一种近红外在线监控银杏叶提取过程中总黄酮醇苷含量变化的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药分离纯化的技术领域，具体地，涉及一种近红外在线监控银杏叶 提取过程中总黄酮醇苷含量变化的方法。
【背景技术】
[0002] 在中药制药过程中，提取过程作为中药生产的特色环节之一，决定着中药中不同 成分在成品中的比例，即决定着药品疗效。目前，我国中药提取过程的质量控制仍十分被 动，只对终端产品进行质检，很少考虑工艺过程中的成分变化，生产工艺很难得到精确控 制，从而导致中药产品批次间质量差异较大，这也是中药难以现代化、国际化的主要原因之 一。因此，发展形成从中药制药源头一一提取工艺过程解决产品稳定性和可靠性问题的快 速分析方法，对于中药工业技术进步和产品质量升级具有重大现实意义。
[0003] 银杏叶具有益心、活血止痛、敛肺平喘之功效，是一种常用中药。总黄酮苷作为银 杏叶中的主要成分，具有显著的药理、药效作用，因此，在银杏叶生产加工各工艺环节过程 中常被用来作为质控指标。传统的分析方法，如高效液相色谱法、紫外分光光度法等，常需 对所取样品进行繁杂的预处理，耗费大量的试剂，并且信息反馈滞后，无法满足生产过程中 即时分析的需要。
[0004] 近红外光谱（near-infraredspectroscopy,NIRS)分析技术是上世纪90年代发 展起来的一项现代分析技术。它综合运用了计算机技术、光谱技术和化学计量等多个学科 的最新研宄成果，以其独特的高效、快速、成本低、环保等突出优点，在农业、食品、石油化工 和制药工程等学科中得到了广泛应用。在化学制药领域，NIRS已被运用于原料药质量分 析、反应过程、制粒过程、混合过程、微波真空干燥过程、压片过程、包衣和包装过程，作为一 种极有前途的过程分析技术，其在中药生产领域也展现出了巨大的应用潜力。
【发明内容】
[0005] 本发明所要解决的技术问题是提供一种近红外在线监控银杏叶提取过程中总黄 酮醇苷含量变化的方法。本发明方法可以对银杏叶提取过程中的提取液进行实时取样，并 实时监测银杏叶提取液中的总黄酮醇苷含量变化；结果准确可靠。
[0006] 本发明解决上述技术问题所采用的技术方案是：一种近红外在线监控银杏叶提取 过程中总黄酮醇苷含量变化的方法，包括以下步骤：
[0007] (1)收集不同批次的银杏叶提取过程液作为校正样本集，对其进行近红外光谱扫 描，采集体现槲皮素、山奈素、异鼠李素特性的近红外光谱信息；其中，光谱采集条件为：扫 描范围12500?4000cm-l，分辨率8cm-l，扫描次数96次，每个样品测定2次，取平均光谱 用于近红外建模；
[0008] (2)运用高效液相色谱法分别测定所述银杏叶提取过程液中的槲皮素含量、山奈 素含量、异鼠李素含量；按下式换算成总黄酮醇苷的含量：
[0009] 总黄酮醇苷含量=(槲皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量）X2. 51 ;
[0010] (3)运用偏最小二乘法将所述步骤（2)高效液相色谱法测定的槲皮素含量、山奈 素含量、异鼠李素含量数据与所述步骤（1)得到的近红外光谱信息进行关联，建立起银杏 叶提取过程中槲皮素含量、山奈素含量、异鼠李素含量的多元定量校正模型；其中，用于构 建定量校正模型的近红外光谱波段为两个波段，包括12493. 2?7498. 2CHT1、以及6101? 5446. 2cmS
[0011] (4)利用所述步骤（3)建立的定量校正模型对未知银杏叶提取过程中的槲皮素含 量、山奈素含量、异鼠李素含量进行快速检测；按下式换算成总黄酮醇苷的含量：
[0012] 总黄酮醇苷含量=(槲皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量）X2. 51。
[0013] 所述银杏叶提取过程液包括银杏叶提取液和银杏叶解析液。
[0014] 所述步骤（2)中，所述高效液相色谱法分别测定所述银杏叶提取过程液中的槲 皮素含量、山奈素含量、异鼠李素含量的色谱条件为：色谱柱：WelchUltimateXB-C18， 4. 6*250mm，5ym;以甲醇-0. 4%磷酸溶液（50:50)为流动相；检测波长为360nm。
[0015] 本发明与现有技术相比，具有如下优点：
[0016] (1)本发明方法可以对银杏叶提取过程中的提取液进行实时取样，并实时监测银 杏叶提取液中的总黄酮醇苷含量变化；结果准确可靠。
[0017] (2)本发明结果表明，近红外光谱技术可以对银杏叶提取过程中总黄酮醇苷含量 进行有效检测。本发明具有方法简单、快速、准确性高等特点，相对于一般仪器检测方法，可 有效解决提取过程中总黄酮醇苷含量变化的监控问题，具有较强的实用价值，可推广运用 于中药生产过程。
[0018] (3)水分子所含的OH基，在近红外谱区的6900CHT1和5180CHT1附近有很强的倍 频与合频吸收谱带，而其它各种物质分子的倍频与合频吸收相对较弱，因此水溶液物质体 系中，水就成为近红外光谱分析时的强干扰因素。所以本发明在建模过程中避开水分的强 干扰吸收波段进行建模，通过RMSECV和R2作为评价指标，通过对不同光谱区间进行建模试 验，最终选定总黄酮苷的最佳建模波段为"12493. 2?7498.Zcm'eiOl?5446.2cm-1"，从 而避免了过多的冗余信息和干扰信息，改善模型性能，提高了计算速度。此时RMSECV最小， 相关系数R2接近1，总黄酮苷的吸收特性在近红外光谱中得到了很好地体现。
【附图说明】
[0019] 图1为12批银杏提取液近红外光谱图。
[0020] 图2为12批银杏解析液近红外光谱图。
[0021] 图3为12批银杏下柱液中段近红外光谱图。
[0022] 图4为12批银杏下柱液后段近红外光谱图。
[0023] 图5为混合对照品液相色谱图。
[0024] 图6为银杏提取液液相色谱图。
[0025] 图7为银杏下柱液中段液相色谱图。
[0026] 图8为银杏下柱液后段液相色谱图。
[0027] 图9为银杏解析液液相色谱图。
[0028] 图10为校正集样本中槲皮素NIR预测值与HPLC测定值之间的相关图。
[0029] 图11为校正集样本中山奈素NIR预测值与HPLC测定值之间的相关图。
[0030] 图12为校