一种妇清雪莲栓中东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素含量的测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药品领域，具体地说，设及一种妇清雪莲栓中=个有效成分的含量测 定方法。
【背景技术】
[0002] 妇清雪莲栓是我司自主研发的复方中药新药，治疗妇科阴道外炎症，由雪莲花、苦 参、蛇床子和地肤子四种中药组成，其中雪莲花是名贵的藏药材，其药性苦、寒，入肝、脾、肾 经，具有清热解毒、消肿止痛的功效，用于头部创伤、炭痘、热性刺痛、妇科病、类风湿性关节 炎、中风等症。其中东昔窘内醋和伞形花内醋是雪莲花中的有效成分。蛇床子是伞形科植物 蛇床的干燥成熟果实蛇床子，其药性辛、苦，温，有小毒，归肾经。具有燥湿枯风、杀虫止痒。 温肾壮阳的功效，用于阴痒带下、湿疹痊痒、湿搏腰痛、肾虚阳瘦、宫冷不孕等症。蛇床子中 蛇床子素是其有效成分之一。因此为了分析测试妇清雪莲栓中东昔窘内醋、伞形花内醋和 蛇床子素=种有效成分的含量，必须建立一种快速、准确的测定方法。
[0003] 目前，药材和制剂中的东昔窘内醋和伞形花内醋的含量测定方法已有文献报道， 也有文献报道用高效液相方法测定药材蛇床子、独活和中药制剂妇炎灵胶囊中蛇床子素的 含量，但同时测定中药制剂中该=种成分含量的方法尚未见报道。因此，有必要建立一种科 学的含量测定方法同时对妇清雪莲栓中的东昔窘内醋、伞形花内醋和蛇床子素=种有效成 分的含量进行测定，从而对妇清雪莲栓进行质量控制。（参考文献；[1]谭荣，王銃杰，张雨 欣，周礼仕，谭尔，阿萍，张艺.HPLC测定藏药凤毛菊中茵芋巧、东昔窘内醋和伞形花内醋的 含量[J].中国中药杂志，2014, 39(6) : 1054-1057.凹杨燕霞，白杨，刘西京，贾强.HPLC法 测定雪隆胶囊中东昔窘素和伞形花内醋的含量[J].广东药学院学报，2009, 25(1):37-39.
[3] 刘丽霞，赵挺，孙立新.HPLC法测定中药了哥王中伞形花内醋的含量.沈阳药科大学 学报.2010.27(7):563-566.[4]胡爽，郭晏华.册1(：法测定瑞香狼毒中香豆素类^种成分 含量[J].中成药，2011，33(3) : 530-533.[引吴蜀瑶，李敏，王佳黎.HPLC测定青富植株不 同部位的东昔窘内醋含量[J].中国现代中药.2010, 12化)，20-22. [6]苏薇薇，赵洁，林敬 明.高效液相色谱法测定水母雪莲中东昔窘内醋、伞形花内醋的含量[J].第一军医大学学 报，2005, 25(1) : 119-120. [7]陈艳平，霍明，陈艳明，吴启南.RP-HPLC测定蛇床子和妇炎灵 胶囊中蛇床子素的含量[J].中成药，2003, 25(3) : 196-198. [6]徐W亮，徐海波.HPLC测定 独活药材及配方颗粒中蛇床子素的含量[J].中成药，2005, 27(1): 105-106.)
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种妇清雪莲栓中=个有效成分的含 量测定方法，该方法利用高效液相色谱法同时测定了妇清雪莲栓中的东昔窘内醋、伞形花 内醋和蛇床子素=种有效成分的含量，为妇清雪莲栓提供了含量测定方法的技术支持，保 证了妇清雪莲栓含量测定方法的科学性和先进性。
[0005] 为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
[0006] 一种妇清雪莲栓的质量检测方法，包括如下步骤：
[0007] (1)供试品溶液的制备：
[000引 W妇清雪莲栓为原料，取妇清雪莲栓10粒，置水浴60°c加热烙化，放冷。取约 1. 5g，剪碎，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别加甲醇15ml、15ml、15ml，超声处理3次，每次 20分钟，滤过，合并滤液至50ml量瓶中，并加甲醇至刻度，摇匀，即为供试品溶液；
[0009] (2)东昔窘内醋、伞形花内醋和蛇床子素S种成分含量测定：
[0010] 高效液相色谱实验条件如下；Ci8色谱柱；250mmX4. 6mm，5ym;柱温；40°C ;流 动相系统I 己膳为流动相A，W水为流动相B;洗脱梯度；0-17min;10%-60%A; 17-18min ;60% -80% A ;18-24min ;80% A ;24-30min ;80% -95% A ;30-32min ;95% -10% A ;32-42min ;10% A。洗脱时间；42min ;流动相系统II ; W己膳为流动相A, W 0. 1%冰醋酸 水为流动相 B ;洗脱梯度；0-5min ;15% -32% A ;5-20min ;32% A ;20-21min ;32% -75% A ; 21-40min ;75% -90% A ;40-45min ;90% -95% A。洗脱时间；45min ;紫外检测器检测波长； 346nm ;流速；0. 8-1. 2ml/min ;柱温；35-40°C ;样品进样量；10 y 1 ;
[0011] 东昔窘内醋、伞形花内醋和蛇床子素成分含量测定方法如下：取东昔窘内醋对照 品，制成每 1ml 分别含 0. 26mg、0. 156mg、0. 104mg、0. 052mg、0. 026mg、0. 013mg、0. 0104mg、 0. 0052mg的对照品溶液；取伞形花内醋对照品，制成每1ml分别含0. 25mg、0. 15mg、0. lOmg、 0. 05mg、0. 025mg、0. 0125mg、0. 01mg、0. 005mg的对照品溶液；取蛇床子素对照品，制成每 1ml 分别含 3. 65mg、2. 19mg、l. 46mg、0. 73mg、0. 365mg、0. 1825mg、0. 146mg、0. 073mg 的对照 品溶液。
[0012] 高效液相色谱测定；不同浓度的对照品溶液分别W 10 y 1进样，测得各标准品溶 液的高效液相色谱峰面积；W所得各标准对照品峰面积为纵坐标，各对应标准对照品浓度 为横坐标分别做标准曲线，分别计算得线性回归方程；然后对3批供试品溶液进行高效液 相色谱测定，得到东昔窘内醋、伞形花内醋和蛇床子素色谱峰的峰面积，根据标准曲线计算 供试品中东昔窘内醋、伞形花内醋和蛇床子素的含量，并结合供试品的质量，经计算得到东 昔窘内醋的含量为0. 569mg/g?0. 592mg/g，伞形花内醋的含量为1. 034mg/g?1. 068mg/ g，蛇床子素的含量为8. 65mg/g?8. 89mg/g。
[0013] 在上述含量测定方法中，所述步骤（2)的色谱条件中流动相系统II 己膳为流 动相A，W 0. 1%冰醋酸水为流动相B ;洗脱梯度；0-5min ;15% -32% A ;5-20min ;32% A ; 20-21min ;32 % -75 % A ;21-40min ;75 % -90 % A ;40-45min ;90 % -95 % A。洗脱时间； 45min ;
[0014] 在上述含量测定方法中所述高效液相色谱测定法步骤的色谱条件中流速为 1. Oml/min。
[0015] 在上述含量测定方法中，所述步骤（2)的色谱条件中色谱柱温为40°C。
[0016] 在上述含量测定方法中，所述步骤（1)中超声处理的功率为360W，频率为35曲Z。
[0017] 与现有技术相比，本发明具有如下有益效果；本发明利用高效液相色谱同时对妇 清雪莲栓中东昔窘内醋、伞形花内醋和蛇床子素=种有效成分的含量进行了测定，该检测 方法能准确的测定妇清雪莲栓中东昔窘内醋、伞形花内醋和蛇床子素的含量，可作为妇清 雪莲栓的质量检测方法，并为妇清雪莲栓的质量标准提供参考，方法简单，可操作性强，重 现性好，准确度高，是检测妇清雪莲栓中东昔窘内醋、伞形花内醋和蛇床子素含量的有效方 法。
【附图说明】
[001引图1是实施例6中供试品溶液与东昔窘内醋、伞形花内醋和蛇床子素标准对照品 的HPLC-UV图谱。1 ;东昔窘内醋；2 ;伞形花内醋；3 ;蛇床子素。
【具体实施方式】
[0019] 实施例1 ;
[0020] (1)供试品溶液的制备
[0021] W妇清雪莲栓为原料，取妇清雪莲栓10粒，置水浴60°c加热烙化，放冷。取约 1. 5g，剪碎，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别加甲醇15ml、15ml、15ml，超声处理（功率 360W，频率35曲Z) 3次，每次20分钟，滤过，合并滤液至50ml量瓶中，并加甲醇至刻度，摇 匀，即为供试品溶液；
[0022] (2)东昔窘内醋、伞形花内醋和蛇床子素成分含量测定
[002引高效液相色谱实验条件如下；Cl8色谱柱；250mmX4.6mm，5ym;流动相：W己膳 为流动相 A，W水为流动相 B ;洗脱梯度；0-17min ;10% -60% A ;17-18min ;60% -80% A ; 18-24min ;80% A ;24-30min ;80% -95% A ;30-32min ;95% -10% A ;32-42min ;10% A。洗 脱时间；42min ;紫外检测器检测波长；346皿；流速；1. Oml/min ;柱温；40°C ;样品进样量； lOy 1 ;
[0024] 东昔窘内醋、伞形花内醋和蛇床子素成分含量测定方法如下：取东昔窘内醋对照 品，制成每 1ml 分别含 0. 26mg、0. 156mg、0. 104mg、0. 052mg、0. 026mg、0. 013mg、0. 0104mg、 0. 0052mg的对照品溶液；取伞形花内醋对照品，制成每1ml分别含0. 25mg、0. 15mg、0. lOmg、 0. 05mg、