本发明涉及pct检测，具体涉及一种pct校准品缓冲溶液。
背景技术：
降钙素原(procalcitonin-简称pct)是降钙素的前体激素，正常情况下由甲状腺c细胞分泌，经细胞内蛋白水解酶水解后形成的活性成分，其多肽链有114或116个氨基酸组成。严重全身性细菌、真菌和寄生虫感染时，pct异位生成、水平异常升高，且升高程度与感染严重度及预后相关。pct在不同医学领域对诊断和指导治疗有很高的价值，与目前所应用的诊断指标相比，pct在鉴别诊断和控制感染及严重炎症方面提供了额外的信息。近年来发现，在全身细菌感染和脓毒症的辅助和鉴别诊断方面降钙素原是一个具有高特异性和敏感性的新指标。
目前市面上常见的pct校准品/质控品均为冻干粉，在使用时需要手动添加液体进行复溶，手动操作易存在误差，导致批间差异。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种pct校准品缓冲溶液，该缓冲溶液不需要做冻干处理，液态情况下校准品的稳定性依然良好。
本发明通过下述技术方案实现：
一种pct校准品缓冲溶液，包括缓冲溶液，所述缓冲溶液内添加动物蛋白、阴离子表面活性剂、4氨基安替吡林和d-海藻糖。
动物蛋白对于试剂盒消除背景信号以及稳定性等有较大的作用，本发明向缓冲溶液中添加动物蛋白能够提高缓冲溶液的稳定性，同时添加阴离子表面活性剂、4氨基安替吡林和d-海藻糖能够进一步提高稳定性；该缓冲溶液不需要做冻干处理，液态情况下校准品的稳定性依然良好。
进一步地，动物蛋白的浓度≥0.01g/ml。
进一步地，阴离子表面活性剂的体积浓度为0.15％-0.30％。
进一步地，4氨基安替吡林的浓度为0.02-0.04mg/ml。
进一步地，d-海藻糖的浓度为0.02-0.04mg/ml。
进一步地，动物蛋白为牛血清白蛋白或酪蛋白。
进一步地，阴离子表面活性剂为十二烷基硫酸钠。
进一步地，缓冲溶液内添加酪蛋白、阴离子表面活性剂、4氨基安替吡林和d-海藻糖；所述酪蛋白的浓度≥0.01g/ml，阴离子表面活性剂体积浓度为0.15％，4氨基安替吡林的浓度为.02mg/ml，d-海藻糖的浓度为0.02ng/ml。
进一步地，缓冲溶液内添加酪蛋白、阴离子表面活性剂、4氨基安替吡林和d-海藻糖；所述酪蛋白的浓度为0.01g/ml，阴离子表面活性剂体积浓度为0.15％，4氨基安替吡林的浓度为.02mg/ml，d-海藻糖的浓度为0.02ng/ml。
本发明与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果：
本发明向缓冲溶液中添加动物蛋白能够提高缓冲溶液的稳定性，同时添加阴离子表面活性剂、4氨基安替吡林和d-海藻糖能够进一步提高稳定性；该缓冲溶液不需要做冻干处理，液态情况下校准品的稳定性依然良好。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例，对本发明作进一步的详细说明，本发明的示意性实施方式及其说明仅用于解释本发明，并不作为对本发明的限定。
实施例1：
一种pct校准品缓冲溶液，包括缓冲溶液，所述缓冲溶液内添酪蛋白、十二烷基硫酸钠、4氨基安替吡林和d-海藻糖，所述酪蛋白的浓度为0.01g/ml，阴离子表面活性剂体积浓度为0.15％(v/v)，4氨基安替吡林的浓度为.02mg/ml，d-海藻糖的浓度为0.02ng/ml。
实施例2：
本实施例基于实施例1，与实施例1的区别在于：
采用牛血清白蛋白替换酪蛋白。
实施案例3：
本实施例基于实施例1，与实施例1的区别在于：
增加十二烷基硫酸钠的体积浓度为0.30％(v/v)，4氨基安替吡林的浓度为0.04mg/ml，d-海藻糖的浓度为0.04mg/ml。
将实施例1-实施例3进行以下实验：
(一)实验材料
沃文特降钙素原测定试剂盒(化学发光法)，底物液，清洗液，贝克曼全自动化学发光免疫分析仪(access2)，阴离子表面活性剂，4氨基安替吡林，d-海藻糖，已添加0.01g/l酪蛋白的校准品缓冲液，已添加0.01g/l牛血清白蛋白的校准品缓冲液，降钙素原抗原。
(二)实验方法
1.用移液器取两份0.15ml十二烷基硫酸钠，用百分之一天平称量0.2gd-海藻糖，用万分之一天平称量0.2mg4氨基安替吡林
2.将上述量(称)取的阴离子表面活性剂，4氨基安替吡林，d-海藻糖一起加入到10ml的已添加0.01g/l酪蛋白的校准品缓冲液和已添加0.01g/l牛血清白蛋白的校准品缓冲液中使阴离子表面活性剂0.15％(v/v)，d-海藻糖0.02ng/ml，4氨基安替吡林0.02mg/ml稀释降钙素原抗原梯度浓度s2，s4分别编号为d组(实施例2)。
3.将上述量(称)取的阴离子表面活性剂，4氨基安替吡林，d-海藻糖一起分别加入到10ml的已添加0.01g/l酪蛋白的校准品缓冲液稀释降钙素原抗原梯度浓度s2，s4编号为c组(实施例1)。
4.将上述量(称)取的阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠，4氨基安替吡林，d-海藻糖一起分别加入到5ml的已添加0.01g/l酪蛋白的校准品缓冲液中使阴离子表面活性剂0.30％(v/v)，d-海藻糖0.04ng/ml，4氨基安替吡林0.04mg/ml稀释降钙素原抗原梯度浓度s2，s4分别编号为c1组(实施例3)。
5.将c1，c，d组pct液态校准品分别放置在4℃/37℃处理6天后，使用沃文特降钙素原测定试剂盒(化学发光法)在贝克曼全自动化学发光免疫分析仪(access2)上检测。
6.统计数据，将c1，c，d组pct校准品4℃/37℃处理6天的信号保留率，得出结论。
(三)实验结果如表1
表1三组pct校准品4℃/37℃处理6天的信号保留率比较
备注：s2、s4分别为pct校准品的两个浓度点，其中s2是低浓度点，s4是高浓度点。
(四)实验结论
在pct校准品稀释液已添加浓度为0.01g/ml的牛血清白蛋白或酪蛋白的校准品稀释液中添加阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠0.15％(v/v)，d-海藻糖0.02ng/ml，4氨基安替吡林0.02mg/ml，pct校准品稀释液的稳定性均较好。其中，酪蛋白浓度为0.01g/ml的校准品稀释液体系效果最好；且阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠，d-海藻糖，4氨基安替吡林浓度对pct校准品稀释液的稳定性影响不大，考虑成本，故使用阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠0.15％(v/v)，d-海藻糖0.02ng/ml，4氨基安替吡林0.02mg/ml，酪蛋白浓度为0.01g/ml的校准品稀释液体系。
对比例1：
一种pct校准品缓冲溶液，包括缓冲溶液，所述缓冲溶液内添酪蛋白，所述酪蛋白的浓度为0.01g/ml。
对比例2：
一种pct校准品缓冲溶液，包括缓冲溶液，所述缓冲溶液内添酪蛋白，所述酪蛋白的浓度为0.015g/ml。
对比例3：
一种pct校准品缓冲溶液，包括缓冲溶液，所述缓冲溶液内添酪蛋白，所述酪蛋白的浓度为0.005g/ml。
对比例4：
一种pct校准品缓冲溶液，包括缓冲溶液，所述缓冲溶液内添牛血清白蛋白，所述牛血清白蛋白的浓度为0.01g/ml。
将对比例1-对比例3的缓冲溶液进行以下实验：
(一)实验材料
沃文特降钙素原测定试剂盒(化学发光法)，底物液，清洗液，贝克曼全自动化学发光免疫分析仪(access2)，百分之一天平，酪蛋白，降钙素原抗原。
(二)实验方法
1、用百分之一天平分别称量0.05g，0.10g，0.15g酪蛋白。
2、将上述称量的酪蛋白分别加入到10ml的pct校准品缓冲液中，使酪蛋白浓度分别为0.005g/l，0.01g/l，0.015g/l分别稀释降钙素原抗原梯度浓度s2，s4分别编号为ⅰ，ⅱ，ⅲ组。
3、将ⅰ，ⅱ，ⅲ组pct液态校准品分别放置在4℃/37℃处理6天后，使用沃文特降钙素原测定试剂盒(化学发光法)在贝克曼全自动化学发光免疫分析仪(access2)上检测。
4、统计数据，将ⅰ组(对比例3)，ⅱ组(对比例1)，ⅲ组(对比例2)pct校准品4℃/37℃处理6天的信号保留率，得出结论。
(三)实验结果如表2
表2三组pct校准品4℃/37℃处理6天的信号保留率比较(酪蛋白)
备注：s2、s4分别为pct校准品的两个浓度点，其中s2是低浓度点，s4是高浓度点。
(四)实验结论
在pct校准品稀释液中添加酪蛋白浓度为0.01g/ml配制成校准品(s2，s4)分别放置在4℃/37℃处理6天后进行检测，统计信号保留率，确定添加酪蛋白浓度为≥0.01g/ml，可进一步提升校准品的稳定性。但考虑到随着酪蛋白加入量增加，酪蛋白会抑制信号且溶解会越来越困难，所以确定添加酪蛋白浓度为0.01g/ml。
将对比例1、对比例4的缓冲溶液进行以下实验：
(一)实验材料
沃文特降钙素原测定试剂盒(化学发光法)，底物液(四川沃文特)，清洗液(四川沃文特)，贝克曼全自动化学发光免疫分析仪(access2)，百分之一天平，牛血清白蛋白，酪蛋白，降钙素原抗原
(二)实验方法
1.用百分之一天平分别称量0.10g牛血清白蛋白和酪蛋白。
2.将上述称量的牛血清白蛋白和酪蛋白分别加入10ml校准品/质控品缓冲液中，使蛋白浓度为0.01g/ml分别稀释降钙素原抗原梯度浓度s2，s4分别编号为b(对比例4)，c组(对比例1)。
3.将未添加蛋白的pct缓冲液稀释降钙素原抗原梯度浓度s2，s4编号为a组(对照组)。
4.将a，b，c组pct液态校准品分别放置在4℃/37℃处理6天后，使用沃文特降钙素原测定试剂盒(化学发光法)在贝克曼全自动化学发光免疫分析仪(access2)上检测。
5.统计a，b，c组pct校准品4℃/37℃处理6天的信号保留率，得出结论。
(三)实验结果如表3所示
表3三组pct校准品4℃/37℃处理6天的信号保留率比较(不同蛋白种类)
备注：s2、s4分别为pct校准品的两个浓度点，其中s2是低浓度点，s4是高浓度点。
(四)实验结论
通过往pct校准品/质控品缓冲液中添加不同种类蛋白，与未添加蛋白的校准品/质控品缓冲液分别配制成校准品(s2，s4)，分别放置在4℃/37℃处理6天后进行检测，统计信号保留率，确定最适合的蛋白种类。添加酪蛋白和牛血清白蛋白的校准品稳定性均较好，均优于不添加动物蛋白的换成溶液，其中由添加酪蛋白的校准品稳定性较牛血清白蛋白好，但校准品稳定性仍有提升空间。
综上，由表1-表3的数据可知：
1)、但是添加牛血清白蛋白或酪蛋白的准品稀释液的稳定性低于同时添加动物蛋白与阴离子表面活性剂、d-海藻糖和4氨基安替吡林。
2)、添加或酪蛋白的准品稀释液的稳定性优于添加牛血清白蛋白的准品稀释液。
3)、酪蛋白的添加浓度大于等于0.01g/ml，稳定性较高。
因此，校准品稀释液组分中添加0.01g/ml的酪蛋白，添加阴离子表面活性剂0.15％(v/v)，d-海藻糖0.02ng/ml，4氨基安替吡林0.02mg/mlpct校准品不需要做冻干处理，液态情况下校准品的稳定性依然良好，即实施例1为最佳方案。
以上所述的具体实施方式，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施方式而已，并不用于限定本发明的保护范围，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。