一种血细胞分析用稀释液的制作方法

1.本发明涉及血细胞分析领域，具体涉及一种血细胞分析用稀释液。
技术背景
2.在医学临床检验领域中，血细胞的测定对于患者的身体状况的诊断和疾病的诊断及后续治疗具有重大的临床意义。在通过血细胞分析仪对血细胞进行分析时，为便于对细胞进行分析，需要使用稀释液对血细胞进行稀释。但是，现有的血细胞分析用稀释液一般为进口血细胞分析仪原厂配套的试剂，其价格昂贵且不便于运输；目前，虽然有较好的国产血细胞分析用稀释液，其效果也与进口试剂相当，但其价格同样较高；部分国产试剂价格虽然便宜，但稳定性较差，不但测试结果准确度无法保证，还可能对机器造成无法估计的损害。与此同时，目前大部分厂家仍使用叠氮钠作为抗菌防腐剂，其对环境和生产人员都具有一定的损害。


技术实现要素：

3.本发明实施例提供一种血细胞分析用稀释液，能够解决价格高、性能不稳定和抗菌防腐剂不安全的技术问题。
4.为了解决以上技术问题，本发明实施例采用的一个技术方案是：
5.本发明实施例提供一种血细胞分析用稀释液，所述血细胞分析用稀释液包括：
6.无水硫酸钠，氯化钠，乙二胺四乙酸二钠，硼酸，硫酸庆大霉素，甲醛；其中：
7.每升所述血细胞分析用稀释液中，无水硫酸钠的含量为2.0-5.0g，氯化钠的含量为5.0-9.0g，乙二胺四乙酸二钠的含量为0.20-0.35g，硼酸的含量为2.0-3.5g，硫酸庆大霉素的含量为0.05-0.10g，甲醛的含量为0.3-0.8ml。
8.可选地，所述血细胞分析用稀释液的电导率范围为15-20ms/cm。
9.可选地，所述血细胞分析用稀释液的ph范围为6.8-7.8。
10.可选地，所述血细胞分析用稀释液的渗透压范围为300-330mosm/kg。
11.优选地，所述无水硫酸钠含量为3.0g/l。
12.优选地，所述氯化钠含量为4.5g/l。
13.优选地，所述硼酸含量为3.0g/l。
14.优选地，所述乙二胺四乙酸二钠含量为0.30g/l。
15.优选地，所述硫酸庆大霉素含量为0.08g/l。
16.优选地，所述甲醛含量为0.5ml/l。
17.更优选地，所述血细胞分析用稀释液的ph值为7.4。
18.更优选地，所述血细胞分析用稀释液的渗透压为320mosm/kg。
19.更优选地，所述血细胞分析用稀释液的电导率为16.50ms/cm。
20.与现有技术相比，本发明实施例的有益效果为：本发明实施例提供的一种血细胞分析用稀释液，原料成本低，制备工艺简单，无需特殊操作，仅需进行一般的物理溶解、定容
和混匀即可；配方中，用硫酸庆大霉素和甲醛代替了常用抗菌防腐剂叠氮钠，较为安全，避免了生产和使用过程中对相关人员和环境造成损害，所用甲醛除了具有防腐作用，还具备固定血细胞的作用，能在一定程度上保持血细胞形态和结构完整，还能增加血细胞抗机械损伤的效果；本发明实施例中一种血细胞分析用稀释液提供的最优选的电导率值，提供合适的离子强度，对血细胞的计数提供了稳定的环境，更有利于分类计数。使用该血细胞分析用稀释液在检测全血样本，测试结果重现性好，准确度高。
具体实施方式
21.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
22.本发明实施例提供一种血细胞分析仪用稀释液。所述血细胞分析用稀释液包括：无水硫酸钠，氯化钠，乙二胺四乙酸二钠，硼酸，硫酸庆大霉素，甲醛。
23.其中，每升所述血细胞分析用稀释液中，无水硫酸钠的含量为2.0-5.0g，氯化钠的含量为5.0-9.0g，乙二胺四乙酸二钠的含量为0.20-0.35g，硼酸的含量为2.0-3.5g，硫酸庆大霉素的含量为0.05-0.10g，甲醛的含量为0.3-0.8ml。
24.上述血细胞分析用稀释液的制备过程如图1所示：
25.100、首先将上述各组分加入烧杯，用一定量的纯水溶解；
26.101、其次，将溶液用玻璃棒从烧杯转移至容量瓶；
27.102、然后使用滴管用纯水定容至1升；
28.103、定容完后，将其摇匀。
29.无水硫酸钠和氯化钠是无机盐，稀释后的无机盐溶液与其它组分共同为血细胞提供人体无机盐环境相似的条件，保证血细胞在合适的ph范围、合适的渗透压范围和合适的电导率范围中进行检测；硼酸为缓冲剂，除了起到缓冲的作用，因为不含磷，还避免造成环境污染；乙二胺四乙酸二钠为抗凝剂，其可组织血细胞凝固；硫酸庆大霉素和甲醛为防腐剂，起到抑菌和防腐的作用，其中甲醛还具备固定血细胞的作用，能在一定程度上保持血细胞形态和结构完整，还能增加血细胞抗机械损伤的效果，保证了检测的准确性。
30.在一些实施例中，所述血细胞分析用稀释液的渗透压为320mosm/kg。
31.在一些实施例中，令人惊喜的发现，所述血细胞分析用稀释液的电导率为16.50ms/cm时是最优的电导率值，可以提供合适的离子强度，对血细胞的计数提供了稳定的环境，更有利于分类计数。
32.本发明实施例中，用硫酸庆大霉素和甲醛代替了常用抗菌防腐剂叠氮钠，较为安全，避免了生产和使用过程中对相关人员和环境造成损害，所用甲醛除了具有防腐作用，还具备固定血细胞的作用，能在一定程度上保持血细胞形态和结构完整，还能增加血细胞抗机械损伤的效果；使用该血细胞分析用稀释液在检测全血样本，测试结果重现性好，准确度高。
33.以下提供多个实施例以详细说明本发明实施例提供的一种血细胞分析用稀释液的检测效果和准确性。
34.实施例1：一种血细胞分析用稀释液1:
35.本实施例提供的血细胞分析用稀释液之中，每升稀释液包括：无水硫酸钠3.00g,氯化钠4.50g，硼酸3.00g，乙二胺四乙酸二钠0.30g，硫酸庆大霉素0.08g，甲醛0.50ml；具体配置方法为：先将上述组分用纯水溶解，再用纯水定容至1升。该稀释液的ph为7.4。
36.实施例2：一种血细胞分析用稀释液2:
37.本实施例提供的血细胞分析用稀释液之中，每升稀释液包括：无水硫酸钠3.50g,氯化钠5.00g，硼酸3.00g，乙二胺四乙酸二钠0.30g，硫酸庆大霉素0.08g，甲醛0.50ml；具体配置方法为：先将上述组分用纯水溶解，再用纯水定容至1升。该稀释液的ph为7.4。
38.实施例3：一种血细胞分析用稀释液3:
39.本实施例提供的血细胞分析用稀释液之中，每升稀释液包括：无水硫酸钠3.50g,氯化钠5.00g，硼酸3.00g，乙二胺四乙酸二钠0.25g，硫酸庆大霉素0.08g，甲醛0.50ml；具体配置方法为：先将上述组分用纯水溶解，再用纯水定容至1升。该稀释液的ph为7.4。
40.实施例4：本底计数实验：
41.血细胞分析仪开机后，机器会自动清洗内部管道，接着自动测量本底并出现技术界面；出现技术界面后，机器将自动测量的本底值显示在屏幕上，本底结果要求：wbc≤0.3、rbc≤0.03、hgb≤1、plt≤10；如果本底没有达到仪器的要求，仪器将会提示“本底异常”请执行清洗或维护程序。
42.分别用本发明实施例1-3的稀释液，在血液细胞分析仪上做本底计数实验。具体为，分别使用迈瑞bc-5000、帝迈df-53和锦瑞kt-6610三种血细胞分析仪，按照血细胞分析仪的说明书，将血细胞分析仪中的原厂稀释液排空，分别接入本发明实施例1-3的稀释液，其余试剂均使用原厂试剂，换好稀释液后，以本发明实施例1-3的稀释液作为样本，进行本底计数实验。
43.使用迈瑞bc-5000血细胞分析仪，分别接入本发明实施例1-3的稀释液，以本发明实施例1-3稀释液为样本，进行5次本底计数，然后计算平均值，检测结果见表1；
44.使用帝迈df-53血细胞分析仪，分别接入本发明实施例1-3的稀释液，以本发明实施例1-3稀释液为样本，进行5次本底计数，然后计算平均值，检测结果见表2；
45.使用锦瑞kt-6610血细胞分析仪，分别接入本发明实施例1-3的稀释液，以本发明实施例1-3稀释液为样本，进行5次本底计数，然后计算平均值，检测结果见表3。
46.其中：wbc指白细胞、rbc指红细胞、hgb指血红蛋白、hct指红细胞压积(又称红细胞比积或红细胞比容)、plt指血小板。
47.表1本底计数测试结果(迈瑞bc-5000)
[0048][0049]
表2本底计数测试结果(帝迈df-53)
[0050][0051]
表3本底计数测试结果(锦瑞kt-6610)
[0052][0053]
由表1-3可知，在迈瑞bc-5000、帝迈df-53和锦瑞kt-6610三种不同的血细胞分析仪中，以本发明实施例1-3提供的任意一种稀释液作为稀释液，所测出的本底值，均达到仪器的要求。
[0054]
实施例5：测试结果的重复性：
[0055]
分别用本发明实施例1-3提供的一种细胞分析用稀释液，其ph值、渗透压和电导率值与血细胞在人体中的环境相似，对血细胞的计数提供了稳定的环境，更有利于分类计数；用上述的细胞分析用稀释液，分别在迈瑞bc-5000、帝迈df-53和锦瑞kt-6610三种不同的血细胞分析仪上，对全血样本进行测试；同一个全血样本，用不同的细胞分析用稀释液在不同的血细胞分析仪上重复测试10次。
[0056]
在血细胞分析仪迈瑞bc-5000上的测试结果，呈现于表4；
[0057]
在血细胞分析仪帝迈df-53上的测试结果，呈现于表5；
[0058]
在血细胞分析仪锦瑞kt-6610上的测试结果，呈现于表6；
[0059]
其中：wbc指白细胞、rbc指红细胞、hgb指血红蛋白、mcv指平均红细胞体积、plt指血小板。
[0060]
表4重复性测试结果(迈瑞bc-5000)
[0061][0062]
表5重复性测试结果(帝迈df-53)
[0063][0064]
表6重复性测试结果(锦瑞kt-6610)
[0065][0066]
由表4-6可知，在迈瑞bc-5000、帝迈df-53和锦瑞kt-6610三种不同的血细胞分析仪中，以本发明实施例1-3提供的任意一种稀释液作为稀释液，在检测全血样本时，其检测
结果具备优秀的重复性。
[0067]
实施例6：准确性对比实验：
[0068]
如表7所示，分别采用本发明实施1-3提供的一种细胞分析用稀释液，通过血细胞分析仪迈瑞bc-5000对3例健康新鲜全血样本进行检测，并分别将其检测结果与镜检法的检测结果进行准确度对比评估。
[0069]
表7准确度测试结果(迈瑞bc-5000)
[0070]
[0071][0072][0073]
根据上表检测结果可知，采用本发明实施例提供的一种血细胞分析用稀释液，在迈瑞bc-5000上测试所得的白细胞总数、红细胞总数、血红蛋白、平均红细胞体积和血小板
数的检测结果，与镜检法的检测结果没有显著的差异；因此，本发明实施例提供的一种血细胞分析用稀释液在迈瑞bc-5000上的检测结果具有较高的准确性。
[0074]
如表8所示，分别采用本发明实施1-3提供的一种细胞分析用稀释液，通过血细胞分析仪帝迈df-53对3例健康新鲜全血样本进行检测，并分别将其检测结果与镜检法的检测结果进行准确度对比评估；
[0075]
表8准确度测试结果(帝迈df-53)
[0076]
[0077][0078]
根据上表检测结果可知，采用本发明实施例提供的一种血细胞分析用稀释液，在帝迈df-53上测试所得的白细胞总数、红细胞总数、血红蛋白、平均红细胞体积和血小板数的检测结果，与镜检法的检测结果没有显著的差异；因此，本发明实施例提供的一种血细胞分析用稀释液在帝迈df-53上的检测结果具有较高的准确性。
[0079]
如表9所示，分别采用本发明实施1-3提供的一种细胞分析用稀释液，通过血细胞分析仪锦瑞kt-6610对3例健康新鲜全血样本进行检测，并分别将其检测结果与镜检法的检测结果进行准确度对比评估；
[0080]
表9准确度测试结果(锦瑞kt-6610)
[0081]
[0082][0083]
根据上表检测结果可知，采用本发明实施例提供的一种血细胞分析用稀释液，在锦瑞kt-6610上测试所得的白细胞总数、红细胞总数、血红蛋白、平均红细胞体积和血小板数的检测结果，与镜检法的检测结果没有显著的差异；因此，本发明实施例提供的一种血细胞分析用稀释液在锦瑞kt-6610上的检测结果具有较高的准确性。
[0084]
根据表7-9的检测结果对比分析可知，采用本发明实施例提供的一种血细胞分析用稀释液，在迈瑞bc-5000、帝迈df-53和锦瑞kt-6610上测试所得的白细胞总数、红细胞总数、血红蛋白、平均红细胞体积和血小板数的检测结果，与镜检法的检测结果均没有显著的差异；因此，本发明实施例提供的一种血细胞分析用稀释液在迈瑞bc-5000、帝迈df-53和锦瑞kt-6610上的检测结果均具有较高的准确性。
[0085]
综上所述，与现有技术相比，本发明实施例提供的一种血细胞分析用稀释液，原料成本低，制备工艺简单，无需特殊操作，仅需进行一般的物理溶解、定容和混匀即可；配方中，用硫酸庆大霉素和甲醛代替了常用抗菌防腐剂叠氮钠，较为安全，避免了生产和使用过程中对相关人员和环境造成损害，所用甲醛除了具有防腐作用，还具备固定血细胞的作用，能在一定程度上保持血细胞形态和结构完整，还能增加血细胞抗机械损伤的效果；本发明实施例中一种血细胞分析用稀释液提供的最优选的电导率值，提供合适的离子强度，对血细胞的计数提供了稳定的环境，更有利于分类计数。使用该血细胞分析用稀释液在检测全血样本，测试结果重现性好，准确度高。
[0086]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精
神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。