌呤氧化酶批量打印图案。
[0054]图4A为微流控化学发光纸芯片的胆固醇氧化酶批量打印图案。
[0055]图4B为微流控化学发光纸芯片的血红素氧化酶批量打印图案。
[0056]图4C为微流控化学发光纸芯片的抗坏血酸氧化酶批量打印图案。
[0057]图4D为微流控化学发光纸芯片的细胞色素氧化酶批量打印图案。
[0058]图4E为微流控化学发光纸芯片的D-氨基酸氧化酶批量打印图案。
[0059]图4F为微流控化学发光纸芯片的L-氨基酸氧化酶批量打印图案。
[0060]图4G为微流控化学发光纸芯片的单胺氧化酶批量打印图案。
[0061]图4H为微流控化学发光纸芯片的二胺氧化酶批量打印图案。
[0062]图5A为微流控化学发光纸芯片的NADH氧化酶批量打印图案。
[0063]图5B为微流控化学发光纸芯片的NADPH氧化酶批量打印图案。
[0064]图5C为微流控化学发光纸芯片的赖氨酰氧化酶批量打印图案。
[0065]图为微流控化学发光纸芯片的丙酮酸氧化酶批量打印图案。
[0066]图5E为微流控化学发光纸芯片的乙醇氧化酶批量打印图案。
[0067]图5F为微流控化学发光纸芯片的乙醛氧化酶批量打印图案。
[0068]图5G为微流控化学发光纸芯片的胆碱氧化酶批量打印图案。
[0069]图5H为微流控化学发光纸芯片的谷胱甘肽氧化酶批量打印图案。
[0070]图6A为微流控化学发光纸芯片的肌酐氧化酶批量打印图案。
[0071]图6B为微流控化学发光纸芯片的3-α -类固醇氧化酶批量打印图案。
[0072]图6C为微流控化学发光纸芯片的胆红素氧化酶批量打印图案。
[0073]图6D为微流控化学发光纸芯片的白蛋白氧化酶批量打印图案。
[0074]图6Ε为微流控化学发光纸芯片的球蛋白氧化酶批量打印图案。
[0075]图6F为微流控化学发光纸芯片的丙胺酸氧化酶批量打印图案。
[0076]图6G为微流控化学发光纸芯片的脂肪酸氧化酶批量打印图案。
[0077]图6H为微流控化学发光纸芯片的尿酸氧化酶批量打印图案。
[0078]图7为微流控化学发光纸芯片的流速调节镜像疏水蜡批量打印图案。
[0079]图8为喷蜡打印构建亲水通道原理示意图，A图是空白滤纸的示意图图是在滤纸上打印蜡图案的示意图，其中a是打印的蜡层；C图是在烘箱或平板加热设备中加热后，蜡图案融化并浸透整个滤纸的厚度，形成疏水墙。
[0080]图9为微流控化学发光纸芯片A的示意图，其中a是印有化学发光试剂墨的化学发光检测区，b是酶识别催化微通道中打印的氧化酶墨，c是进样区。
[0081]图10为流速调节微流控纸芯片的批量打印图案正面效果图。
[0082]图11为微流控化学发光纸芯片B的示意图，其中a是流速调节区域。
[0083]图12为微流控化学发光纸芯片正面塑封膜图案。
[0084]图13为微流控化学发光纸芯片的塑封封装示意图，A图是俯视图；B图是剖视图。其中a、d分别是正反面