同时测定液体保健食品中非法添加的多种化学药物的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种医药非法添加品的测定，具体地说，是涉及一种同时测定液体保 健食品中非法添加的多种化学药物的方法，属于医药检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 目前我国已批准的保健食品的保健功能有减肥、缓解体力疲劳、辅助降血脂、辅助 降血压、辅助降血糖、辅助改善记忆力等27种，近年来，随着社会竞争压力的不断增大和老 年化社会的扩大，辅助改善记忆力类保健品正步入人们的学习、工作和生活中，常见功能有 改善记忆力、补充大脑营养等。"辅助改善记忆"的保健功能主要通过补充大脑正常运行所 必须的物质、增加大脑细胞对氧气的利用、提供能够促进脑部新陈代谢排出的物质等功效。 然而不法商家为了使保健品起效快，以达到增加销售量目的，会在保健品中非法添加化学 药物，但化学药物的副作用往往会严重影响人们的身体健康。
[0003]目前用于辅助改善记忆力类保健食品非法添加的筛查方法较少，同时检测多种非 法添加药物的方法更是少之又少。因此，针对此类保健食品中潜在的、可能添加化学药物建 立一种有效的、准确的检测方法，预防辅助改善记忆类保健食品进入市场后导致的不良事 件发生，确保其安全性。本研宄依据相关发明通过对17种促智类化学药品（多奈哌齐、石杉 碱甲、依达拉奉、倍他司汀、烟酸占替诺、吡拉西坦、加兰他敏、咖啡因、茴拉西坦、氟马西尼、 雌三醇、氟桂利嗪、萘普生、己烯雌酚、尼莫地平、阿米三嗪、双氯芬酸钠）建立高效液相色 谱分析方法，应用于改善记忆力类保健食品中非法添加化学药物的筛查。
【发明内容】
[0004]针对上述问题，本发明的目的是提供一种同时测定液体保健食品中非法添加的多 种化学药物的方法，该方法操作简便、准确、快速测定液体保健食品17种非法添加化学物， 可用于辅助改善记忆类保健食品中非法添加化学药品的定性筛查和定量检测。
[0005]本发明提供的的技术方案是这样的：
[0006]-种同时测定液体保健食品中非法添加的多种化学药物的方法，依次包括下述步 骤：
[0007]1)标准溶液的制备
[0008]分别精密称取17种标准物质适量，加60%甲醇水溶液使成浓度为0. 2mg/mL，检测 17种化学药物单标色谱和混标色谱图；
[0009] 2)标准工作曲线
[0010] 取标准溶液适量加60 %甲醇水溶液，分别配制成40 y g/mL、80 y g/mL、100 y g/ mL、200 y g/mL、400 y g/mL，作为标准工作曲线溶；
[0011]3)样品前处理
[0012]取相当于一次口服剂量，置于50mL容量瓶中，加20mL 60%甲醇水溶液，超声处理 30分钟，用60 %甲醇-水溶液定容至刻度，摇匀，过滤，滤液待用；
[0013] 称取相当于一次口服剂量，置于lOOmL锥形瓶中，精密加入50mL 60%甲醇水溶 液，称其重量，超声提取30分钟，冷却，用60 %甲醇-水溶液补足重量，过滤，滤液待用；
[0014] 4)净化
[0015] 精密量取上述滤液2mL以约lmL/min流速通过C18-SPE柱，用3mL 60%甲醇-水 洗脱，合并流出液与洗脱液，用0. 22 y m有机滤膜过滤即得待测样品；
[0016] 其中，所述色谱条件为：
[0017]色谱柱：Thermo AccliaimTM Mixed-Mode WCX-1 柱；流动相：A :水；B :100mmol/ L磷酸二氢钠缓冲盐，pH 6. 4;C:乙腈；梯度洗脱程序：0~10min，85%~45% A、10%B、 5%~45% C ;10 ~12min，45% A、10% B、45% C ;12 ~15min，45%~31% A、10%~14% B、45% C ;15 ~15. lmin，31%~0% A、14%~50% B、50% C ;15. 1 ~17min，0% A、50% B、 50% C ;17 ~17. lmin，0%~85% A、50%~10% B、50%~5% C ;17. 1 ~20min，85% A、 10% B、5% C ;在 85% A、10% B、5% C 下平衡 3min。流速：0? 8mL/min ;柱温：40°C;进样量： 2 y 1 ;检测波长：220nm为主要检测波长；254nm、280nm辅助定性。
[0018] 与现有技术相比，本发明提供的技术方案建立了使用同一种色谱条件同时测定辅 助改善记忆类保健食品中可能添加的17种化学药物含量的高效液相方法，在20min内完成 了对各化合物的分析测定，在保证分离度的情况下，实现了快速有效的高通量分析，可为监 测辅助改善记忆类保健食品非法添加药物提供强有力的技术支持。
【附图说明】
[0019] 图1是17种化学药物单标色谱图；
[0020] 图2是17种化学药物混标对照色谱图；
[0021] 图3是制剂样品的色谱图；
[0022] 图4是试剂空白色谱图。
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[0027] 其中：1吡拉西坦；2萘普生；3咖啡因；4依达拉奉；5双氯酚酸钠；6茴拉西坦；7 佛马西尼；8烟酸占替诺；9雌三醇；10石杉碱甲；11尼莫地平；12加兰他敏；13倍他司丁； 14己烯雌酚；15阿米三嗪；16 ;多奈哌齐；17,佛桂利嗪；a液体制剂。
【具体实施方式】
[0028] 下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不构成对本发明的任何限制，任 何人在本发明的权利要求范围内所做的有限次的修改仍在本发明的权利要求范围内。
[0029] 实施例1
[0030] 1材料与方法
[0031] 1.1材料
[0032] 1. 1. 1样品来源
[0033] 辅助改善记忆力类保健食品来源于市场销售样品。
[0034] 1. 1. 2主要仪器与试剂
[0035] Agilent 1260高效液相色谱仪（二极管阵列检测器，美国Agilent)，XA20OTU电 子分析天平（瑞士梅特勒公司），Classic UVF超纯水器（英国ELGA公司），P300H超声 波清洗器（德国Elma公司），Sigma 3K15高速离心机（德国赛多利斯公司），C18-SPE柱 (60mg/3mL,天津博纳艾杰尔科技有限公司）。
[0036] 多奈哌齐、石杉碱甲、依达拉奉、倍他司汀、烟酸占替诺、吡拉西坦、加兰他敏、咖 啡因、茴拉西坦、氟马西尼、雌三醇、氟桂利嗪、萘普生、己烯雌酚、尼莫地平、阿米三嗪、双氯 芬酸钠对照品均购于中国食品药品检定研宄院，纯度均多98. 5% ;甲醇和乙腈（液质级， B&J)，其它试剂均为分析纯。实验用水为经ELGA PURELAB Classic UVF净化系过滤的去离 子水。
[0037] 1. 2方法
[0038] 1. 2. 1标准溶液的制备
[0039] 1. 2. 1. 1标准溶液：分别精密称取17种标准物质适量，加60%甲醇水溶液使成浓 度为0. 2mg/mL ; 17种化学药物单标色谱图见图1，混标色谱图见图2。
[0040] 1. 2. 1. 2标准工作曲线：取标准溶液适量加60%甲醇水溶液，分别配制成40 y g/ mL、80 y g/mL、100 y g/mL、200 y g/mL、400 y g/mL，作为标准工作曲线溶液。
[0041] 1.2. 2样品前处理
[0042] 称取相当于一次口服剂量，置于100mL锥形瓶中，精密加入50mL 60%甲醇水溶 液，称其重量，超声提取30分钟，冷却，用60 %甲醇-水溶液补足重量，过滤，滤液待用。
[0043] 1. 2. 2. 4净化：精密量取上述滤液2mL以约lmL/min流速通过C18-SPE柱（使用 前分别以3mL甲醇，水活化），用3mL 60%甲醇-水洗脱，合并流出液与洗脱液，用0. 22 y m 有机滤膜过滤即得待测样品。样品色谱图及试剂空白色谱图见图3、图4。
[0044] 1. 2. 3色谱条件
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