乳品中短链脂肪酸的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及乳品的质量控制，特别涉及一种乳品中短链脂肪酸的检测方法。
【背景技术】
[0002] 乳品中含有蛋白质、脂肪、乳糖、矿物质、维生素，营养丰富、易被人体消化吸收，在 人类的膳食结构中占有十分重要的地位。为了向大众提供安全、优质的乳品，需要对其进行 严格的质量控制。目前，乳品的质量控制主要包括卫生检测和营养检测。其中，卫生检测包 括致病性微生物、农药残留、兽药残留、重金属以及其他危害人体健康物质的限量；营养检 测包括蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、矿物质含量。
[0003] 乳品中还含有短链脂肪酸。短链脂肪酸不仅能够降低结肠内pH值，抑制致病菌的 繁殖，营养结肠上皮细胞，促进细胞生长、代谢，维持益生菌代谢，保持肠道菌群稳态；还能 抑制促炎因子产生，减少炎症反应，降低肠道病变，抑制结肠癌细胞的增值、分化和转移，促 进癌细胞凋亡及控制原癌基因表达。并且，短链脂肪酸还为婴幼儿提供营养，促进婴幼儿生 长发育；刺激婴幼儿肠道益生菌的生长、减少有害菌的定植；刺激婴幼儿免疫系统发育，增 强免疫系统识别和抗感染能力。
[0004] 可见，短链脂肪酸不但对维系人体健康十分重要，而且对于促进婴幼儿生长发育 尤为重要。因此，需要建立一种测定乳品中短链脂肪酸的方法。
【发明内容】
[0005] 为解决上述问题，本发明实施例公开了一种乳品中短链脂肪酸的检测方法。技术 方案如下：
[0006] 乳品中短链脂肪酸的检测方法，包括以下步骤：
[0007] (1)对照品溶液及标样储备液的制备
[0008] 分别称取8种短链脂肪酸对照品，所述8种短链脂肪酸分别为：甲酸、乙酸、丙酸、 异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸和己酸，将所述8种短链脂肪酸分别加入无水乙醇溶解定容，即 得具有已知浓度的各种短链脂肪酸对照品溶液；
[0009] 称取2-乙基丁酸，加入无水乙醇溶解定容，即得具有已知浓度的标样2-乙基丁酸 储备液；
[0010] ⑵乳品溶液的制备
[0011] 当乳品为液体样品时，吸取体积V1的乳品，加入体积V 2的沉淀剂，提取，离心，取上 清液，过滤，即得液体样品的乳品溶液；
[0012] 当乳品为固体样品时，称取质量M的乳品，加入体积％的沉淀剂，提取，离心，取上 清液，过滤，即得固体样品的乳品溶液；
[0013] 所述沉淀剂为含HCl的乙醇溶液，并含有体积V4的标样2-乙基丁酸储备液；
[0014] (3) GC-MS 检测
[0015] 气相条件包括：色谱柱：以硝基对苯二酸改性的聚乙二醇为固定液的毛细管柱； 升温程序：初始温度50°C保持lmin，之后以10°C /min升至180°C，再以70°C /min升至 250°C保持3min ;进样口温度：200~250°C ;载气：高纯氦；流速：0. 5~I. 5mL/min ;分流 比：1:1~50:1 ;进样体积：0. 5~8yL ;
[0016] 质谱条件包括：EI电子轰击离子源；离子源温度：200~250°C ;接口温度：200~ 250°C，溶剂延迟4min ;采用SM扫描方式；
[0017] 在所述检测条件下，将体积％的各对照品溶液和乳品溶液分别注入GC-MS中，记 录各对照品溶液和乳品溶液的色谱图；获得各对照品的保留时间及质谱数据；
[0018] (4)根据对照品和乳品溶液的GC-MS检测结果，确定乳品中所含有的短链脂肪酸 的种类；
[0019] (5)计算短链脂肪酸的相对峰面积
[0020] 按照下列公式计算乳品溶液中短链脂肪酸的相对峰面积：
[0021] 短链脂肪酸的相对峰面积=相应的短链脂肪酸峰面积/2-乙基丁酸峰面积。
[0022] 在本发明的一种优选实施方式中，所述气相条件具体包括：色谱柱 DB-FFAP(30mX0. 25mmX0. 25μπι);升温程序：初始温度 50°C 保持 lmin，以 10°C /min 升 至180°C，再以70°C /min升至250°C保持3min ;进样口温度：250°C ;载气为高纯氦；流速： 1.0 mL/min ;分流比为10:1 ;进样体积：5 μ L ;
[0023] 所述质谱条件具体包括：EI电子轰击离子源；离子源温度：250°C ;接口温度： 250°C ;溶剂延迟：4min ;采用SM扫描方式。
[0024] 在本发明的一种优选实施方式中，所述加入体积V2的沉淀剂为体积V i液体样品的 1~5倍。
[0025] 在本发明的一种更优选实施方式中，所述加入沉淀剂的体积V2为体积V ^液体样品 的2~4倍。
[0026] 在本发明的一种更优选实施方式中，所述加入沉淀剂的体积V2为体积V ^液体样品 的3倍。
[0027] 在本发明的一种优选实施方式中，所述沉淀剂为含0. 5% HCl的乙醇溶液。
[0028] 在本发明的一种优选实施方式中，所述提取方法为超声提取。
[0029] 在本发明的一种优选实施方式中，所述离心条件为14000rpm，8~12min。
[0030] 在本发明的一种优选实施方式中，所述过滤方法为采用0. 22 μ m滤膜过滤。
[0031] 本发明所构建的乳品中短链脂肪酸的检测方法，简单灵敏、快速准确、专属性强、 重复性好，可用于乳品中短链脂肪酸的质量控制研宄。
[0032] 当然，实施本发明的任一产品或方法必不一定需要同时达到以上所述的所有优 点。
【附图说明】
[0033] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现 有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本 发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以 根据这些附图获得其他的附图。
[0034] 图1为己酸的质谱图；
[0035] 图2为MR-I样品的GC-MS色谱图；
[0036] 图3为MR-2样品的GC-MS色谱图；
[0037] 图4为MR-3样品的GC-MS色谱图；
[0038] 图5为MR-4样品的GC-MS色谱图；
[0039] 图6为MR-5样品的GC-MS色谱图；
[0040] 图7为CNN-I样品的GC-MS色谱图；
[0041] 图8为CNN-2样品的GC-MS色谱图；
[0042] 图9为CNN-3样品的GC-MS色谱图；
[0043] 图10为CNN-4样品的GC-MS色谱图；
[0044] 图11为CNN-5样品的GC-MS色谱图；
[0045] 图12为SNN-I样品的GC-MS色谱图；
[0046] 图13为SNN-2样品的GC-MS色谱图；
[0047] 图14为SNN-3样品的GC-MS色谱图；
[0048] 图15为SNN-4样品的GC-MS色谱图；
[0049] 图16为SNN-5样品的GC-MS色谱图；
[0050] 图17为NF-I样品的GC-MS色谱图；
[0051] 图18为NF-2样品的GC-MS色谱图；
[0