一种麦蚜室内生物测定的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及植物保护领域，具体地说，涉及一种麦蚜室内生物测定的方法。
【背景技术】
[0002] 麦蚜是世界性的危害麦类作物的重要害虫之一，在我国南北麦区均有发生，种类 主要包括麦长管蚜、麦二叉蚜、禾谷缢管蚜等。麦蚜不仅能直接刺吸植物营养，而且排泄的 大量蜜露也严重影响麦苗的呼吸和光合作用，同时也是传播植物病毒的重要媒介，对农业 生产造成重大的经济损失。目前，麦蚜主要依靠化学方法防治，但由于麦蚜生活周期短，繁 殖量大而快，防治次数多，用药量大及单剂的不合理使用，致使麦蚜对一些常用药剂产生了 不同程度抗药性。
[0003] 害虫抗药性监测是害虫抗性有效治理的重要基础。生物测定作为害虫抗药性监测 的重要技术手段，它不仅能反映害虫对哪些杀虫药剂产生了抗性，而且能准确给出抗性程 度，对于及时调整抗性治理策略具有重要的实践意义。
[0004] 关于麦蚜生物测定技术主要有点滴法，带虫浸叶法，玻璃管药膜法，叶片药膜法 等。其中点滴法因为需要精确的点滴器，同时要求操作人员有较高的技术，因此应用不多。 带虫浸叶法，由于蚜虫易落和个体较小等原因致使供试昆虫损伤大和对照组死亡率较高， 影响生测结果的准确性。玻璃管药膜法，虽然操作简便，但只能测定触杀毒性，不能测定胃 毒抗性。叶片药膜法则因为其操作简便易于实施，且对触杀性和胃毒性药剂都适用，因而在 蚜虫的生物测定中得到广泛应用，然而由于麦蚜个体小，寄主主要为禾本科植物，叶片容易 水分丢失等原因导致目前采用的叶片药膜法都不太理想，如常使用的培养皿作为容器的叶 片药膜法，其空间密闭，蚜虫容易逃逸，且占用空间大以及湿度难控制等问题影响了生物测 定结果的准确性。
[0005]
【发明内容】
[0006] 为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种麦蚜室内生物测定的 方法。
[0007] 为了实现本发明目的，本发明的技术方案如下：
[0008] -种麦蚜室内生物测定的方法，所述方法利用塑料滴管（塑料刻度吸管）作为生 测器皿。
[0009] 进一步地，所述方法包括如下步骤：
[0010] 1)将塑料滴管扎出3~6个小孔，孔直径小于2mm ;
[0011] 作为优选，在塑料滴管底部扎孔；
[0012] 2)将麦苗浸入待测杀虫剂10~20秒，取出置阴凉通风处晾干，放入塑料滴管中；
[0013] 3)以7~8头/mL的密度接入无翅成年麦姐，并用透气性材质（如棉花，纱布等） 将塑料滴管封口；
[0014] 4)将塑料滴管置于恒温室内，48h后检查死亡率，计算毒力测定结果。
[0015] 进一步地，所述塑料滴管的容量大于等于3mL。
[0016] 作为优选，所述塑料滴管的容量为3mL。
[0017] 在本发明的【具体实施方式】中，使用的塑料滴管为购自江苏康健华医疗用品有限公 司的3mL塑料滴管，商品名称为：吸管（采样容器）。
[0018] 进一步地，塑料滴管中麦苗的数量为2~3根/mL。
[0019] 进一步地，所述麦苗选择长势良好并处于幼嫩阶段的麦苗，优选培育10天的麦 苗，从基部剪下。
[0020] 进一步地，所述麦蚜为田间麦蚜种群在室内培育多代得到的麦蚜。
[0021] 进一步地，检查死亡率的标准为：轻触蚜虫，只有一条腿动或者完全不动的记为死 亡。
[0022] 进一步地，计算毒力测定结果为：用POLO软件计算获得LC5q (Lethal Concentration of 50% )〇
[0023] 本发明的有益效果在于：
[0024] 本发明提供的麦蚜室内生物测定的新方法，为采用塑料滴管作为生物测定工具的 麦苗药膜法，并采用棉花封口，操作简便，节省空间，且减少生物测定过程中操作对供试蚜 虫产生的损伤及误差。另外在塑料滴管中放置麦苗，能够较理想的保持麦苗的湿度，有效保 证生物测定结果的准确性。本发明提供的麦蚜药膜法室内生物测定新方法，能够了解麦蚜 田间种群对不同作用机理药剂的抗性水平及其分布，进而更科学地指导田间用药。
[0025] 本发明提供的技术方案，既保持了麦苗正常状态，又保证了麦苗新鲜度，同时又在 封闭的环境中保持了透气性，且免除了开放外界环境不确定因素对实验结果的影响，符合 生物实验保持单一变量的原则。
【附图说明】
[0026] 图1为本发明生物测定所使用的塑料滴管。
[0027] 图2为本发明生物测定时棉花封口的塑料滴管。
[0028] 图3为十二孔细胞培养板叶片药膜法的生物测定示意图。
[0029] 图4为使用十二孔细胞培养板叶片药膜法实验时麦蚜的逃逸情况。
[0030] 图5为使用十二孔细胞培养板叶片药膜法实验时实验麦苗的干枯情况。
【具体实施方式】
[0031] 以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
[0032] 实施例1氟啶虫胺氰对禾谷缢管蚜的敏感毒力基线的建立
[0033] 1、研究对象
[0034] 实验室饲养多年不接触任何药剂的禾谷缢管蚜种群。
[0035] 2、方法
[0036] 供试药剂为浓度大于95%的氟啶虫胺腈原药，采用塑料滴管叶片药膜法，进行室 内毒力测定。
[0037] 2. 1原药母液的配制及稀释
[0038] 将原药溶解于丙酮，定容后存放于药剂瓶中，封口膜封口，4°C冰箱保存。毒力测定 前，用含0. 01 % (v/v) TritonX-IOO的蒸馏水稀释至各浓度，备用。
[0039] 2. 2生物测定叶片的选择及使用
[0040] 选用室内水培法培育10天左右的新鲜麦苗，麦苗用干净剪刀从基部剪下，长度 约为IOcm左右，每个吸管准备8个麦苗。将麦苗浸入各药剂稀释浓度15s，取出后置阴凉 通风处晾干后，置于底部用尖头镊子扎过4个小孔的塑料滴管中，其中对照组麦苗单独用 0· 01% TritonX-IOO的蒸馏水处理