新生儿胆道闭锁诊断标志物的应用的制作方法

文档序号:24939530发布日期:2021-05-04 11:31阅读:来源:国知局

技术特征:

1.胆红素单葡萄糖醛酸酯作为诊断标志物在制备用于评估新生儿胆道闭锁风险的诊断装置中的应用,其特征在于,所述诊断装置对胆红素单葡萄糖醛酸酯进行定量检测。

2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述诊断装置选自医疗器械、试剂盒、试纸和检测装置。

3.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述诊断装置以新生儿为检测对象,采用检测对象的血液样本进行检测;优选地,所述血液样本选自检测对象的全血、血浆、血清和干血斑。

4.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述定量检测方法为液相色谱-串联质谱;优选地,所述液相色谱选自高效液相色谱、超高效液相色谱和纳升液相色谱;优选地,所述液相色谱选自高效液相色谱,液相色谱柱选自c8和c18硅胶填料柱。

5.如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述液相色谱-串联质谱检测方法,液相色谱的流动相的组成为:

水相a选自ph值调整剂调整ph值为3-4.5的超纯水;

有机相b选自乙腈、乙醇、甲醇、丙二醇、异丙醇中一种或几种的组合;

优选地,所述ph值调整剂选自乙酸铵-乙酸、甲酸铵-甲酸、三氟乙酸和三氯乙酸;优选地,所述ph值调整剂为乙酸铵/乙酸缓冲系统;

优选地,所述有机相b选自乙腈、甲醇、异丙醇中一种或几种的组合;优选地,所述有机相b包括乙腈、甲醇和异丙醇。

6.如权利要求5至12任一所述的应用,其特征在于,所述液相色谱-串联质谱检测方法,所述质谱选自四级杆质谱、飞行时间质谱、离子肼质谱和高分辨轨道肼质谱;优选地,所述质谱的条件和设定质谱定性定量检测模式包括:选择电喷离子源(esi),根据检测目标化合物的响应选择离子扫描模式;选择多反应监测方法(mrm),设定多反应监测模式参数。

7.如权利要求1至14任一所述的应用,其特征在于,所述诊断装置可任选地联合检测对象的其他检测指标评估新生儿胆道闭锁风险,其他检测指标选自游离胆红素、胆红素双葡萄糖醛酸酯、胆绿素、γ-谷氨酰转移酶、mmp-7和其他直接或间接地对新生儿胆道闭锁有诊断能力的指标之一种或几种用于所述应用目的。

8.用于评估新生儿胆道闭锁风险的试剂盒,其特征在于,包含胆红素单葡萄糖醛酸酯定量检测试剂;优选地,所述定量检测试剂包括胆红素单葡萄糖醛酸酯质控品和内标准品;优选地,所述胆红素单葡萄糖醛酸酯质控品为胆红素单葡萄糖醛酸酯标准品分配于包含有第一稳定剂和第二稳定剂的体系中;优选地,所述第一稳定剂选自丁基羟基茴香醚(bha)、二丁基羟基甲苯(bht)、没食子酸丙酯(pg)、叔丁基对苯二酚(tbhq)中之一种或几种的组合;优选地,所述第二稳定剂选自抗坏血酸;优选地,所述第一稳定剂和第二稳定剂的体系为含有二丁基羟基甲苯(bht)和抗坏血酸的有机溶剂分散体系;优选地,所述有机溶剂分散体系的有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮、丙二醇和乙腈中之一种或几种的组合。

9.如权利要求18所述的试剂盒,其特征在于,所述体系为固体体系,所述固体体系包括固体载体;优选地,所述固体载体为滤纸片,选自分析滤纸、定性分析滤纸和慢速定量无灰滤纸;优选地,所述滤纸片作为固体载体时,其经过以下预处理:在含有第一稳定剂和第二稳定剂的有机溶剂分散体系中浸泡后阴干。

10.如权利要求16至25任一所述的试剂盒用于评估新生儿胆道闭锁风险的试剂盒的使用方法,包括,

(1)以新生儿作为检测对象获得测试样本;

(2)采用定量检测方法测定测试样本中生物标志物的表达水平;

(3)分析所述生物标志物的表达水平以进行风险评估,所述分析可以是与定量检测方法的截断值比较,该风险评估结论可以用于检测对象胆道闭锁风险高低的评估;

优选地,在步骤(3)风险评估时,可任选地联合检测对象的其他检测指标评估新生儿胆道闭锁风险,其他检测指标选自游离胆红素、胆红素双葡萄糖醛酸酯、胆绿素、γ-谷氨酰转移酶、mmp-7和其他直接或间接地对新生儿胆道闭锁有诊断能力的指标之一种或几种;

优选地,所述定量检测方法为权利要求1至7中任一所述的检测方法;

优选地,所述测试样本选自检测对象的全血、血浆、血清和干血斑。

11.一种评估新生儿胆道闭锁风险的方法,包括:

(1)以新生儿作为检测对象获得测试样本;

(2)采用定量检测方法测定测试样本中诊断标志物的表达水平;所述诊断标志物包括胆红素单葡萄糖醛酸酯,及任选地联合检测对象的其他检测指标评估新生儿胆道闭锁风险,其他检测指标选自游离胆红素、胆红素双葡萄糖醛酸酯、胆绿素、γ-谷氨酰转移酶、mmp-7和其他直接或间接地对新生儿胆道闭锁有诊断能力的指标之一种或几种;

(3)分析所述诊断标志物的表达水平以进行风险评估,所述分析可以是与定量检测方法的截断值(cutoff值)比较,该风险评估结论可以用于检测对象胆道闭锁风险高低的评估;

(4)根据评估结论将检测对象分为高风险组和低风险组,其中高风险组提示有必要进行进一步临床诊断以确定检测对象是否具有胆道闭锁;

优选地,步骤(3)所述定量检测方法的截断值系采用步骤(2)所述定量检测方法,事先对健康新生儿测试样本中的生物标志物水平与胆道闭锁新生儿测试样本中相应的生物标志物水平,进行统计分析确定的值;

优选地,所述测试样品选自全血、血浆、血清或干血斑;

优选地,所述定量检测方法选自如权利要求1至7中任一所述的检测方法。

12.一种利用胆红素单葡萄糖醛酸酯的表达水平用于预测新生儿胆道闭锁风险的装置,其包括:

(1)用于接收检测对象的检测样品的模块;

(2)检测诊断标志物表达水平的数据的模块;其中诊断标志物至少包括胆红素单葡萄糖醛酸酯,任选地包括测试样本中的游离胆红素、胆红素双葡萄糖醛酸酯、胆绿素、γ-谷氨酰转移酶、mmp-7和其他对胆道闭锁有诊断能力的临床指标相结合;

基于向数据库输入诊断标志物的表达水平来产生风险评分的模块,所述数据库包含与检测样本和检测方法相关的对照表达谱;所述对照表达谱根据检测样本和检测方法而事先得出,可表达为检测的诊断标志物的截断值;进行风险评估是将测试样本中生物标志物的表达水平与高效液相色谱串联质谱作为检测方法的截断值相比较,高于截断值可认为是检测对象具有胆道闭锁的高风险。


技术总结
本发明公开了新生儿胆道闭锁诊断标志物在制备评估和诊断新生儿胆道闭锁的工具中的应用。所述诊断产品可以为医疗器械、试剂盒、试纸和医疗装置等。本发明还提供了检测所述生物标志物的试剂盒及其使用方法。本发明提供了新生儿胆道闭锁风险早期筛查和区别于其他原因导致的胆汁瘀积的诊断的有效手段,提高了新生儿胆道闭锁诊断效率和诊断准确性,为及时采取治疗措施争取时间,有利于提高新生儿胆道闭锁的治疗效果和预后。

技术研发人员:贾伟;谢国祥;周科军
受保护的技术使用者:深圳市绘云生物科技有限公司
技术研发日:2020.12.18
技术公布日:2021.05.04
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