微量测量母乳的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种微量测量母乳的方法，以较小的量检测母乳成分，属于母乳检测 领域。
【背景技术】
[0002] 婴儿期是小儿生长发育最快的时期，需要摄入适量的营养素，才能保证正常的生 长发育，母乳含有新生儿生长发育所需的各种营养物质，适合新生儿胃肠功能的消化和吸 收，而且其质和量会不断变化，以适应婴儿的生长发育所需，但是母乳营养不够均衡，影响 婴儿发育。因此，有必要对婴儿的主要食物来源进行营养成分分析。
[0003] 现在很多医院妇幼保健院等需要母乳检测的机构还没有相应的技术，分析母乳中 的营养物质，特别是微量元素，为哺乳期妈妈补充营养提供依据，为婴儿更好的补充营养， 但目前有的母乳分析所需要的母乳量是5毫升到20毫升，母乳采用量大。
【发明内容】
[0004] 为解决上述技术问题，本发明微量测量母乳的方法利用物质对不同波长光的吸收 现象，对物质进行定性和定量分析，它符合朗伯一比耳定律；一种微量测量母乳的方法，包 括以下步骤，
[0005] 1)分光光度计仪器的定标；
[0006] 2)样品离心：
[0007] a)将300ul-800ul母乳样品放入离心管中，每个样品做2-3个离心管备用，
[0008] b)母乳样品需要在12000转至20000转的高速离心机上离心10-20分钟，
[0009] C)将离心后的离心管取出，不要倒立或摇动，以免使得样品出现混浊，
[0010] d)用一次性针管从离心管的管壁刺入离心管中，吸出离心管中间澄清的母乳上清 液并注入试管中备用；
[0011] 3)采用分光光度计仪器检测母乳中微量元素的含量。
[0012] 所述母乳样品量优选为500ul。
[0013] 所述高速离心机的离心速度优选为16000转。
[0014] 所述母乳样品离心时间优选为15分钟。
[0015] 测量的微量元素为锌时，所述的锌试剂1为Tris缓冲液，所述的锌试剂2为锌贡 (Zincon)，标准液为硫酸锌。
[0016] 锌的定标包括以下工序：
[0017] a)取1700ul锌试剂1与IOOul锌试剂2放入试管中混匀作为空白管；
[0018] b)取1500ul锌试剂1与IOOul锌试剂2再加入200ul锌标准液放入试管中混匀 作为标准管；
[0019] c)将以上两支试管放入温度为37°C的恒温水浴箱中预温5分钟；
[0020] d)使用630nm波长，将锌的标准浓度及范围预先输入仪器、吸液量调整为 800-1000ul ；
[0021] e)按下调零键并吸入预温好的空白管中液体待仪器提示调零结束；
[0022] f)调零之后按仪器上的定标键并吸入预温后的标准管中的标准液，待仪器提示结 束会在定标因子处显示此次定标的值、按确定完成锌测量定标。
[0023] 锌元素的测量包括以下工序：
[0024] a)取1500ul锌试剂1、IOOul锌试剂2、200ul母乳离心上清液将之混匀放入37°C 恒温水浴箱中预温5分钟；
[0025] b)在仪器锌测量项目中按测量键进入测量界面，将预温好的样品液吸入仪器中等 待测量结束。
[0026] 测量的微量元素为铁时，所述的铁试剂1为甘氨酸或盐酸羟胺，所述的铁试剂2为 菲洛嘆（Ferrospectral)，标准液为硫酸亚铁。
[0027] 铁的定标包括以下工序：
[0028] a)取2000ul铁试剂1与IOOul铁试剂2放入试管中混匀作为空白管；
[0029] b)取2000ul铁试剂1与IOOul铁试剂2再加入200ul铁标准液放入试管中混匀 作为标准管；
[0030] C)将以上两支试管放入温度调整为37°C的恒温水浴箱中预温10分钟；
[0031] d)使用578nm波长，将铁的标准浓度及范围预先输入仪器、吸液量调整为 800-1000ul ；
[0032] e)按下调零键并吸入预温好的空白管中液体待仪器提示调零结束；
[0033] f)调零之后，按仪器上的定标键并吸入预温后的标准管中的标准液，待仪器提示 结束会在定标因子处显示此次定标的值、按确定完成铁测量定标。
[0034] 铁元素的测量包括以下工序：
[0035] a)取2000ul铁试剂1、IOOul铁试剂2、200ul母乳离心上清液将之混匀放入37°C 恒温水浴箱中预温10分钟；
[0036] b)在仪器铁测量项目中，按测量键进入测量界面，将预温好的样品液吸入仪器中 等待测量结束。
[0037] 测量的微量元素为钙时，所述的钙试剂1为2-氨基-二甲基-1-丙醇，钙试剂2 为邻甲酚酞络合酮或8-羟基喹啉，标准液为碳酸钙。
[0038] 钙的定标包括以下工序：
[0039] a)先把钙测试液1与钙测试液2等量取出放置在试管中混匀做为工作液；
[0040] b)取1500ul钙工作液放入试管中作为空白管；
[0041] c)取1500ul钙试剂1与20ul钙标准液放入试管中混匀作为标准管；
[0042] d)将以上两支试管在室温条件下放置3分钟；
[0043] e)使用578nm波长，将钙的标准浓度及范围预先输入仪器、吸液量调整为 800-1000ul ；
[0044] f)按下调零键并吸入预温好的空白管中液体，待仪器提示调零结束；
[0045] g)调零之后按仪器上的定标键，并吸入标准管中的标准液，待仪器提示结束会在 定标因子处显示此次定标的值，按确定完成钙测量定标。
[0046] 钙元素的测量包括以下工序：
[0047] a)取1500ul钙工作液、20ul母乳离心上清液将之混匀在室温条件下放置3分钟， [0048] b)在仪器钙测量项目中，按测量键进入测量界面，将预温好的样品液吸入仪器中 等待测量结束。
[0049] 本发明微量测量母乳的方法，利用物质对不同波长光的吸收现象，对物质进行定 性和定量分析，
[0050] 采用这种方法，所用母乳数量少，为500ul，仅是现有方法的1/10,减少母乳的浪 费，而且检测方法简便。
【具体实施方式】
[0051] 本发明微量测量母乳的方法，仪器的测量原理为：利用物质对不同波长光的吸收 现象，对物质进行定性和定量分析，它符合朗伯一比耳定律，T 一 I/Ι。
[0052] A = Log(I〇 /D
[0053] 其中：T--透光度
[0054] I--透射光强度
[0055] 1"--入射光强度
[0056] A--吸收率
[0057] 包括以下步骤，
[0058] (1)仪器定标
[0059] 1、锌的定标方法
[0060] 锌试剂主要组成成份：
[0061] 锌试剂I :Tris缓冲液
[0062] 锌试剂 2 :锌贡（Zincon)
[0063] 标准液：硫酸锌
[0064] 定标步骤：
[0065] a)空白管：取1700ul锌试剂1与IOOul锌试剂2放入试管中混匀；
[0066] b)标准管：取1500ul锌试剂1与IOOul锌试剂2再加入200ul锌标准液放入试 管中混匀；
[0067] c)将以上两支试管放入温度为37°C的恒温水浴箱中预温5分钟；
[0068] d)使用630nm波长，将锌的标准浓度及范围预先输入仪器、吸液量调整为 800-1000ul ；
[0069] e)此时按下调零键并吸入预温好的空白管中液体待仪器提示调零结束；
[0070] f)调零之后按仪器上的定标键并吸入预温后的标准管中的标准液待仪器提示结 束会在定标因子处显示此次定标的值、按确定完成锌测量定标；
[0071] g)单位：umol/L。
[0072] 2、铁的定标方法
[0073] 铁试剂主要组成成份：
[0074] 铁试剂1 :甘氨酸、盐酸羟胺
[0075] 铁试剂 2 :菲洛嘆（Ferrospectral)
[0076] 铁准液：硫酸亚铁
[0077] 定标步骤：
[0078] ①空白管：取2000ul铁试剂1与IOOul铁试剂2放入试管中混匀；
[0079] ②标准管：取2000ul铁试剂1与IOOul铁试剂2再加入200ul铁标准液放入试管 中混匀；
[0080] ③将以上两支试管放入温度调整为37°C的恒温水浴箱中预温10分钟；
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