一种血小板功能检测试剂盒及血小板活化程度检测方法与流程

文档序号:24347075发布日期:2021-03-19 12:31阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种血小板功能检测试剂盒,其特征在于,包括3种试剂:试剂1、试剂2、试剂3;试剂1采用单抗标记的磁珠、单抗选用抗血小板膜p-选组素单抗sz-51或抗血小板膜gpiib/iiia单抗7e3;试剂2采用发光标记物标记的抗人血小板抗体;试剂3为诱导剂。

2.根据权利要求1所述的血小板功能检测试剂盒,其特征在于,所述发光标记物采用化学发光标记物;所述诱导剂采用血小板激活剂。

3.根据权利要求2所述的血小板功能检测试剂盒,其特征在于,所述发光标记物采用吖啶酯或鲁米诺;所述诱导剂采用二磷酸腺苷、花生四烯酸、肾上腺素或胶原。

4.一种血小板活化程度检测方法,其特征在于,所述检测方法通过对血小板活化程度绝对值进行检测计算,具体方法为:对样本进行血小板活化诱导处理,加入单抗标记的磁珠,与样本中已被活化的血小板结合形成活化血小板-磁珠复合物,采用磁分离的方法将活化血小板-磁珠复合物分离出来后,加入发光标记物标记的抗人血小板抗体后,激发发光标记物发光,通过测定发光标记物的发光量计算活化血小板数量。

5.根据权利要求4所述的血小板活化程度检测方法,其特征在于,所述血小板活化程度绝对值的检测方法如下:

(1)采用抗血小板膜p-选组素单抗sz-51或抗血小板膜gpiib/iiia单抗7e3标记磁珠;

(2)采用发光标记物标记抗人血小板抗体;

(3)取待测样本抗凝全血或富血小板血浆,加入诱导剂,使血小板活化,加入步骤(1)中标记后的磁珠,与活化的血小板结合形成活化血小板-磁珠复合物;

(4)混匀后,采用磁分离的方法将活化血小板-磁珠复合物从待测样本中分离出来;

(5)向分离出来的活化血小板-磁珠复合物中加入缓冲液,使其重悬;然后加入发光标记物标记的抗人血小板抗体,形成抗体-活化血小板-磁珠复合物;

(6)测定发光标记物的发光量,计算活化血小板数量。

6.根据权利要求5所述的血小板活化程度检测方法,其特征在于,所述磁分离的方法通过采用电磁铁将活化血小板-磁珠复合物吸附在盛有待测样本的容器的器壁处,然后将容器内的待测样本弃去,除去电磁铁的磁性,此时仍保留在容器内的即为所述分离出的活化血小板-磁珠复合物。

7.根据权利要求6所述的血小板活化程度检测方法,其特征在于,所述发光标记物采用吖啶酯或鲁米诺;所述诱导剂采用二磷酸腺苷、花生四烯酸、肾上腺素或胶原。

8.根据权利要求7所述的血小板活化程度检测方法,其特征在于,所述步骤(1)采用抗血小板膜p-选组素单抗sz-51标记磁珠;所述发光标记物采用吖啶酯;所述诱导剂采用二磷酸腺苷;所述步骤(3)中待测样本抗凝全血用量为0.2ml,诱导剂用量为0.02ml,标记后的磁珠用量为0.2ml;所述步骤(5)中发光标记物标记的抗人血小板抗体用量为0.1ml。

9.根据权利要求8所述的血小板活化程度检测方法,其特征在于,所述步骤(6)中活化血小板数量的计算方法如下:对活化血小板数量与发光标记物发光量进行直线拟合,将测定发光标记物的发光量代入拟合直线中,即得所述活化血小板数量。

10.根据权利要求9所述的血小板活化程度检测方法,其特征在于,将计算得到的活化血小板数量与正常参考值进行比较,判断血小板活化程度;所述正常参考值为(40~130)×109/l:当计算得到的活化血小板数量低于40×109/l时,血小板活化程度低;当计算得到的活化血小板数量高于130×109/l时,血小板活化程度高。


技术总结
本发明公开了一种血小板功能检测试剂盒,包括3种试剂:试剂1、试剂2、试剂3;试剂1采用单抗标记的磁珠、单抗选用抗血小板膜P‑选组素单抗SZ‑51或抗血小板膜GPIIb/IIIa单抗7E3;试剂2采用发光标记物标记的抗人血小板抗体;试剂3为诱导剂。本发明通过直接进行血小板活化数量测定,进行血小板活化程度绝对值评价,有效消除患者血小板数量不同带来的影响,准确反应血小板功能上的差异。

技术研发人员:曹宁;张国英
受保护的技术使用者:滁州瑞谷生物技术有限公司
技术研发日:2020.12.08
技术公布日:2021.03.19
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