技术特征：
1.一种核苷类药物生物转化研究中排除内源性物质干扰的方法，其特征在于，包括以下步骤：s1、采用放射性同位素标记待测核苷类药物；s2、对所述步骤s1中标记了放射性同位素的待测核苷类药物进行生物转化试验；s3、对经过所述步骤s2的生物转化试验产生的样品和空白对照分别用高效液相联用放射性同位素/高分辨质谱检测，找出与空白对照同一保留时间的带有放射性同位素的特征峰作为待分析的拟代谢产物，以及找出与所述步骤s2的生物转化试验产生的空白对照样品同一保留时间的特征峰作为内源性物质；s4、分别富集所述步骤s3中的待分析的拟代谢产物和内源性物质，并分别进行衍生化反应，分别得到衍生化拟代谢产物和衍生化内源性物质；s5、用高效液相联用放射性同位素/高分辨质谱分别检测所述步骤s4中的衍生化拟代谢产物和衍生化内源性物质来进行判断，判断原则为：若所述衍生化拟代谢产物的保留时间均与所述衍生化内源性物质的保留时间对应，则所述内源性物质中含有与所述待分析的拟代谢产物相同的物质；若所述衍生化拟代谢产物的保留时间部分与所述衍生化内源性物质的保留时间对应，则所述待分析的拟代谢产物包含第一类物质和第二类物质，且所述内源性物质包含所述第一类物质但不包含所述第二类物质；若所述衍生化拟代谢产物的保留时间均不与所述衍生化内源性物质的保留时间对应，则所述内源性物质中不含有与所述待分析的拟代谢产物相同的物质，排除了所述内源性物质的干扰。2.如权利要求1所述的核苷类药物生物转化研究中排除内源性物质干扰的方法，其特征在于，所述步骤s1中：放射性同位素选自c-14、h-3、i-125中的一种或多种。3.如权利要求1所述的核苷类药物生物转化研究中排除内源性物质干扰的方法，其特征在于，所述步骤s1中：放射性同位素标记在待测核苷类药物的不被代谢成小分子的部位。4.如权利要求3所述的核苷类药物生物转化研究中排除内源性物质干扰的方法，其特征在于，所述步骤s1中：待测核苷类药物的不被代谢成小分子的部位选自腺嘌呤，鸟嘌呤，胸腺嘧啶，尿嘧啶及其衍生物。5.如权利要求1所述的核苷类药物生物转化研究中排除内源性物质干扰的方法，其特征在于，所述步骤s2中：生物转化试验选自动物体内生物转化研究、人体内生物转化研究和体外基质生物转化研究中的一种或者多种；所述体外基质选自血浆、肝细胞、肝微粒体、肝s9中的一种或者多种。6.如权利要求1所述的核苷类药物生物转化研究中排除内源性物质干扰的方法，其特征在于，所述步骤s3中：所述空白对照用于排除基质干扰；所述基质干扰包括内源性物质干扰；所述同一保留时间和所述保留时间对应均包含分析化学领域允许的时间误差范围。7.如权利要求1所述的核苷类药物生物转化研究中排除内源性物质干扰的方法，其特征在于，所述高效液相联用放射性同位素检测器/高分辨质谱指高效液相通过三通分流，分别进入放射性同位素检测器和高分辨质谱检测器。8.如权利要求1所述的核苷类药物生物转化研究中排除内源性物质干扰的方法，其特征在于，所述步骤s4中：所述衍生化反应选自甲基化反应、酯化反应、酰化反应中的一种或者多种。
9.如权利要求1所述的核苷类药物生物转化研究中排除内源性物质干扰的方法，其特征在于，还包括步骤s6、采用质谱对所述待测核苷类药物经所述生物转化试验得到的尚未鉴定出的代谢产物重新进行物质种类鉴定。10.如权利要求9所述的核苷类药物生物转化研究中排除内源性物质干扰的方法，其特征在于，所述步骤s6中：尚未鉴定出的代谢产物为排除所述步骤s5中衍生化拟代谢产物的保留时间与衍生化内源性物质的保留时间对应的特征峰表示的物质。
技术总结
本发明公开了一种核苷类药物生物转化研究中排除内源性物质干扰的方法。本发明在对核苷类似物进行生物转化研究的过程中，将放射性同位素标记的核苷类似物作为示踪剂，使用高效液相联用放射性同位素/高分辨质谱进行分析，可以将核苷类似物的代谢产物进行初步的识别，对于与内源性物质相同的代谢产物，进行衍生化反应，然后再使用高效液相联用放射性同位素/高分辨质谱进行分析，可以此结果用于验证核苷类似物的代谢产物，排除内源性物质的干扰，有效提高核苷类似物生物转化研究的效率及准确性。性。性。
技术研发人员：郭莲 周小菊
受保护的技术使用者：南京美新诺医药科技有限公司
技术研发日：2021.12.14
技术公布日：2022/4/12