一种阿瑞匹坦中间体纯度及其杂质的检测方法与流程

1.本发明属于药物分析技术领域，尤其涉及一种阿瑞匹坦中间体纯度及其杂质的检测方法。


背景技术：

2.阿瑞匹坦，别名醋胺硝唑，其主要用于预防高度致吐性抗肿瘤化疗的初次和重复治疗过程中出现的急性和迟发性恶心和呕吐，化学名称为5
‑
[2(r)
‑
[1(r)
‑
[3,5
‑
二(三氟甲基)苯基]乙氧基]
‑
3(s)
‑
(4
‑
氟苯基)吗啉
‑4‑
基甲基]
‑
3,4
‑
二氢
‑
2h
‑
1,2,4
‑
三唑
‑3‑
酮，cas号为170729
‑
80
‑
3。
[0003]
而(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮，其cas号为287930
‑
75
‑
0，是生产阿瑞匹坦(aprepitant)的重要中间体，其纯度、杂质直接影响阿瑞匹坦的纯度、杂质的大小，从而直接影响该药物疗效。为了加强(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮质量控制，需要研发出(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮纯度及其杂质的检测方法。


技术实现要素：

[0004]
本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种阿瑞匹坦中间体纯度及其杂质的检测方法，可实现(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮及其杂质的快速准确测定，具有很高的灵敏度，且操作简便可靠，可以实现完全分离，本发明为研究此类化合物提供了研究开发和质量检测的基础。
[0005]
一种阿瑞匹坦中间体纯度及其杂质的检测方法，采用高效液相色谱法进行检测，包括以下检测步骤：
[0006]
系统适应性试验溶液的制备：分别称取(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮、(1r)
‑1‑
[3,5
‑
双(三氟甲基)苯基]乙醇、4
‑
苄基
‑2‑
羟基
‑
吗啉
‑3‑
酮、(2sr)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1rs)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮四种工作品，用稀释液进行溶解定容，配制成系统适应性试验溶液；
[0007]
供试品溶液的制备：称定供试品，用稀释液进行溶解，配制成供试品溶液；
[0008]
所述高效液相色谱法的条件包括：
[0009]
流动相：流动相a：磷酸盐缓冲液；流动相b：乙腈；流动相a与流动相b的体积比为(30
‑
40)：(60
‑
70)。
[0010]
优选的，所述磷酸盐缓冲液为kh2po4缓冲液。
[0011]
优选的，所述系统适应性试验溶液的浓度为0.5
‑
1.0mg/ml。
[0012]
优选的，所述供试品溶液的浓度为0.5
‑
1.0mg/ml。
[0013]
优选的，所述系统适应性溶液进行检测时理论板数按(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮计算应不低于1500，主峰与任意杂质峰之间的分离度应不小于1.5。
[0014]
根据《中国药典》，分离度(简称为r)也叫分辨率，是指相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值，其计算公式为r＝2(tr2
‑
tr1)/(w1+w2))，tr1和tr2为相邻两峰的保留时间，w1和w2为其相应的峰宽。
[0015]
分离度表示相邻两峰的分离程度，r越大，表明相邻两组分分离越好。一般说当r＜1时，两峰有部分重叠；当r＝1.0时，分离度可达98％；当r＝1.5时，分离度可达99.7％。通常用r＝1.5作为相邻两组分已完全分离的标志。
[0016]
优选的，所述流动相a的浓度为0.01
‑
0.02mol/l，ph值为7.0
±
0.2。
[0017]
优选的，所述流动相中流动相a与流动相b的体积比为35：65。
[0018]
优选的，所述稀释液为乙腈。
[0019]
优选的，所述高效液相色谱法的条件还包括：检测器为紫外检测器。
[0020]
优选的，所述高效液相色谱法的条件还包括：色谱柱为wondasiltm c18 superb，其尺寸为4.6*250mm，5μm。
[0021]
更优选的，所述色谱柱的柱温为20
‑
35℃。最优选的，所述色谱柱的柱温为30℃。
[0022]
优选的，所述高效液相色谱法的条件还包括：进样量为15
‑
25μl。更优选的，所述进样量为20μl。
[0023]
优选的，所述高效液相色谱法的条件还包括：所述流动相的流速为0.5
‑
1.0ml/min。更优选的，所述流动相的流速为1.0ml/min。
[0024]
优选的，所述高效液相色谱法的条件还包括：检测波长为210
‑
218nm。更优选的，所述检测波长为215nm。
[0025]
上述检测方法在制备阿瑞匹坦中间体中的应用。
[0026]
相对于现有技术，本发明的有益效果如下：
[0027]
本发明采用高效液相色谱法检测(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮及其已知杂质，该检测方法简便、准确、快速、可靠、重复性高、稳定，能使(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮及其已知杂质均能实现有效分离，为(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮工业化生产提供简便、准确、快速、可靠的检测方法；选用乙腈和磷酸二氢钾缓冲液作为流动相进行一定比例的等度洗脱，改善了分离效果；将磷酸二氢钾缓冲液调ph至7.0改善了主峰及杂质峰的峰型。
附图说明
[0028]
图1为本发明实施例1中系统适用性试验溶液的高效液相色谱图；其中峰1表示4
‑
苄基
‑2‑
羟基
‑
吗啉
‑3‑
酮，峰2表示(1r)
‑1‑
[3,5
‑
双(三氟甲基)苯基]乙醇，峰3表示(2sr)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1rs)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮，峰4表示(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮；
[0029]
图2为供试品1的高效液相色谱图；
[0030]
图3为供试品2的高效液相色谱图；
[0031]
图4为供试品3的高效液相色谱图；
[0032]
图5为供试品4的高效液相色谱图。
具体实施方式
[0033]
为了让本领域技术人员更加清楚明白本发明所述技术方案，现列举以下实施例进行说明。需要指出的是，以下实施例对本发明要求的保护范围不构成限制作用。
[0034]
以下实施例中所用的原料、试剂或装置如无特殊说明，均可从常规商业途径得到，或者可以通过现有已知方法得到。
[0035]
实施例1
[0036]
本实施例提供一种阿瑞匹坦中间体纯度及其杂质的检测方法。
[0037]
一、仪器与检测条件
[0038]
色谱柱：wondasiltm c18 superb(4.6*250mm，5μm)；
[0039]
进样量：20μl；
[0040]
流速：1.0ml/min；
[0041]
柱温：30℃；
[0042]
检测波长：215nm；
[0043]
流动相：流动相a：kh2po4缓冲液((浓度为0.01mol/l，用氢氧化钠调ph至7.0
±
0.2))；流动相b：乙腈；流动相a与流动相b的体积比为35：65；
[0044]
稀释液：乙腈；
[0045]
检测器：紫外检测器。
[0046]
定量方法：面积归一化法。
[0047]
二、实验步骤
[0048]
采用高效液相色谱法进行检测，检测步骤如下：
[0049]
(1)分别称取(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮、(1r)
‑1‑
[3,5
‑
双(三氟甲基)苯基]乙醇、4
‑
苄基
‑2‑
羟基
‑
吗啉
‑3‑
酮、(2sr)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1rs)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮四种工作品，置于同一容器中，用稀释液进行溶解定容，配制成浓度为0.5mg/ml的系统适应性试验溶液；
[0050]
(2)精密称定供试品，用稀释液进行溶解，配置得到浓度为0.5mg/ml的供试品溶液；
[0051]
(3)系统适用性试验：精密量取系统适用性试验溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。理论板数按(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮计算应不低于1500，主峰与任意杂质峰之间的分离度应不小于1.5。测试结果如图1所示，采用本实施例的检测方法，能使(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮及其已知杂质均能实现快速及有效分离；
[0052]
(4)空白试验：精密量取稀释液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，空白不得有干扰。
[0053]
(5)精密量取供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液的色谱图中扣除空白试验色谱峰，按面积归一化法分别计算。
[0054]
实施例2
[0055]
取四批同一生产规格指令生产的(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮产品，分别定义为供试品1
‑
4，采用实施例1中的检测方法进行检测，采用面积归一化法进行纯度及其杂质含量计算，检测结果分别见表1
‑
4和图2
‑
5。其中apt04
表示(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮，apt03表示4
‑
苄基
‑2‑
羟基
‑
吗啉
‑3‑
酮，tfm表示(1r)
‑1‑
[3,5
‑
双(三氟甲基)苯基]乙醇，(1rs,2sr)
‑
apt04表示(2sr)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1rs)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮。
[0056]
表1供试品1的检测结果
[0057][0058]
表2供试品2的检测结果
[0059][0060]
表3供试品3的检测结果
[0061]
[0062][0063]
表4供试品4的检测结果
[0064][0065]
从表1
‑
4和图2
‑
5可知，本发明的检测方法能够简便、准确、快速、高效、可靠的检测(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮的纯度和杂质含量，具有很高的灵敏度，且操作简便，可以实现完全分离，进而为研究此类化合物提供了研究开发和质量检测的基础。
[0066]
在本发明记载的技术方案内，改变流动相中kh2po4缓冲液和乙腈的体积比，或者按照本发明技术的技术方案改变液相色谱过程中的一些参数，只要是在本发明的发明内容记载的技术方案内，对供试品中(2r)
‑4‑
苄基
‑2‑
((1r)
‑1‑
(3,5
‑
双(三氟甲基)苯基)乙氧基)吗啉
‑3‑
酮的纯度以及杂质含量的检测效果，与实施例2类似。