计数板及其底片的制作方法

1.本实用新型涉及生物学显微镜检技术领域，特别是涉及一种计数板及其底片。


背景技术：

2.计数板是一种常见的生物学工具，在医疗器械中常用以对人体内红、白细胞等多种有形成分进行显微计数，也常用于计算一些细菌、真菌、酵母菌等微生物的数量。
3.传统的计数板需要配套仪器额外增加染色液及其它化学试剂管路，仪器结构更加复杂，并且由于染色液等化学试剂会腐蚀相关管路及泵阀器件，使得故障率居高不下，从而最终不仅大大增加了仪器的制作成本，也极大的降低了客户使用满意度，增加了售后维护成本。同时，染色液也极其容易因为操作人员的失误操作而泄露并污染计数板。


技术实现要素：

4.基于此，有必要针对现有技术中计数板不易进行预染色且染色液易泄露污染计数板的问题，提供一种改善上述缺陷的计数板及其底片。
5.一种底片，包括底片本体及反应块，所述底片本体具有作为其一侧表面的操作面，所述操作面具有反应区和光学观察区，所述反应块设置于所述反应区，所述反应区用于收容能够与所述反应块发生预反应的样品，所述光学观察区用于收容待进行光学观察的样品。
6.在其中一个实施例中，所述反应区内陷形成预反应池，所述反应块容置于所述预反应池内。
7.在其中一个实施例中，所述反应块固化粘接于所述预反应池的底壁。
8.在其中一个实施例中，所述预反应池的数量为两个或两个以上，每一所述预反应池内均设置有所述反应块。
9.在其中一个实施例中，所述操作面还具有位于所述光学观察区与所述反应区之间的阻隔部。
10.在其中一个实施例中，所述操作面上设有注液孔，所述注液孔与所述光学观察区连通。
11.在其中一个实施例中，所述操作面还具有用于与盖片贴合的盖片贴合面，所述盖片贴合面位于所述光学观察区的相对两侧。
12.在其中一个实施例中，所述操作面还具有隔离槽，所述隔离槽位于所述盖片贴合面与所述光学观察区之间。
13.在其中一个实施例中，所述底片本体具有与所述操作面相背的背面，所述背面上设有用于支撑所述底片本体的足部。
14.一种计数板，包括盖片及前述任一实施例中所述的底片，所述盖片盖设于所述光学观察区。
15.上述计数板及其底片，操作面上设置有光学观察区与反应区，反应区设置有反应
块，从而在使用时可直接将待测样品注入反应区，使得样品与反应块发生预反应，从而实现对样品的染色。染色完成后将染色后的样品注入至光学观察区，以进行光学观察，进而进行细胞计数。与现有技术相比，无需加注液态的染色剂与样品进行预反应，从而避免了需要采用管路及泵阀器件输送液态染色剂，避免了由于液态染色剂的泄露而污染计数板，并且简化了检测仪器，降低了故障率，降低了仪器的制作和维护成本。
附图说明
16.图1为本实用新型一实施例中计数板的结构示意图；
17.图2为图1所示的计数板的底片的结构示意图。
具体实施方式
18.为使本实用新型的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本实用新型的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本实用新型。但是本实用新型能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本实用新型内涵的情况下做类似改进，因此本实用新型不受下面公开的具体实施例的限制。
19.在本实用新型的描述中，需要理解的是，术语“中心”、“纵向”、“横向”、“长度”、“宽度”、“厚度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”、“顺时针”、“逆时针”、“轴向”、“径向”、“周向”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。
20.此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。在本实用新型的描述中，“多个”的含义是至少两个，例如两个，三个等，除非另有明确具体的限定。
21.在本实用新型中，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”、“固定”等术语应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或成一体；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通或两个元件的相互作用关系，除非另有明确的限定。对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本实用新型中的具体含义。
22.在本实用新型中，除非另有明确的规定和限定，第一特征在第二特征“上”或“下”可以是第一和第二特征直接接触，或第一和第二特征通过中间媒介间接接触。而且，第一特征在第二特征“之上”、“上方”和“上面”可是第一特征在第二特征正上方或斜上方，或仅仅表示第一特征水平高度高于第二特征。第一特征在第二特征“之下”、“下方”和“下面”可以是第一特征在第二特征正下方或斜下方，或仅仅表示第一特征水平高度小于第二特征。
23.需要说明的是，当元件被称为“固定于”或“设置于”另一个元件，它可以直接在另一个元件上或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。本文所使用的术语“垂直的”、“水平
的”、“上”、“下”、“左”、“右”以及类似的表述只是为了说明的目的，并不表示是唯一的实施方式。
24.请参阅图1及图2，图1示出了本实用新型一实施例中的计数板的结构示意图，图2示出了图1所示的计数板10的底片100的结构示意图。为便于描述，附图仅示出了与本实用新型相关的结构。
25.本实用新型一实施例提供了一种计数板10，该计数板10包括底片100及盖片200。该底片100包括底片本体110及反应块120。底片本体110具有作为其一侧表面的操作面111，操作面111具有反应区112和光学观察区113。反应块120设置于反应区112，反应区112用于收容能够与反应块120发生预反应的样品。光学观察区113用于收容待进行光学观察的样品，盖片200盖设于该光学观察区113。
26.需要说明的是，上述预反应可包括染色反应，但不仅限于此，还可包括其它可能的预处理反应。同理，上述反应块120可包括用于与样品发生染色反应(即对样品进行染色)的染色物，还可包括用于其它可能的预处理反应的反应物质。以下将以染色反应为例描述计数板10，即上述反应块120在以下实施例中示例性地用作与样品发生染色反应。
27.上述计数板10及其底片100，操作面111上设置有光学观察区113与反应区112，反应区112设置有反应块120，从而在使用时可直接将待测样品注入反应区112，使得样品与反应块120发生预反应，从而实现对样品的染色。染色完成后将染色后的样品注入至光学观察区113，以进行光学观察，进而进行细胞计数。与现有技术相比，无需加注液态的染色剂与样品进行预反应，从而避免了需要采用管路及泵阀器件输送液态染色剂，避免了由于液态染色剂的泄露而污染计数板，并且简化了检测仪器，降低了故障率，降低了仪器的制作和维护成本。
28.需要说明的是，本实用新型中将反应块120预置于反应区112，从而可在反应区域直接进行对待测样品的染色，且无需使用额外的染色器皿，简化了操作流程，节约了检测成本。
29.还需要说明的是，在常规计数板对待测样品染色的过程中，待测样品首先需要在单独的容器中与染色试剂反应并混匀，再通过吸样针对混匀后的待测样本进行转移并滴于计数板上，最后才能进行细胞计数。在此期间，该单独的容器容易受到污染，且使用一次性容器的成本较大。同时，在吸样针对样本转移的过程中，样本也容易滴落，对计数板造成污染。使用本实用新型的带有反应区112的且反应区112中设有反应块120的计数板10，大大减小了样本转移期间样本滴落造成污染的风险，也大大节省了细胞计数操作的成本。
30.还需要说明的是，将待测样品注入至反应区112后，可利用吸样针对反应区112中的样品进行反复多次抽吸，以使样品与反应块120充分反应，并达到混匀的目的，确保染色效果。
31.具体到实施例中，底片100的底片本体110大致呈矩形的板状，以方便操作人员拿起和放置。底片100的底片本体110设计成矩形板状也有利于在其上设置更多的元件，比如下述预反应池1121、注液孔114等，以方便操作人员使用。
32.具体到实施例中，底片主体110的材料优选为塑料。塑料不易与待测样品发生反应，也不易与反应区112的反应块120发生反应有利于确保每次细胞计数的正确率。同时，塑料坚固耐用且易于清洁，在发生意外摔落时，塑料制成的计数板10的底片100的底片本体
110不易发生碎裂，保障了操作人员的安全性，同时易于在操作后清洁。在优选实施例中，计数板10的底片100的底片本体110由透明塑料制成。
33.具体到实施例中，反应区112内陷形成预反应池1121。可选地，预反应池1121与光学观察区113位于底片本体110的操作面111的相对两端，以防止未完全混匀的待测样品意外地溅出至光学观察区113而造成污染，影响细胞计数结果。可以理解的是，该预反应池1121不与底片本体110上的光学观察区113连通，以防止待测样品的不期望的自主流动至光学观察区113，保证了细胞计数结果的准确。
34.进一步地，该预反应池1121的形状可以是倒置截头三棱锥、倒置截头四棱锥或者其它形状，只要能够容置反应块120和样品即可，在此不作限定。在一较佳的实施例中，该预反应池1121的形状也可以是倒置截头圆锥，换言之，内陷形成的预反应池1121的径向尺寸由开口处至与开口相对的底部逐渐减小。这种上大下小的设置保证了溅到预反应池1121壁的样品液可以在重力作用下随着池壁流入池底，这在很大程度上减小了待测样品的浪费。同时，这种设计的预反应池1121的开口相对开阔，使得即使在摇晃的工况下预反应池1121中的液体也只会溅到池壁上而不易泄露出来，这易于操作，且保证了待测样品的安全。
35.具体到实施例中，在底片本体110的操作面111上设置有两个或两个以上的预反应池1121，每个预反应池1121内均设置有反应块120。如此，可将待测样品注入至其中一个预反应池1121中并与反应块120反应并混匀，再利用吸样针转移到另一预反应池1121以与另一预反应池1121中的反应块120反应并混匀，从而实现多次染色和混匀。当然，在另一实施例中，底片本体110的操作面111上也可以仅具有一个预反应池1121，即仅进行一次染色，在此不作限定。
36.需要说明的是，在预反应池1121的底部预设有反应块120。该反应块120在计数板10移动时相对于底片本体110位置保持不变。反应块120可为固态反应块，其也可为凝胶状反应块，当然也可以是其它状态，只要反应块120相对于底片本体110不能流动即可。相对于常规液态形式的染色试剂，本实用新型中采用的反应块120具有很多优势。一方面，在添加液态染色试剂的过程中，可能发生溅出或者泄露。然而采用反应块120预设在预反应池1121内，则可以避免液态染色试剂的溅出或泄露。另一方面，在预反应池1121中同时加入液态染色剂和液态的样品容易导致加入的液体体积过大，这样会更容易造成液态染色剂和样品的溅出或泄露。然而将反应块120预设在预反应池1121中，待测样品滴入到反应块120上时，预反应池1121中液体的体积相较于采用液态染色剂会显著减小。这进一步保障了计数板不被污染和细胞计数的准确性。
37.具体到实施例中，该反应块120包括固态形式的结晶紫或亚甲基蓝，该反应块120还包括酒精、缓冲剂、表面活性剂以及促染剂等。其中，结晶紫或亚甲基蓝作为染色成分给待测样品染色；其次，酒精、促染剂以及表面活性剂可促进预反应的进行，以提升染色效果；最后，缓冲剂用于调节待测样品与染色成分混匀后的ph值，以到达较好的染色效果。
38.具体到实施例中，该反应块120固定在预反应池1121底部。固定方式可以是固化粘接在预反应池1121的底部。也就是说，在染色剂原料中加入糖分等具有黏性的物质，然后在烘干固化形成反应块120的同时，利用糖分的黏性将反应块120粘接在预反应池1121的底部。需要说明的是，在其它实施例中，反应块120也可使用其它的固定方式固定在预反应池1121的底部，以在计数板10移动时反应块120相对于底片本体110位置保持不变，例如采用
粘结剂粘接、卡接等。
39.由于反应区112内陷形成预反应池1121，底片本体110的与操作面111相背的背面(即不设有反应区112的面)可能并不平坦，这可能导致计数板无法稳定放置。为了解决该问题，在一实施例中，计数板底片100的底片本体110的背面设有多个足部，利用该多个足部对底片本体110进行支撑。由于设置了足部，预反应池1121的深度可适当加深，同时也不会影响计数板10的稳定性。更深的预反应池1121可进一步保证预反应池1121中待测样品的安全，进一步防止了预反应池1121内液体的溅出，保障了细胞计数的准确率。相应地，预反应池1121的上端开口也可相应扩大，以保证吸样针可以准确地伸入预反应池1121中。
40.具体到实施例中，在底片本体110的操作面111上设有光学观察区113，光学观察区113与反应区112之间设有阻隔部。优选地，光学观察区113与反应区112之间的阻隔部将光学观察区113与反应区112间隔开并使其不连通，以防止预反应池1121中的待测样品意外溅出到光学观察区113，影响细胞计数的准确性。光学观察区113用于承载混匀后的待测样品，以供操作人员进行细胞计数。光学观察区113与反应区112并不连通，这防止了待测样品在未与反应块120反应完成并混匀前就流到光学观察区113上，保证了细胞计数结果的准确。
41.具体到实施例中，光学观察区113为透明区域，以供操作人员对光学观察区113内的样品进行光学观察，并进行细胞计数。可以理解的是，制造光学观察区113的材料不存在杂质或仅存在极少量的杂质，以保证细胞计数的准确性。优选地，光学观察区113与底片本体110一体成型制造。光学观察区113可与底片本体110的其它区域一同使用透明材料制造。当然在另一些实施例中，也可仅光学观察区113采用透明材料制成，并将透明的光学观察区113嵌设在底片本体110上。如此，仅光学观察区113被制成透明区域，这最大程度地减小了底片本体110上的其它区域对细胞计数的影响。
42.具体到实施例中，在光学观察区113内，可设有计数参考格(未示出)。在滴入待测样品后，在显微镜下，计数参考格可给予操作人员计数的开始点和终点，防止操作人员在细胞计数期间重复计数。此外，计数参考格也可提高操作人员的计数效率。在显微镜下，操作人员仅需对一个或若干个计数参考格内的细胞进行计数，然后根据光学观察区113内计数参考格的数量得出光学观察区113内待测样品的细胞数量。这种设置有益于提高操作人员细胞计数的准确度，也有益于提高操作人员细胞计数的效率。
43.本实用新型的一实施例中，在底片本体110的操作面111上还设有注液孔114，该注液孔114与光学观察区113连通。优选地，底片本体110的操作面111内陷形成注液孔114，并且注液孔114与光学观察区113连通，操作人员只需将待测样品从预反应池1121吸出并滴于该注液孔114中，待测样品会浸润至光学观察区113上。因为设有注液孔114，操作人员并不需将待测样品直接滴于光学观察区113上，防止了样品飞溅污染计数板造成细胞计数不准确。
44.进一步地，注液孔114至少部分位于盖片200的覆盖范围之外，从而可在盖片200盖设于光学观察区113的情况下直接向注液孔114加注样品，方便快捷。
45.进一步地，该注液孔114设于反应区112与光学观察区113之间，以方便操作人员从反应区112吸取待测样品并直接滴于该注液孔114中，移动距离较短，使得待测样品不易从吸样针中滴落或溅出从而污染计数板造成细胞计数不准确。优选地，底片本体110的操作面111上还开设有与光学观察区113连通的通气通道(未示出)。在待测样品从注液孔114浸润
到光学观察区113的过程中，气泡可顺利从通气通道排出，以保障计数板的浸润效果和细胞计数的准确性。
46.在本实用新型的一个实施例中，操作面111还具有用于与盖片200贴合的盖片贴合面115，该盖片贴合面115位于光学观察区的相对两侧。盖片贴合面115的数量可为两个或两个以上。优选地，盖片贴合面115的数量为两个。盖片贴合面115相对底片本体110的操作面111略微突起，以保障待测样品可从注液孔114浸润至光学观察区113。盖片贴合面115可制成为透明区域，或非透明区域。
47.优选地，盖片贴合面115制成为非透明区域。在进行细胞计数时，将盖片贴合面115制成为透明区域会造成光进入盖片贴合面115并折射至光学观察区113。此时，光学观察区113的观察效果会不理想。而将盖片贴合面115制成为非透明区域保证了在贴合盖片200后，胶水或其它粘合介质不会对光学观察区113产生影响，造成细胞计数不准确。
48.具体到实施例中，在盖片贴合面115中，沿着盖片贴合面115的长度方向，设有细长的胶水溢流通道。在胶水溢流通道的中间位置设有胶水施加开口。在每个盖片贴合面115中，胶水溢流通道的数量可为一个或多个。优选地，可具有两个或以上胶水溢流通道，以保证粘合介质的均匀分布及粘合效果。在每个盖片贴合面115中，胶水施加开口的数量同样也可为一个或多个。
49.优选地，盖片贴合面115可具有两个或以上的胶水施加开口，以保证粘合介质的均匀分布及粘合效果。
50.可选地，胶水施加开口的形状可为圆形、矩形、三角形等。具体到一个实施例中，胶水施加开口的形状设置为圆形，以方便工业制造。多个盖片贴合面115中的胶水溢流通道和胶水施加开口的大小和深度完全一致，以保证在每个胶水施加开口中可施加等量的粘合介质。同时，在粘合介质溢流到胶水溢流通道后，各处的粘合介质量保持一致。这也保证了在盖片200与底片100贴合后盖片200的平整。
51.在另一实施例中，盖片贴合面115上可设置固体粘合介质，利用该固体粘合介质可直接将盖片200粘合至盖片贴合面115上，且无需施加额外的胶水。
52.具体到实施例中，每一盖片贴合面115与光学观察区113之间设置有隔离槽116，以将盖片贴合面115与光学观察区113间隔开来，因此盖片贴合面115与光学观察区113之间不会连通。隔离槽116的数量与盖片贴合面115的数量一致。隔离槽116的设置保证了盖片贴合面115与光学观察区113之间不联通。这样的设置保证了盖片贴合面115中的粘合介质不会溢流到光学观察区113中，对光学观察区113造成污染，进而对细胞计数结果造成影响。
53.下面结合图1和图2将具体阐述本实用新型的计数板10的使用方式。
54.首先，操作人员将液态待测样品滴入预反应池1121中。并且，使用吸样针对预反应池1121中的液体进行若干次吸吐，这可以促进反应块120与待测样品的充分反应并混匀。
55.在混匀后，通过吸样针吸取预反应池1121中的样品，并滴于注液孔114，使得样品由注液孔114浸润至被盖片200盖合的光学观察区113内。
56.然后，将计数板整体移至显微镜下即可对光学观察区113内的样品进行光学观察，进而进行细胞计数。
57.以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存
在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
58.以上所述实施例仅表达了本实用新型的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对实用新型专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本实用新型的保护范围。因此，本实用新型专利的保护范围应以所附权利要求为准。