一种基于OMP18检测空肠弯曲菌的ELISA检测试剂盒及其应用的制作方法

文档序号:11861100阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种基于OMP18的B细胞抗原表位多肽检测空肠弯曲菌的酶联免疫试剂盒,其特征在于,包括以下组分:

(1)包被有OMP18的B细胞抗原表位多肽的检测板,所述检测板真空密封包装;

(2)洗涤液;

(3)二抗酶标记的兔抗IgG溶液;

(4)终止液;

(5)样品稀释液;

(6)底物显色液。

2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述终止液为1~2mol/L的硫酸溶液或2~3mol/L的氢氧化钠溶液。

3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述样品稀释液为pH值7.4~8.0、摩尔浓度0.1~0.25mol/L、含有体积浓度45~50%甲醇的磷酸盐缓冲液。

4.根据权利要求1所述试剂盒,其特征在于,所述OMP18的B细胞抗原表位多肽抗原的包被浓度为4~9μg/ml。

5.根据权利要求1所述试剂盒,其特征在于,所述酶标记的兔抗IgG溶液中所使用的酶为HRP,所述底物显色液为TMB。

6.根据权利要求1所述试剂盒,其特征在于,所述洗涤液为包含质量浓度0.05~0.1%Tween 20的PBS溶液。

7.根据权利要求1~4任意一项所述的试剂盒,其特征在于,所述OMP18的B细胞抗原表位多肽的A抗原表位氨基酸序列为STKSTSVSGDSSVDSNRGSGGSDGWDID。

8.根据权利要求1~4任意一项所述的试剂盒,其特征在于,所述OMP18的B细胞抗原表位多肽的B抗原表位肽序列为EGNCDEWGTDEY。

9.根据权利要求1~5任意一项所述的试剂盒,其特征在于,所述空肠弯曲菌OMP18的B细胞抗原表位多肽的C抗原表位肽序列为SYGETNPVCTEKTKACDAQNRR。

10.权利要求1~9任意一项所述的试剂盒在检测空肠弯曲菌中的应用,其特征在于,包括以下步骤:

a、将待测样品进行前处理;

b、将所述步骤a处理后的待测样品加入已经包被有OMP18的B细胞抗原表位多肽的检测板孔内,混合,孵育,用洗涤液洗涤;

c、所述检测板孔加入二抗溶液,混合,孵育,用洗涤液洗涤;

d、加入底物显色液,孵育,加入终止液混匀,测定OD值。

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