一种适用于底栖动物组织扫描电镜制片的装置的制作方法

1.本实用新型涉及一种扫描电镜的样品制备技术，更具体地说，它涉及一种适用于底栖动物组织扫描电镜制片的装置。


背景技术：

2.底栖动物是海洋生态系统的重要类群，其多样性是海洋环境监测、保护、生态修复以及全球气候及环境变化的重要指标和研究对象。海洋底栖动物的形态鉴定是认识其多样性的关键步骤，常用的形态鉴定主要涉及光学显微镜观察、扫描电镜观察、组织解剖等手段。其中，对生物体特定组织器官以及大型/小型底栖动物的高分辨率观察严重依赖扫描电镜。采用扫描电镜对海洋底栖动物进行形态鉴定时需要先制片，涉及的主要步骤包括干燥、固定、喷金。常用的干燥方法需要使用到甲醛、锇酸，锇酸是剧毒物品，属于公安部门管制药品，购置手续复杂。常用的干燥方法还包括临界点干燥、冷冻干燥、真空干燥等。临界点干燥和冷冻干燥需要专用的设备。此外，临界点干燥耗时长，样品可能会混入金属锈、油以及其它杂质，干燥后样品很脆；冷冻干燥则可能冻伤样品。这些缺陷对于表面脆弱的海洋底栖无脊椎动物的鉴定形成了广泛限制。样品在整个干燥过程中，需要在不同的溶液中进行转移，转移操作一般采用镊子夹取样品，这种操作方式容易对样品造成损伤，转移次数越多，样品被物理损伤的可能性越高；而且对很多肉眼不易观察的样品，会导致样品的丢失。


技术实现要素：

3.为了克服上述不足，本实用新型提供了一种适用于底栖动物组织扫描电镜制片的装置，样品转移过程不会被触碰到而出现损伤现象，样品转移过程不会丢失，操作方便。
4.为了解决上述技术问题，本实用新型采用以下技术方案：一种适用于底栖动物组织扫描电镜制片的装置，包括固定座、活动筒，底座上设有安装槽，活动筒上下贯通，活动筒下端可拆卸连接有支撑筛绢，活动筒下部插装在安装槽中，支撑筛绢和安装槽底部之间设有间距。
5.采用本技术的装置进行制片时包括以下步骤：s1，将用福尔马林固定好的底栖动物组织样品用一系列梯度浓度乙醇逐步脱水，采用体积比分别为25%，50%，75%，100%的乙醇溶液依次对样品进行浸泡，每个浓度乙醇浸泡10
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30分钟；s2，脱水完成后，将样品再经过一系列预先配制好的梯度浓度的乙醇：六甲基二硅氮烷混合溶液浸泡；乙醇：六甲基二硅氮烷体积比分别为25%，50%， 75%， 100%，每个浓度的混合溶液浸泡10
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30分钟；s3，样品在100%的六甲基二硅氮烷试剂中重复浸泡一次；s4，拆下支撑筛绢，样品置于支撑筛绢上通风干燥；s5，干燥结束后将样品连同支撑筛绢一起转移至粘有导电胶的载物台，喷金后即完成扫描电镜样品的制片；步骤s1、s2、s3对样品浸泡操作时，先将样品置于支撑筛绢上，然后将活动筒插装到固定座上的安装槽内，向活动筒内倒入浸泡用的液体，液体浸没样品，到达浸泡时间后将活动筒向上拔出，倒掉安装槽内的液体。在整个过程中都不会触碰到样品，样品实现了无损转移，而且样品和支撑筛绢一起转移，不会丢失，整个过程操作方便。
6.作为优选，活动筒外壁上设有定位凹槽，支撑筛绢外边缘向上翻起形成定位套，定位套贴合在活动筒外壁上，定外套外壁上套装弹性圈，弹性圈置于定位凹槽中。支撑筛绢与活动筒连接可靠，拆装方便。
7.作为优选，活动筒外壁上设有定位凸环，固定座上端设有若干支杆，定位凸环支撑在支杆上。定位凸环便于活动筒插装到安装槽后的定位，防止支撑筛绢触碰到安装槽底部。
8.作为优选，固定座和活动筒均呈透明状。透明的固定座和活动筒便于观察样品现状以及样品是否被完全浸没。
9.作为优选，安装槽内支撑筛绢下方安装下蠕动机构，下蠕动机构包括安装环、螺旋管、转轴、传动拉绳，传动拉绳上设有若干间隔设置的拉珠，螺旋管上设有避让槽，转轴上设有传动柱，传动拉绳从螺旋管一端穿入并从螺旋管另一端穿出，传动拉绳绕过传动柱，传动柱转动可带动传动拉绳移动，传动拉绳上连接若干间隔设置的蠕动头，蠕动头穿出避让槽，蠕动头顶在支撑筛绢下表面上使该位置的支撑筛绢向上凸起。
10.样品浸没时，会与支撑筛绢贴合，而样品的贴合面浸没效果不佳，导致样品各个位置浸泡不均匀。此时下蠕动机构工作，传动柱和转轴一起转动，从而带动传动拉绳移动，使连接在传动拉绳上的蠕动头沿螺旋管的螺旋方向蠕动，蠕动头顶在支撑筛绢下表面上使该位置的支撑筛绢向上凸起，从而使支撑筛绢上的样品能够浮动，防止样品始终贴合在支撑筛绢上，从而提高样品的浸泡效果。
11.作为优选，蠕动头上设有连接杆，连接杆连接在拉珠上，连接杆贯穿避让槽。避让槽方便了连接杆的通过。
12.作为优选，传动柱外壁上设有若干弧形凹槽，拉珠可贴合到弧形凹槽内。弧形凹槽便于传动柱拉动传动拉绳移动。
13.作为优选，螺旋管两端均设有倾斜设置的导向段，导向段呈弧形，导向段开口端朝向传动柱设置。导向段便于传动拉绳的进出。
14.与现有技术相比，本实用新型的有益效果是：（1）样品转移过程不会被触碰到而出现损伤现象，样品转移过程不会丢失，操作方便；（2）样品浸泡效果好，浸泡均匀。
附图说明
15.图1是本实用新型的实施例1的结构示意图；
16.图2是本实用新型的实施例2的结构示意图；
17.图3是本实用新型的实施例2的局部放大示意图；
18.图4是本实用新型的实施例2的螺旋管的结构示意图；
19.图中：1、固定座，2、活动筒，3、安装槽，4、支撑筛绢，5、定位凹槽，6、弹性圈，7、定位凸环，8、支杆，9、样品，10、安装环，11、螺旋管，12、转轴，13、传动拉绳，14、拉珠，15、避让槽，16、传动柱，17、蠕动头，18、定位筒，19、限位筛绢，20、环形凸缘，21、连接杆，22、弧形凹槽，23、导向段，24、通液管，25、通气孔，26、冒气孔。
具体实施方式
20.下面通过具体实施例，并结合附图，对本实用新型的技术方案作进一步的具体描述：
21.实施例1：一种适用于底栖动物组织扫描电镜制片的装置（参见附图1），包括固定座1、活动筒2，底座上设有安装槽3，活动筒上下贯通，活动筒下端可拆卸连接有支撑筛绢4，活动筒下部插装在安装槽中，支撑筛绢和安装槽底部之间设有间距。活动筒外壁上设有定位凹槽5，支撑筛绢外边缘向上翻起形成定位套，定位套贴合在活动筒外壁上，定外套外壁上套装弹性圈6，弹性圈置于定位凹槽中。活动筒外壁上设有定位凸环7，固定座上端设有若干支杆8，定位凸环支撑在支杆上。定位凸环置于定位凹槽上方，定位凹槽高于固定座的上端面。固定座和活动筒均呈透明状。
22.利用适用于底栖动物组织扫描电镜制片的装置进行制片时，包括以下步骤：s1，将用福尔马林固定好的底栖动物组织样品9用一系列梯度浓度乙醇逐步脱水，采用体积比分别为25%，50%，75%，100%的乙醇溶液依次对样品进行浸泡，每个浓度乙醇浸泡10
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30分钟；s2，脱水完成后，将样品再经过一系列预先配制好的梯度浓度的乙醇：六甲基二硅氮烷混合溶液浸泡；乙醇：六甲基二硅氮烷体积比分别为25%，50%， 75%， 100%，每个浓度的混合溶液浸泡10
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30分钟；s3，样品在100%的六甲基二硅氮烷试剂中重复浸泡一次；s4，拆下支撑筛绢，样品置于支撑筛绢上通风干燥；s5，干燥结束后将样品连同支撑筛绢一起转移至粘有导电胶的载物台，喷金后即完成扫描电镜样品的制片；步骤s1、s2、s3对样品浸泡操作时，先将样品置于支撑筛绢上，在安装槽内倒入浸泡用的液体，然后将活动筒插装到固定座上的安装槽内，液体浸没样品，到达浸泡时间后将活动筒向上拔出，倒掉安装槽内的液体。
23.本实用新型方便实验人员利用简易的装置、无毒试剂、简便的流程制备底栖动物扫描电镜样品，极大的方便了底栖动物的鉴定，从而为海洋生物多样性、海洋环境监测等提供基础数据。
24.实施例2：一种适用于底栖动物组织扫描电镜制片的装置（参见附图2至附图4），其结构与实施例1相似，主要不同点在于本实施例中安装槽内支撑筛绢下方安装下蠕动机构，下蠕动机构包括安装环10、螺旋管11、转轴12、传动拉绳13，转轴、螺旋管均安装在安装环上，传动拉绳上设有若干间隔设置的拉珠14，螺旋管上设有避让槽15，转轴上设有传动柱16，传动拉绳从螺旋管一端穿入并从螺旋管另一端穿出，传动拉绳绕过传动柱，传动柱转动可带动传动拉绳移动，传动拉绳上连接若干间隔设置的蠕动头17，蠕动头穿出避让槽，蠕动头顶在支撑筛绢下表面上使该位置的支撑筛绢向上凸起。
25.活动筒内安装定位筒18，定位筒下端安装限位筛绢19，定位筒下部限位筛绢上方安装上蠕动机构，上蠕动机构包括安装环、螺旋管、转轴、传动拉绳，转轴、螺旋管均安装在定位筒内壁上，传动拉绳上设有若干间隔设置的拉珠，螺旋管上设有避让槽，转轴上设有传动柱，传动拉绳从螺旋管一端穿入并从螺旋管另一端穿出，传动拉绳绕过传动柱，传动柱转动可带动传动拉绳移动，传动拉绳上连接若干间隔设置的蠕动头，蠕动头穿出避让槽，蠕动头顶在限位筛绢上表面上使该位置的限位筛绢向下凸起。定位筒上端设有向外凸出的环形凸缘20，环形凸缘支撑在活动筒上端。
26.蠕动头上设有连接杆21，连接杆连接在拉珠上，连接杆贯穿避让槽。传动柱外壁上设有若干弧形凹槽22，拉珠可贴合到弧形凹槽内。螺旋管两端均设有倾斜设置的导向段23，导向段呈弧形，导向段开口端朝向传动柱设置，导向段的开口端呈喇叭状结构。转轴由电机带动转动，蠕动头呈中空球状结构，传动拉绳拉紧设置，防止与传动柱脱离。安装槽底部设置通液孔，通液孔连接通液管24，通液管上连接阀门，安装槽内的浸泡液体通过通液管送入
和排出。安装槽底部安装通气孔25和若干个开口朝上设置的冒气孔26，冒气孔均与通气孔连通，通气孔连接通气管，冒气孔内安装单向进气阀，冒气孔向安装槽内通气有利于样品浮动，从而提高浸泡效果。其它结构与实施例1相同。
27.利用适用于底栖动物组织扫描电镜制片的装置进行制片时，将安装环安装到安装槽底部，然后通过通液管送入用于浸泡样品的浸泡液体，再将装有样品的活动筒插装到安装槽中，活动筒内插入定位筒，定位筒下端的限位筛绢浸没在浸泡液体中。样品浸泡时，通过通气孔向安装槽内通气，使浸泡液体内产生气泡，使样品能够在支撑筛绢和限位筛绢之间浮动，同时下蠕动机构和上蠕动机构工作，使支撑筛绢和限位筛绢产生蠕动的效果，防止样品与支撑筛绢或限位筛绢贴合。浸泡完成后，通气孔停止通气，下蠕动机构和上蠕动机构停止工作，通过通液管排出安装槽内的浸泡液体。
28.以上所述的实施例只是本实用新型较佳的方案，并非对本实用新型作任何形式上的限制，在不超出权利要求所记载的技术方案的前提下还有其它的变体及改型。