一种简单灵敏的二价镍离子比色检测方法与流程

本发明属于纳米化学传感技术领域，具体涉及一种简单灵敏的二价镍离子比色检测方法。

背景技术：

二价镍离子（ni²⁺）属于过渡族元素，是人体必需的生命元素之一，可以激活人体中的各种酶，参与新陈代谢。然而，ni²⁺具有中等毒性，人体大剂量吸收或者长期接触会引发严重疾病，如皮肤疾病、肺部感染、恶性肿瘤等。我国生活饮用水标准规定水中ni²⁺限值为0.02mg/l。为保障人类健康和其他生物的生命安全，对食物、水和环境中的痕量ni²⁺进行灵敏检测意义重大。现有的ni²⁺检测技术主要包括有分光光度法、原子吸收法、原子发射光谱法、等离子体质谱法、电化学分析法和液相色谱法等。然而，这些方法要么操作步骤繁琐费时，不能用于现场分析和即时检验（point-of-caretesting），要么检测灵敏度有限。

技术实现要素：

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种简单灵敏的二价镍离子比色检测方法。

本发明的思路：含有n原子的低浓度邻菲罗啉可通过n-au反应介导金纳米颗粒发生凝集，导致反应溶液发生由红变蓝的颜色改变反应。而少量的ni²⁺即能通过与n原子配位，高效、特异地与邻菲罗啉分子生成邻菲罗啉-ni²⁺配合物，从而抑制上述溶液变色反应。金纳米颗粒凝集导致反应溶液发生颜色改变的程度反比于样本中ni²⁺浓度。因此，通过肉眼观察反应溶液的颜色变化即可实现ni²⁺的简单灵敏定性或半定量检测。若借助紫外可见分光光度计则可进一步实现目标金属离子分析物的准确定量检测。

具体步骤为：

步骤一，将ni²⁺样本溶液与邻菲罗啉溶液混合，生成邻菲罗啉-ni²⁺配合物，制得反应溶液。

步骤二，向步骤一制得的反应溶液中加入金纳米颗粒溶液，制得混合溶液，混合溶液中剩余的邻菲罗啉将介导金纳米颗粒凝集，金纳米颗粒的凝集程度与ni²⁺样本溶液中ni²⁺的浓度呈反比，肉眼观测该混合溶液的颜色变化进行定性或半定量分析，或使用光度计进行定量分析，即实现简单灵敏的ni²⁺比色检测。

所述金纳米颗粒溶液的颜色为红色。

所述光度计为台式光度计和便携式光度计中的一种。

与现有的ni²⁺检测方法相比，本发明的突出优点在于：

1）整个ni²⁺分析过程中的操作极为简单，未经专业技能培训的操作人员也能开展实验；2）通过协同邻菲罗啉有效介导金纳米颗粒凝集反应和ni²⁺高效、特异与邻菲罗啉分子生成邻菲罗啉-ni²⁺配合物反应，显著提高方法的检测灵敏度；3）仅需肉眼观测溶液颜色的改变，即可实现ni²⁺的灵敏定性或半定量分析，或可通过借助便携式光度计进一步实现分析物的准确定量检测，在极大降低分析成本的同时还能用于ni²⁺样本的现场分析和即时检测；4）本发明可直接推广应用于医学诊断、环境监测、食品安全等诸多领域里各类型样本中ni²⁺分析物的简单、经济、快速、灵敏、特异的定性与定量检测。

附图说明

图1为本发明实施例1和实施例2中简单灵敏的二价镍离子比色检测方法的原理示意图。

图中标记：1-1—无色超纯水；1-2—邻菲罗啉；2—检测试管；3-1—无色超纯水；3-2—ni²⁺；4—邻菲罗啉-ni²⁺配合物；5-1—红色溶液；5-2—金纳米颗粒；6—肉眼；7—便携式分光光度计。

图2为本发明实施例1中使用简单灵敏的二价镍离子比色检测方法分别检测（a）2μmni²⁺样本溶液与（b）空白样（超纯水）所得比色结果的比较。

图3为本发明实施例2中使用简单灵敏的二价镍离子比色检测方法分析一系列含有不同浓度ni²⁺的样本溶液时在730nm处的吸收强度值（a730）与在520nm处的吸收强度值（a520）的比值（a730/a520）和ni²⁺的浓度值之间的工作曲线。

具体实施方式

以下实施例将对本发明予以进一步的说明，但并不因此而限制本发明。

实施例1:

使用简单灵敏的二价镍离子比色检测方法分别检测2μmni²⁺样本溶液与空白样（超纯水）。

如图1所示，本实施例的具体步骤为：步骤一，在1个1.5ml的塑料检测试管中加入150μl2μm的邻菲罗啉溶液（由电阻率为18.2mω·cm的超纯水配制），随后往该溶液中滴加150μl2μm的ni²⁺样本溶液（由电阻率为18.2mω·cm的超纯水配制的氯化镍溶液），并摇动试管使两种溶液混合均匀，生成邻菲罗啉-ni²⁺配合物，制得反应溶液；步骤二，在上述反应溶液中继续加入300μl红色金纳米颗粒溶液（粒径约13nm，由柠檬酸钠还原氯金酸制得），并摇动试管使溶液混合均匀后，肉眼观测溶液的颜色变化。

根据相同的步骤，分析空白样，即超纯水（电阻率为18.2mω·cm），并肉眼观测溶液的颜色变化。从图2可以看出，检测空白样得到的是蓝色溶液，而检测2μm的ni²⁺分析物所得的是红色溶液。这是因为检测空白样时，含有n原子的邻菲罗啉分子可以通过n-au反应介导金纳米颗粒发生凝集，导致反应溶液产生由红变蓝的颜色变化。而当样本中存在ni²⁺时，ni²⁺通过与n原子配位，高效、特异地与邻菲罗啉分子生成邻菲罗啉-ni²⁺配合物产物。由于该产物不能导致金纳米颗粒发生凝集，整个反应溶液依然保持金纳米颗粒溶液的原始红色。图2中的对比实验结果表明，本发明的简单灵敏的ni²⁺比色检测方法切实可行。

实施例2:

使用简单灵敏的二价镍离子比色检测方法分析浓度范围为465nm~2μm的ni²⁺样本溶液。具体实施过程如下：

如图1所示，本实施例中每个ni²⁺样本溶液分析的具体步骤为：步骤一，在1个1.5ml的塑料检测试管中加入150μl2μm的邻菲罗啉溶液（由电阻率为18.2mω·cm的超纯水配制），随后往该溶液中滴加150μl某一浓度ni²⁺样本溶液（由电阻率为18.2mω·cm的超纯水配制的氯化镍溶液），并摇动试管使两种溶液混合均匀，生成邻菲罗啉-ni²⁺配合物，制得反应溶液；步骤二，在上述反应溶液中继续加入300μl红色金纳米颗粒溶液（粒径约13nm，由柠檬酸钠还原氯金酸制得），并摇动试管使溶液混合均匀后，肉眼观测溶液的颜色变化，并使用便携式紫外-可见分光光度计量测该溶液在520和730nm处的吸收强度值（a520和a730）。将所有样本这两个波长处的吸收强度值的比值（a730/a520）对ni²⁺的浓度值作图（图3），即可得到ni²⁺的定量测定工作曲线。

由图3可知，随着ni²⁺浓度的增加，相应的a730/a520比值逐渐降低。这是因为，当样本中ni²⁺浓度较大时，分析物可以高效、特异地与较多的邻菲罗啉分子生成邻菲罗啉-ni²⁺配合物产物。此时，剩余的邻菲罗啉分子不足以通过n-au反应介导金纳米颗粒发生凝集，含有较多自由分散的金纳米颗粒的相应混合溶液在730nm处的吸收强度值，即a730值较小；而其在520nm处的吸收强度值，即a520值则较大。此外，图3显示，新方法量测所有镍离子样本所得a730/a520比值与ni²⁺浓度在浓度范围465nm~2μm内呈现良好的线性关系。