分析装置及自动分析装置的制造方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及对利用抗原抗体反应的微粒凝集反应进行散射光测定的方法及装置，特别涉及自动分析装置上的散射光测定法。
【背景技术】
[0002]使来自光源的光照射试样和试剂混合形成的反应液，利用特定波长的透光量的变化算出吸光度，根据Lambert — Beer定律对试样中的被测物质的浓度进行定量的自动分析装置正在被广泛应用。在这些装置中，在反复进行旋转和停止的槽盘的圆周上排列多个保持反应液的槽，在槽盘旋转过程中通过规定位置的透射光测定部，以15秒左右的间隔用约10分钟测定从反应槽内的反应液中透过的光量的时间系列数据作为反应过程数据，根据光量的变化算出吸光度，对被测定物质的浓度进行定量。
[0003]用自动分析装置测定的反应主要有基质和酶的显色反应、抗原和抗体的免疫反应这2种。采用前者反应的分析被称为生物化学分析，作为检测项目有LDH(乳酸脱氢酶)、ALP (碱性磷酸酶)、AST(门冬氨酸氨基转移酶)等。采用后者反应的分析被称为免疫分析，作为检测项目有CRP(C反应性蛋白)、IgG(免疫球蛋白)、RF(类风湿因子)等。在后者测定的被测定物质中，存在在血中浓度低的低浓度区域要求定量的检测项目，在这样的项目中采用乳胶免疫分析，使用在表面与抗体偶联(结合)的乳胶粒子作为增感剂。在乳胶免疫分析中，试剂中含有的乳胶粒子表面的抗体将作为试样中含有的被测定物质的抗原识别并结合后的结果，乳胶粒子通过抗原发生凝集，形成乳胶粒子的凝集体。在以往的自动分析装置中，使光照射该凝集体分散形成的反应液，测定在乳胶粒子的凝集体上不发生散射而透过的透光量。抗原的浓度越高，一定时间后的凝集体的尺寸变得越大，由于更多的光发生散射，所以透光量减少。因此，根据作为反应过程数据测定的光量能够对抗原浓度进行定量。
[0004]近年来，乳胶免疫分析的更高灵敏度备受期待，不是测定透射光，而是尝试测定散射光。例如，专利文献I公开了使用光阑将透射光和散射光分离，同时测定透射光和散射光的系统。专利文献2公开了在自动分析装置中将2个波长的检测光强度的差值自动算出并算出分析结果的系统。此外，在自动分析装置以外，专利文献3公开了对于包含透射光和散射光的检测信号，获取在波长670nm和940nm的差，计量血中外源性大分子的系统。
[0005]现有技术文献
[0006]专利文献
[0007]专利文献I日本特开2001 —141654号公报
[0008]专利文献2日本特开平03— 065654号公报
[0009]专利文献3日本特开平06— 038947号公报
【发明内容】
[0010]发明要解决的问题
[0011]在利用散射光的自动分析装置中，到目前为止还没有根据多个波长的反应过程数据进行运算，实现高灵敏度的方法。专利文献I虽然公开了通过同时进行透射光测定和散射光测定实现高灵敏度的结构，但并不是作为适合自动分析装置的结构而考虑的。在专利文献2中虽然通过运算多个波长的数据，在吸光度方面实现噪音的降低，但关于散射光的数据运算方法并没有公开。专利文献3，作为计量的对象是外源性大分子，并不是能够获得乳胶免疫分析中反应过程数据的方法。
[0012]为使乳胶免疫分析实现高灵敏度而测定散射光时，需要降低因气泡、灰尘等干扰物质引起的噪音。特别是，因为使用反应过程数据进行测定，由于气泡、灰尘在反应过程中长大或增加等原因引起信号变化成为问题。
[0013]此外，乳胶免疫分析的试剂中含有的乳胶粒子根据试剂种类的不同在反应液中的密度有一定范围，因气泡、灰尘等干扰物质引起的噪音影响根据试剂而不同。因此，期望使用相同的光学体系，不易受试剂的种类影响的噪音消除方法。
[0014]在本发明中，将第I波长的光和比第I波长的波长长的第2波长的光由同一光路照射装入有试样和试剂混合形成的反应液的槽，接收各个波长的散射光。接着，求出从表示由反应液中的凝集反应引起变化的第I波长的散射光的变化光量的信号中减去第2波长的散射光的变化光量乘以依赖于试剂的试剂系数的信号所得的信号，以该求出的信号为基础对试样中的成分量进行定量。
[0015]典型的是，试剂含有在直径50nm?500nm的表面上结合了抗体的乳胶粒子，作为第I波长使用0.65 μ m?0.75 μ m范围的光。作为试剂系数能够使用透射槽的第I波长的光和第2波长的光的强度比，但也可以将每种试剂的试剂系数预先存储在存储部，将其适当读取并利用。
[0016]发明的效果
[0017]根据本发明，在乳胶免疫分析中，可以将由干扰物质引起的噪音消除。
[0018]上述以外的课题、结构以及效果，通过以下实施方式的说明而明确。
【附图说明】
[0019]图1为说明在抗原抗体反应中测定出的散射光随时间变化的概略图。
[0020]图2为表示自动分析装置的一个实施例的整体结构例的概略图。
[0021]图3为散射光测定部的概略图。
[0022]图4为光源单元的概略图。
[0023]图5为散射光接收部的概略图。
[0024]图6为表示由气泡产生的噪音影响和运算结果的图。
【具体实施方式】
[0025]以下，参照附图对本发明的实施方式进行说明。
[0026]图1为说明在抗原抗体反应中测定的散射光随时间变化的概略图。在具有散射光测定部的自动分析装置上，首先在添加了第一试剂的试样中混合直径为50nm?500nm的乳胶粒子分散形成的第二试剂(基准状态)，检测经过一定时间后的(凝集状态)的散射光或透射光的变化光量。另外，准备使用已知浓度的抗原测定的变化光量的校准数据，通过与该数据比较，算出试样中的抗原浓度。在本发明中，根据散射光的第I波长、第2波长各自的信号，使用下述的运算后的信号准备校准数据。因为变化光量也与照射光的强度成比例，所以预先调整第I波长和第2波长的光源强度差在20%以内。或者预先测定第I波长和第2波长的光源强度比，用该强度比除散射光强度，抑制因光源强度的不均匀引起的散射光强度的不均匀。或者在槽内加入纯水，测定透射槽的第I波长和第2波长的透射光强度比，通过用该强度比除散射光强度，也可以对于因光源强度的不均匀引起的散射光强度的不均匀进行修正。
[0027]图2为表示自动分析装置的一实施例的整体结构例的概略图。本实施例的自动分析装置能够同时测定透射光和散射光。本实施例的自动分析装置具有:试样盘3、试剂盘6、槽盘9这3种盘，在这些盘之间转移试样、试剂的分注机构，控制这些分注机构的控制回路23，透射光测定回路24，散射光测定回路25，对测定的数据进行处理的PC (计算机)等数据处理部26，作为对数据处理部26输入数据的界面的输入部27，输出部28。数据处理部26具备分析数据的分析部、以及将控制数据、测定数据、分析时使用的数据、分析结果数据等存储的数据存储部。
[0028]在试样盘3的圆周上配置了多个收纳试样I的试样杯2。在试剂盘6上配置了多个收纳试剂4的试剂瓶5。在槽盘9的圆周上配置了多个在内部使试样I和试剂4混合形成反应液7的槽8。试样分注机构10将固定量的试样I从试样杯2转移至槽8。试剂分注机构11将固定量的试剂4从试剂瓶5转移至槽8。搅拌部12在槽8内将试样I和试剂4搅拌混合。洗净部14从分析结束后的槽8中将反应液7排出洗净。在被洗净的槽8内再次由分注机构10分注下一个试样1，由试剂分注机构11分注新的试剂4，在其他反应中使用。槽8浸入在温度、流量被控制的恒温槽内的恒温流体15中，槽8及其中的反应液7在保持一定温度的状态下被转移。恒温流体15例如使用水，恒温流体温度