一种氟[18F]化钠注射液放化纯的薄层色谱分析方法与流程

本发明属于薄层色谱分析领域，具体涉及一种氟[¹⁸F]化钠注射液放化纯的薄层色谱分析方法。

背景技术：

氟[¹⁸F]化钠注射液是一种正电子计算机断层显像(Positron Emission Tomography，PET)药物，主要用于活跃的成骨性反应骨疾病的诊断。早在1962年Blau等^]就发现其为一种优良的骨显像剂，1972年美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration，FDA)批准¹⁸F‐氟化钠注射液用于临床，但1975年因商业原因暂停市场供应。近年来，由于PET和PET/CT技术的快速发展、¹⁸F‐氟化钠PET显像的优越性及⁹⁹Mo/⁹⁹Tc^m发生器⁹⁹Mo原料面临的全球性供货短缺，国际上对¹⁸F‐氟化钠用于骨显像的研究和应用重新引起了学者们的重视。

氟[¹⁸F]化钠注射液作为一种静脉注射的正电子药物，其质量控制对药品的安全性和有效性有非常重要的意义。其质量控制方法在美国药典和欧洲药典均有收录。其中放化纯的测量方法主要为离子色谱法和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography，HPLC)。其中美国药典中所使用的方法为离子色谱法，检测器为电导检测器和放射性检测器，流动相为0.003mol/L硫酸，流速为0.8mL/min，色谱柱L17色谱柱；欧洲药典中所使用的方法为高效液相色谱法，检测器为220nm紫外检测器和放射性检测器，流动相为4g/L NaOH溶液，流速为1mL/min，柱温为20～30℃，色谱柱为强碱性阴离子交换树脂柱。离子色谱法和高效液相色谱法虽然是一种更为精确的测量方法，但操作相对复杂，分析时间长。而¹⁸F标记的正电子药物由于核素半衰期短，有效期短，生产结束后需要尽快检测和发货。因此，建立操作方便、分析时间短的方法对氟[¹⁸F]化钠注射液放化纯的测量具有非常重要的意义。

薄层色谱法(Thin Layer Chromatography，TLC)是一种相对快速、方便的放化纯分析方法，常用于一些短半衰期放射性药品的放化纯分析，如[¹⁸F]FDG的放化纯分析就使用薄层色谱法。Nandy等报道了采用薄层色谱法测定氟[¹⁸F]化钠注射液放化纯方法，但该报道采用硅胶板作为固定相，95％的乙腈作为流动相，放射性主峰基本在原点，R_f值为0.0‐0.12，并没有有效展开，存在一些杂质没有分离的可能。

技术实现要素：

针对背景技术中的问题，本发明提供了一种能够方便、快速检测氟[¹⁸F]化钠注射液放化纯的薄层色谱分析方法。本发明采用多种不同的固定相和流动相，并采用不同的电解质溶液对色层纸进行处理后，最终确定了几种合适的条件，能够将放射性主峰展开到R_f值0.7‐0.8，可将[¹⁸F]氟离子和其它放射性杂质有效分离。

为实现上述目的，本发明提出如下技术方案：

一种氟[¹⁸F]化钠注射液放化纯的薄层色谱分析方法，所述方法包括如下步骤：(1)在固定相一端2-3cm处点样；(2)晾干后将固定相放入盛有流动相的层析缸中，使固定相的点样一端浸入展开剂中深约1-2cm；(3)展开剂前沿至8-10cm时取出固定相，用吹风机冷风吹干；(4)在放射性色层扫描仪上测量放射性计数，计算其比移值R_f值和放射化学纯度；(5)根据R_f值和主峰的峰形选择合适的条件；

所述固定相经过电解质溶液预处理，所述电解质溶液为质量百分浓度为1％-3％的醋酸钠溶液、硫酸铝钾溶液、氯化钠溶液、碳酸钠溶液、碳酸氢钠溶液中的任一种；

所述R_f值的计算方法为：

R_f＝a/h (1)

式中，a为原点到斑点中心的距离；h为原点到溶剂前沿的距离；

所述放射化学纯度的计算方法为：放化化学纯度＝主峰的峰面积/总峰面积。

进一步地，所述固定相采用硅胶G板、快速硅胶纸、Whatman No.1色层纸。

进一步地，所述流动相采用V(乙腈)：V(水)＝38：2～12：28；V(乙腈)：V(生理盐水)＝20：20；V(甲醇)：V(水)＝17：3～0.5：100；V(甲醇)：V(生理盐水)＝20：20；V(乙醇)：V(水)＝20：20；V(丙酮)：V(水)＝25：5～25：10。

进一步地，在所述流动相中加入0.05mol/L的NaOH溶液，可以改善主峰在色层纸上的拖尾现象。

进一步地，所述方法采用下面的公式计算分离度R：

t_R1、t_R1分别为相邻两个峰的保留时间；W₁、W₂分别为相邻两个峰的峰宽。

本发明的有益效果在于：

本发明提供了一种更加方便、更加快速检测氟[¹⁸F]化钠注射液放化纯的薄层色谱分析方法。采用不同的电解质溶液对色层纸进行处理后，最终确定了几种合适的条件，能够将放射性主峰展开到R_f值0.7‐0.8，可将[¹⁸F]氟离子和其它放射性杂质有效分离。和传统的分离方法相比，本发明提供的方法不但解决了放射性主峰基本在原点，没有有效展开，存在一些杂质没有分离可能的问题，达到零杂质的效果；同时解决了主峰在色层纸上有拖尾现象，在展开体系中加入一定浓度的碱溶液，可以得到更好的峰形。

附图说明

图1流动相加碱体系得到的色谱图；

图2是流动相加酸体系得到的色谱图；

图3是色层纸未经预处理得到的色谱图；

图4是色层纸经醋酸钠溶液处理得到的色谱图；

图5是色层纸经硫酸铝钾溶液处理得到的色谱图；

图6是色层纸经氯化钠溶液处理得到的色谱图；

图7是色层纸经碳酸钠溶液处理得到的色谱图；

图8是色层纸经碳酸氢钠溶液处理得到的色谱图；

图9是质量百分浓度为1％的醋酸钠溶液处理色层纸后得到的色谱图；

图10是质量百分浓度为2％的醋酸钠溶液处理色层纸后得到的色谱图；

图11是质量百分浓度为3％的醋酸钠溶液处理色层纸后得到的色谱图。

具体实施方式

为了便于对本发明的进一步了解，下面提供的实施例对其做了更详细的说明。这些实施例仅供叙述而并非用来限定本发明的范围或实施原则，本发明的保护范围仍以权利要求为准。

实施例1

用不同的材料作固定相,配以相应的流动相进行筛选,结果见表1。由表中数据可知，体系11、14、21能将杂质和氟[¹⁸F]化钠有效分离，两峰的R_f值也较合适，但体系11、21拖尾更严重，因此最终确定最佳的TLC条件为：固定相为Whatman No.1，流动相为V(甲醇)：V(水)＝20：20的展开体系。

表1不同展开体系TLC结果

实施例2

由于使用体系14展开后经分析可知，主峰在色层纸上有拖尾现象，峰略宽。为了得到更好的峰形，改善拖尾，尝试在展开体系加入酸或碱，调节展开剂酸碱度，观察展开情况，结果列于表2、图1和图2。经分析可知，在碱性体系下拖尾略有改善，优选的流动相为V(甲醇)：V(水)：V(0.05mol/LNaOH)＝20：20：1。在酸性体系下氟化物杂质峰变小，可能是由于部分氟化物杂质与酸发生反应，与主产物氟[¹⁸F]化钠一起展开至前沿。

表2同一展开体系不同酸碱度对TLC分析结果的影响

实施例3

本发明用以下几种电解质溶液对Whatman No.1色层纸进行处理后，以V(甲醇)：V(水)＝20：20的展开体系为流动相分别对氟[¹⁸F]化钠放化纯进行分析。1)质量百分浓度为1％的醋酸钠溶液；2)质量百分浓度为1％的硫酸铝钾溶液；3)质量百分浓度为0.9％的氯化钠溶液；4)质量百分浓度为1％的碳酸钠溶液；5)质量百分浓度为1％的碳酸氢钠溶液。相应的色谱图如图3、图4、图5、图6、图7、图8所示。由图可知，用醋酸钠、氯化钠和碳酸钠溶液对Whatman No.1色层纸的处理后展开效果最佳，可有效减少拖尾，其中用醋酸钠溶液展开后效果更好。

实施例4

为了进一步对实验条件进行优化，本发明分别用质量百分浓度为1％、2％、3％三种不同浓度的醋酸钠溶液对Whatman No.1色层纸进行处理后，以V(甲醇)：V(水)＝20：20的展开体系为流动相分别对氟[¹⁸F]化钠放化纯进行分析。相应的色谱图如图9、图10、图11所示，由图可知，用质量百分浓度为2％的醋酸钠溶液处理后Whatman No.1色层纸，在V(甲醇)：V(水)＝20：20的展开体系下的展开效果更好。

以上实施例完成后，在放射性色层扫描仪上测量放射性计数，计算其R_f值和放化纯度。并采用上述方法分别验证方法的精密度、系统的精密度、方法的专属性和分离度。

1)方法精密度：照实验方法，分别平行点样6次，测得放化纯数据，计算相对标准偏差，方法的精密度≤2.0％为合格。

2)系统精密度：采用1中的一个纸条(1)号，放置在放射性色层扫描仪上重复测定6次，用测得的放化纯数据，计算相对标准偏差，系统的精密度≤2.0％为合格。

3)专属性:把方法的精密度中六次实验的的R_f值与R_f值的平均值进行比较，R_f值应为0.7-0.8之间。

4)分离度：用方法精密度实验中分析的结果用下列公式进行计算分离度R，分离度应大于2.0。

t_R1、t_R1分别为相邻两个峰的保留时间；W₁、W₂分别为相邻两个峰的峰宽。