本发明属于食品检测领域，是一种同时测定食用植物油中三种毒性醛类的双波长检测方法。技术背景食用植物油具有重要的营养价值，不仅为人体提供热量，还可以提供不饱和脂肪酸，如油酸、亚油酸(ω-6)、亚麻酸(ω-3)，同时也可提供脂溶性维生素、多酚类等物质。食用油的安全与人们的健康息息相关，关乎经济发展和社会稳定，受到大众和媒体的高度关注。食用油脂的氧化稳定性直接关系到食用油的保质期和销售储存。油脂在生产、储藏和加工过程中受空气、温度等的影响，发生氧化，氧化过程主要分为三个阶段：首先是链引发阶段，受空气、金属离子等的作用，产生烷基自由基(R·)；其次是链传递阶段，烷基自由基(R·)在氧气作用下形成过氧化物自由基(ROO·)及氢过氧化物(ROOH)，同时又形成新的烷基自由基(R·)，产生的氢过氧化物可以继续分解成醛、酮、酸、烃等小分子物质；最后阶段是链终止阶段，烷基自由基(R·)、过氧化物自由基(ROO·)发生聚合，形成二聚物以及多聚物。氧化的油脂色泽加深，并且伴有异味，品质大大降低，同时氧化生成了一些对人体健康有潜在危害的物质，醛类物质就是其中的一类物质。油脂氧化产生的醛类物质有很多种，其中一些与油脂及油炸食品的风味息息相关(查祁珍.油脂的风味及其评价[J].中国油脂，1998，23(1):52-54)，还有一些醛(羟基醛和氢过氧基烯醛等)具有较高的反应活性，摄入体内后能与组织蛋白和核酸等结合，导致诸多疾病的发生(ChoSY,MiyashitaK,MiyazawaT,etal.Autoxidationofethyleicosapentaenoateanddocosahexaenoate[J].JournaloftheAmericanOilChemistsSociety,1987,64(6):876-879.SchaurRJ,ZollnerH,EsterbauerH.Biologicaleffectsofaldehydeswithparticularattentionto4-hydroxynonenalandmalonaldehyde[J].Membranelipidoxidation,1991,3:141-163.Morales-BarreraJE,Gonzalez-AlcortaMJ,Castillo-DominguezRM,etal.Fattyaciddepositiononbroilermeatinchickenssupplementedwithtunaoil[J].FoodandNutritionSciences,2013,4(09):16.VandemoorteleA,DeMeulenaerB.Behaviorofmalondialdehydeinoil-in-wateremulsions[J].Journalofagriculturalandfoodchemistry,2015,63(23):5694-5701.)。通过对大量的食物油、油基食品的调查发现，MDA、4-HNE、4-HHE三种醛类广泛分布在多种样品中，含量较多且不挥发(SeppanenCM,CsallanyAS.Simultaneousdeterminationoflipophilicaldehydesbyhigh-performanceliquidchromatographyinvegetableoil[J].JournaloftheAmericanOilChemists'Society,2001,78(12):1253-1260.PapastergiadisA,FatouhA,JacxsensL,etal.ExposureassessmentofMalondialdehyde,4-Hydroxy-2-(E)-Nonenaland4-Hydroxy-2-(E)-HexenalthroughspecificfoodsavailableinBelgium[J].FoodandChemicalToxicology,2014,73:51-58.)，已有大量的研究发现，丙二醛(MDA)、4-羟基己烯醛(4-HHE)和4-羟基壬烯醛(4-HNE)中所含有的活性醛基在生物体系中可以和蛋白质、DNA等发生交联，破坏其正常的结构，导致生理功能降低乃至丧失，有一定的致病、致癌及生殖遗传毒性(GuillénGoicoecheaE.Toxicoxygenatedα,β-unsaturatedaldehydesandtheirstudyinfoods:areview[J].Criticalreviewsinfoodscienceandnutrition,2008,48(2):119-136.GoicoecheaE,GuillenMD.Analysisofhydroperoxides,aldehydesandepoxidesby1Hnuclearmagneticresonanceinsunfloweroiloxidizedat70and100℃[J].Journalofagriculturalandfoodchemistry,2010,58(10):6234-6245.；B,GoicoecheaE,ManzanosMJ,etal.Amethodbasedon1HNMRspectraldatausefultoevaluatethehydrolysislevelincomplexlipidmixtures[J].FoodResearchInternational,2014,66:379-387.LorenteL,RodriguezST,SanzP,etal.AssociationbetweenPre-TransplantSerumMalondialdehydeLevelsandSurvivalOneYearafterLiverTransplantationforHepatocellularCarcinoma[J].Internationaljournalofmolecularsciences,2016,17(4):500.)。针对MDA、4-HHE和4-HNE的研究多是单独进行的，自2008年，在婴幼儿奶粉中检测到较高含量的MDA、4-HNE、4-HHE后，近两年对这三种醛类物质的研究逐步引起人们的重视。MDA来源于含有两个双键以上不饱和脂肪酸的氧化，4-HNE和4-HHE分别由ω-6系脂肪酸和ω-3系脂肪酸的氧化产生，随着人们生活水平的提高，对于健康饮食的呼声也越来越高，富含亚油酸、亚麻酸的植物油消费量逐年上升，而多不饱和脂肪酸的加工和消费的增加，将显著增加人体接触和摄入这三种有毒醛类的几率，给人们的健康带来了一定的风险。目前，针对醛类物质的测定，主要是与衍生剂衍生化反应后，通过HPLC-UV、GC-MC、LC-MS(/MS)等手段单独检测。对于多种醛类物质的研究有报道针对水中(极性环境)12种极性醛类(甲醛、乙醛、丙醛、丁烯醛、丁醛、戊二醛、戊醛、己醛、庚醛、辛醛、壬醛、癸醛)的研究，二极管阵列检测器(PDA)360nm单波长检测(丁昌明,林少彬.水中12种醛类化合物的高效液相色谱测定法[J].环境与健康杂志,2009,26(4):351-353.)。但该研究的色谱条件对于食用植物油体系(非极性环境)并没有指导性及适用性，其洗脱模式并不能同时将弱极性醛类MDA、4-HHE和4-HNE分离，此外单一波长也不能实现对MDA、4-HHE和4-HNE的同时检测。针对MDA、4-HHE和4-HNE三种醛同时测定的方法目前仅有一篇报道，采用的是与2,4-二硝基苯肼衍生化后，LC-MS/MS测定(DounyC,TihonA,BayonnetP,etal.ValidationoftheanalyticalprocedureforthedeterminationofmalondialdehydeandthreeotheraldehydesinvegetableoilusingLiquidChromatographycoupledtotandemmassspectrometry(LC-MS/MS)andapplicationtolinseedoil[J].FoodAnalyticalMethods,2015,8(6):1425-1435.)。然而该方法操作较繁琐，成本较高，亟需一种快速、高效、低廉同时测定三种毒性醛类的方法，为研究食用植物油中三种毒性醛类物质的产生机制及影响因素奠定一定的基础。技术实现要素：本发明针对目前富含多不饱和脂肪酸植物油的大量消费，增加了人体接触和摄入有毒物质MDA、4-HNE、4-HHE的风险的现象，提出一种快速、低廉、高效、准确地同时测定MDA、4-HNE、4-HHE的检测方法。为实现上述目的，本发明采用如下的技术方案。一种同时测定食用植物油中三种毒性醛类的双波长检测方法，为一次进样，双波长同时检测食用植物油中三种毒性醛类丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛。进一步地，所述双波长分别是波长为310nm和378nm。进一步地，所述丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的检测限分别为0.012μg/g、0.020μg/g和0.014μg/g。进一步地，所述丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为98.13-102.94％、97.73-101.73％和97.66-102.83％。进一步地，所述丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的线型范围分别为0.02-10.0μg/g、0.02-4.00μg/g和0.03-4.00μg/g。进一步地，包括如下检测步骤：(1)衍生剂的配制：配制0.05mol/L2,4-二硝基苯肼的酸性乙醇溶液，内含为10-15v/v％的浓盐酸；(2)标准溶液的配制：准确称取1,1,3,3-四乙氧基丙烷，定容后稀释为10μg/mLMDA标准品溶液，再依次配制MDA标准溶液浓度为0.02、0.05、0.1、0.5、1、2、5、10μg/mL；分别取4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的标准品溶液，依次配制4-HNE标准溶液浓度为0.02、0.05、0.1、0.5、1、2、3、4μg/mL，4-HHE标准溶液浓度为0.03、0.05、0.1、0.5、1、2、3、4μg/mL，备用；(3)样品衍生溶液的制备：取油样，加入30v/v％-70v/v％乙醇的水溶液，得到浓度为0.1～1.0g/mL的样品溶液，涡旋震荡3-10min，3000-5000×g离心5-10min后收集下层清液，再对油层重复上述步骤各一次，合并两次收集的下层清液；加入体积比为0.1～1.0配制的衍生剂，涡旋1-5min充分混匀，40-80℃避光水浴加热1.5-3.5h，冰浴快速冷却，加入二氯甲烷溶液溶解，涡旋震荡1-5min，3000-5000×g离心5-10min，收集下层溶液，氮吹浓缩，最后加入甲醇或乙腈或初始流动相复溶，得到样品衍生溶液；丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的标准溶液以及样品同步衍生化，过0.45μm或0.22μm滤膜，上机进样分析；(4)色谱条件色谱柱：C18色谱柱(4.6×250mm，内径5μm)；检测器：二极管阵列检测器(PDA)；检测波长：双通道检测，通道一：310nm，通道二：378nm；流动相：乙腈和水梯度洗脱(v/v)，洗脱条件为：0-18min，乙腈：水＝45:55；18-23min，乙腈：水＝(45→70)：(55→30)；23-30min，乙腈：水＝70:30；流速：0.6-1.2mL/min；柱温：25-35℃；进样量：10-40μL；(5)将样品溶液的保留时间与标准溶液的保留时间进行对比，获得峰面积代入标准曲线，实现对丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的定量。与现有技术相比，本发明具有以下优点和技术效果：(1)本发明检测方法的检出限和线性范围均要比现有同时测定三种醛类物质的方法要好，具有更广的使用范围和更大的实际意义；(2)本发明检测方法采用高效液相色谱二极管阵列检测器，且通过多通道多波长实现对三种醛类物质的同时检测，简化操作过程，降低成本，符合定性、定量的要求，更适合高校研究人员、工业化应用；(3)本发明方法使用乙腈和水作为流动相进行梯度洗脱，实现了同时对三种待测组分的分离测定，绿色经济，具有环境友好性；(4)本发明方法还可用于食用植物油热加工及储藏过程中三种醛类物质含量的检测，对于后续研究三种醛类物质的生成机制以及影响因素，为植物油的健康食用、煎炸食品的安全生产、煎炸油的重复利用乃至油脂行业的健康发展提供理论依据；(5)本发明检测方法的精密度和重复稳定性高。附图说明图1为丙二醛标准曲线图；图2为4-羟基壬烯醛标准曲线图；图3为4-羟基己烯醛标准曲线图；图4为4-羟基己烯醛标准溶液和4-羟基壬烯醛标准溶液的液相色谱图；图5为丙二醛标准溶液的液相色谱图；图6为实施例3中的亚麻油中4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的液相色谱图；图7为实施例3中的亚麻油中丙二醛的液相色谱图。具体实施方式本发明将结合以下实施例作进一步详述，但本发明不限于以下实施例。本发明实施例检测方法的步骤及相关试剂、溶液的配制如下：(1)衍生剂的配制：配制0.05mol/L2,4-二硝基苯肼的酸性乙醇溶液，内含10-15v/v％的浓盐酸；(2)标准溶液的配制：准确称取0.315g1,1,3,3-四乙氧基丙烷，用50％乙醇的水溶液(v/v)定容至1000mL，精确移取上述溶液10mL进一步稀释至100mL，即为10μg/mLMDA标准品溶液，依次配制MDA标准溶液浓度为0.02、0.05、0.1、0.5、1、2、5、10μg/mL；分别取4-HNE、4-HHE的标准品溶液(美国Cayman公司)，用30％-70％乙醇的水溶液(v/v)稀释到10μg/mL，依次配制4-HNE标准溶液浓度为0.02、0.05、0.1、0.5、1、2、3、4μg/mL，4-HHE标准溶液浓度为0.03、0.05、0.1、0.5、1、2、3、4μg/mL，待用；(3)样品衍生溶液的制备：取1.0-3.0g油样，加入3-10mL30％-70％乙醇的水溶液(v/v)，涡旋震荡3-10min，3000-5000×g离心5-10min后收集下层清液，再对油层重复上述步骤各一次，合并两次收集的下层清液；加入300-1000μL配制的衍生剂，涡旋1-5min充分混匀，40-80℃避光水浴加热1.5-3.5h，冰浴快速冷却，加入3-10mL二氯甲烷溶液溶解，涡旋震荡1-5min，3000-5000×g离心5-10min，收集下层溶液，氮吹浓缩，最后加入3-10mL的甲醇(或乙腈或初始流动相)复溶，得到样品衍生溶液；丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的标准溶液以及样品同步衍生化，过0.45或0.22μm滤膜，上机进样分析；(4)色谱条件色谱柱：C18色谱柱(4.6×250mm，内径5μm)；检测器：二极管阵列检测器(PDA)；检测波长：双通道检测，通道一：310nm，通道二：378nm；流动相：乙腈和水梯度洗脱(v/v)，洗脱条件为：0-18min，乙腈：水＝45:55；18-23min，乙腈：水＝(45→70)：(55→30)；23-30min，乙腈：水＝70:30；流速：0.6-1.2mL/min；柱温：25-35℃；进样量：10-40μL；(5)将样品溶液的保留时间与标准溶液的保留时间进行对比，获得峰面积代入标准曲线，实现对丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的定量。得到丙二醛标准曲线如图1所示，为：y＝0.5265x-0.0391，R2＝0.9987；4-羟基己烯醛标准曲线如图2所示，为：y＝0.3269x+0.013，R2＝0.9976；4-羟基壬烯醛标准曲线如图3所示，为：y＝0.0926x+0.0038，R2＝0.9986；4-羟基己烯醛标准溶液和4-羟基-2-壬烯醛标准溶液的液相色谱图如图4所示，丙二醛的液相色谱图如图5所示。(6)精密度、重复性和稳定性实验：取丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛浓度分别为1μg/mL、2μg/mL和2μg/mL标准品溶液，分别连续进样6次进行精密度实验，分别平行进样6次进行重复性实验，分别在0h，2h，4h，6h，8h，10h，12h对三种醛类物质的标准品上机测试进行稳定性实验。得到的方法学参数：丙二醛、4-羟基己烯醛、4-羟基壬烯醛的检出限分别为0.012μg/g、0.020μg/g和0.014μg/g，线性范围分别为0.02-10.0μg/g、0.02-4.00μg/g和0.03-4.00μg/g；精密度RSD％(n＝6)分别为2.54、2.27、1.76；重复性RSD％(n＝6)分别为2.01、2.43、1.76；稳定性RSD％(n＝6)分别为1.34、1.79、1.33。方法学评价列表如表1所示。由表1可知，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的检测限分别为0.012μg/g、0.020μg/g和0.014μg/g，线性范围分别为0.02-10.0μg/g，0.02-4.00μg/g和0.03-4.00μg/g，精密度高(RSD％<2.6)、重复性好(RSD％<2.5)、稳定性高(RSD％<1.8)。表1方法学评价结果本发明检测方法与现有文献报道使用LC-MS/MS同时检测方法的比较，结果如表2所示。表2与现有检测方法的参数比较结果由表2可知，检出限和线性范围，均要比现有同时测定三种醛类物质的方法要好，说明本方法具有更广的使用范围和更大的实际意义。实施例1一种同时测定食用植物油中三种毒性醛类的双波长检测方法测定棕榈油中MDA、4-HNE、4-HHE的含量：(1)样品的制备：称取1.0g的25℃避光贮藏20个月的棕榈油于15mL离心管中，加入3mL70％乙醇的水溶液(v/v)提取液，涡旋震荡3min，3000×g离心5min，取下层清液，重复上述步骤各一次，合并两次收集到的清液，待用。(2)衍生化反应：收集的清液中加入300μL的2,4-二硝基苯肼溶液(0.05mol/L，内含10％的浓盐酸(v/v)，涡旋1min充分混匀，40℃避光水浴加热3.5h，冰浴快速冷却，加入3mL二氯甲烷溶液溶解，涡旋震荡1min，3000×g离心5min，收集下层溶液，氮吹浓缩，最后加入3mL的甲醇复溶，得到样品衍生溶液；三种醛的标准溶液和样品同步衍生化，过0.22μm滤膜于液相进样瓶，上机分析。(3)高效液相色谱测定：色谱柱：反相C18柱(AgilentZOTBAXEclipseXDB-C18，250mm×4.6mm，5μm，)；流动相：乙腈和超纯水为流动相A和流动相B，采用梯度洗脱模式，比例为：0-18min，乙腈：水＝45:55；18-23min，乙腈：水＝(45→70):(55→30)；23-30min，乙腈：水＝70:30；流速为1.2mL/min；检测器为二极管阵列检测器，检测波长：双通道检测，通道一：310nm；通道二：378nm；柱温为35℃；进样量为40μL。根据图1、图2、图3的标准曲线，计算检测结果如表3所示：表3棕榈油中MDA、4-HHE、4-HNE的含量加入0.8μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为101.14％、97.73％和100.31％；加入1.0μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为98.42％、101.21％和98.89％；加入1.2μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为101.77％、101.15％和98.18％。实施例2一种同时测定食用植物油中三种毒性醛类的双波长检测方法测定玉米油中MDA、4-HNE、4-HHE的含量：(1)样品的制备：称取1.5g的60℃避光储藏40天的玉米油于15mL离心管中，加入5mL60％乙醇的水溶液(v/v)提取液，涡旋震荡5min，3500×g离心6min，取下层清液，重复上述步骤各一次，合并两次收集到的清液，待用。(2)衍生化反应：收集的清液中加入500μL的2,4-二硝基苯肼溶液(0.05mol/L，内含12％的浓盐酸(v/v)，涡旋2min充分混匀，50℃避光水浴加热3.0h，冰浴快速冷却，加入5mL二氯甲烷溶液溶解，涡旋震荡2min，3500×g离心6min，收集下层溶液，氮吹浓缩，最后加入5mL的乙腈复溶，得到样品衍生溶液；三种醛的标准溶液和样品同步衍生化，过0.45μm滤膜于液相进样瓶，上机分析。(3)高效液相色谱测定：色谱柱：反相C18柱(AgilentZOTBAXEclipseXDB-C18，250mm×4.6mm，5μm，)；流动相：乙腈和超纯水为流动相A和流动相B，采用梯度洗脱模式，比例为：0-18min，乙腈：水＝45:55；18-23min，乙腈：水＝(45→70):(55→30)；23-30min，乙腈：水＝70:30；流速为0.6mL/min；检测器为二极管阵列检测器，检测波长：双通道检测，通道一：310nm；通道二：378nm；柱温为30℃；进样量为30μL。根据图1、图2、图3的标准曲线，计算检测结果如表4所示：表4玉米油中MDA、4-HHE、4-HNE的含量加入0.8μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为98.65％、100.57％和101.77％；加入1.0μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为101.08％、98.49％和102.83％；加入1.2μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为99.79％、98.18％和101.15％。实施例3一种同时测定食用植物油中三种毒性醛类的双波长检测方法测定亚麻油中MDA、4-HNE、4-HHE的含量：(1)样品的制备：称取2.0g的80℃避光储藏10天的亚麻油于15mL离心管中，加入6mL50％乙醇的水溶液(v/v)提取液，涡旋震荡6min，4000×g离心6min，取下层清液，重复上述步骤各一次，合并两次收集到的清液，待用。(2)衍生化反应：收集的清液中加入600μL的2,4-二硝基苯肼溶液(0.05mol/L，内含12％的浓盐酸(v/v)，涡旋3min充分混匀，60℃避光水浴加热2.0h，冰浴快速冷却，加入6mL二氯甲烷溶液溶解，涡旋震荡3min，4000×g离心6min，收集下层溶液，氮吹浓缩，最后加入6mL的乙腈和水(45:55，v/v)混合液复溶，得到样品衍生溶液；三种醛的标准溶液和样品同步衍生化，过0.45μm滤膜于液相进样瓶，上机分析。(3)高效液相色谱测定：色谱柱：反相C18柱(AgilentZOTBAXEclipseXDB-C18，250mm×4.6mm，5μm，)；流动相：乙腈和超纯水为流动相A和流动相B，采用梯度洗脱模式，比例为：0-18min，乙腈：水＝45:55；18-23min，乙腈：水＝(45→70):(55→30)；23-30min，乙腈：水＝70:30；流速为1.0mL/min；检测器为二极管阵列检测器，检测波长：双通道检测，通道一：310nm；通道二：378nm；柱温为25℃；进样量为20μL。根据图1、图2、图3的标准曲线，计算检测结果如表5所示：表5亚麻油中MDA、4-HHE、4-HNE的含量加入0.8μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为99.13％、100.21％和97.77％；加入1.0μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为99.93％、101.73％和101.25％；加入1.2μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为98.13％、101.00％和101.15％。亚麻油样品中，4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的液相色谱图如图6所示，丙二醛的液相色谱图如图7所示，由图6和图7可知，亚麻油中三种醛类物质的色谱图出峰时间和标准图谱时间相吻合，说明本发明方法能准确测定食物油中MDA、4-HHE和4-HNE的含量。实施例4一种同时测定食用植物油中三种毒性醛类的双波长检测方法测定茶籽油中MDA、4-HNE、4-HHE的含量：(1)样品的制备：称取2.5g的185℃加热2h的茶籽油于15mL离心管中，加入8mL40％乙醇的水溶液(v/v)提取液，涡旋震荡8min，4500×g离心8min，取下层清液，重复上述步骤各一次，合并两次收集到的清液，待用。(2)衍生化反应：收集的清液中加入800μL的2,4-二硝基苯肼溶液(0.05mol/L，内含14％的浓盐酸(v/v)，涡旋4min充分混匀，70℃避光水浴加热2.0h，冰浴快速冷却，加入8mL二氯甲烷溶液溶解，涡旋震荡8min，4500×g离心8min，收集下层溶液，氮吹浓缩，最后加入8mL的乙腈复溶，得到样品衍生溶液；三种醛的标准溶液和样品同步衍生化，过0.22μm滤膜于液相进样瓶，上机分析。(3)高效液相色谱测定：色谱柱：反相C18柱(AgilentZOTBAXEclipseXDB-C18，250mm×4.6mm，5μm，)；流动相：乙腈和超纯水为流动相A和流动相B，采用梯度洗脱模式，比例为：0-18min，乙腈：水＝45:55；18-23min，乙腈：水＝(45→70):(55→30)；23-30min，乙腈：水＝70:30；流速为1.0mL/min；检测器为二极管阵列检测器，检测波长：双通道检测，通道一：310nm；通道二：378nm；柱温为30℃；进样量为15μL。根据图1、图2、图3的标准曲线，计算检测结果如表6所示：表6茶籽油中MDA、4-HHE、4-HNE的含量加入0.8μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为102.94％、100.42％和99.53％；加入1.0μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为99.76％、100.69％和101.01％；加入1.2μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为101.38％、100.85％和100.53％。实施例5一种同时测定食用植物油中三种毒性醛类的双波长检测方法测定菜籽油中MDA、4-HNE、4-HHE的含量：(1)样品的制备：称取3.0g的60℃避光储藏50天的茶籽油于15mL离心管中，加入10mL30％乙醇的水溶液(v/v)提取液，涡旋震荡10min，5000×g离心10min，取下层清液，重复上述步骤各一次，合并两次收集到的清液，待用。(2)衍生化反应：收集的清液中加入1000μL的2,4-二硝基苯肼溶液(0.05mol/L，内含15％的浓盐酸(v/v)，涡旋5min充分混匀，80℃避光水浴加热1.5h，冰浴快速冷却，加入10mL二氯甲烷溶液溶解，涡旋震荡5min，5000×g离心10min，收集下层溶液，氮吹浓缩，最后加入10mL的甲醇复溶，得到样品衍生溶液；三种醛的标准溶液和样品同步衍生化，过0.22μm滤膜于液相进样瓶，上机分析。(3)高效液相色谱测定：色谱柱：反相C18柱(AgilentZOTBAXEclipseXDB-C18，250mm×4.6mm，5μm，)；流动相：乙腈和超纯水为流动相A和流动相B，采用梯度洗脱模式，比例为：0-18min，乙腈：水＝45:55；18-23min，乙腈：水＝(45→70):(55→30)；23-30min，乙腈：水＝70:30；流速为1.0mL/min；检测器为二极管阵列检测器，检测波长：双通道检测，通道一：310nm；通道二：378nm；柱温为30℃；进样量为10μL。根据图1、图2、图3的标准曲线，计算检测结果如表7所示：表7菜籽油中MDA、4-HHE、4-HNE的含量加入0.8μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为99.11％、100.30％和99.41％；加入1.0μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为99.79％、98.76％和99.23％；加入1.2μg的标准品，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为102.35％、100.77％和99.59％。综上，本发明实施例检测方法的加标回收率评价如表8所示。表8加标回收率结果由表8可知，丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛在低(0.8μg)、中(1.0μg)、高(1.2μg)三种添加水平下，回收率分别为98.13-102.94％、97.73-101.73％和97.66-102.83％，回收率的RSD％小于1.7。结合实施例，本发明可以用于探究新鲜食用植物油以及食用植物油在储藏和加工中三种毒性醛类的分布规律上述对实施例的描述是为便于该
技术领域：
：的普通技术人员能理解和使用本发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动，如使用高效液相色谱紫外检测器对MDA、4-HNE、4-HHE任一种或者任两种测定。因此，本发明不限于上述实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。当前第1页1 2 3 当前第1页1 2 3