一种快速检测汞离子的试纸及其制备方法与流程

文档序号:12784834阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种快速检测汞离子的试纸,其特征在于,它包括底板,在底板上设置有以固态吸附形式结合有胶体金/DNA体系的玻璃纤维膜,玻璃纤维膜上设置有以NaCl线状固化的检测线和以minobenzyl-EDTA-Hg2++NaCl线状固化的控制线。

2.如权利要求1所述的快速检测汞离子的试纸,其特征在于,所述控制线通过先将Hg2+与赘合剂aminobenzyl-EDTA鳌合,形成aminobenzyl-EDTA-Hg2+,再以minobenzyl-EDTA-Hg2++NaCl线状固化在玻璃纤维膜上。

3.如权利要求1所述的快速检测汞离子的试纸,其特征在于,当待测样品加到试纸上后,通过毛细管扩散作用向前泳动并使玻璃纤维膜上的胶体金/DNA体系溶解,继续向前泳动,至检测线处,样品中的Hg2+达一定浓度时,与胶体金/DNA体系中的核酸碱基胸腺嘧啶T能选择性地结合,形成T-Hg2+-T 复合物,在检测线上遇盐破坏变成肉眼可见的蓝色,为阳性结果;显示为肉眼可见的红色,为阴性结果。

4.一种快速检测汞离子的试纸的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)胶体金的制备:

将1mL 1%的四氯金酸溶液加入100 mL纯净水,加热至沸腾,在剧烈搅拌下快速加入0.75-3mL 1%的柠檬酸钠溶液,沸腾状态下搅拌15-30min,撤离热源后再搅拌5-15min,制备得到胶体金溶液;

(2)胶体金/DNA体系的制备:

取450-500μL上述合成的胶体金与50μL 5μmol/L DNA搅拌均匀后,室温孵育12h,离心5min,弃上清,反复重复2次;加200μL 纯净水使沉淀溶解,得均匀溶液,加入400μL 5mmol/L pH7.5 Tris/HCl的缓冲液震荡摇匀得胶体金/DNA体系;

(4)胶体金/DNA 体系的纯化:

用差速离心法纯化己制备的胶体金/DNA体系,将溶液以4℃,4000-6000r/min离心20-30min,弃去沉淀;再以12000-14000r/min离心离心40-60min,弃上清;用TBA溶解沉淀,使最终体积为原胶体金体积的10%,再重复离心2次;用TBA溶液将沉淀恢复至原体积,置4℃保存;

(5)试纸的制备:

先将Hg2+与赘合剂aminobenzyl-EDTA鳌合,形成aminobenzyl-EDTA-Hg2+,将NaCl线状固化在玻璃纤维膜上作为检测线,以minobenzyl-EDTA-Hg2++NaCl以线状固化在NC膜上,作为控制线,胶体金/DNA 体系以固态吸附形式结合在玻璃纤维膜上,制备得到试纸。

5.如权利要求4所述的快速检测汞离子的试纸的制备方法,其特征在于,所述四氯金酸溶液和柠檬酸钠均用0.22μm孔径滤膜过滤。

6.如权利要求4所述的快速检测汞离子的试纸的制备方法,其特征在于,所述胶体金溶液置于棕色瓶中于4℃低温保存,3个月内使用,平均粒径为13nm。

7.如权利要求4所述的快速检测汞离子的试纸的制备方法,其特征在于,所述室温为15℃-25℃。

8.如权利要求4所述的快速检测汞离子的试纸的制备方法,其特征在于,所述离心半径为3cm,离心速度为14000r/min。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1