酪氨酸类酚代谢物尿液检测试剂的制作方法
【专利说明】酪氨酸类酚代谢物尿液检测试剂
[0001]
技术领域
[0002]本发明涉及酪氨酸类酚代谢物尿液检测试剂，本发明还涉及人体尿液中酪氨酸类酚代谢物的检测方法。
[0003]
【背景技术】
[0004]癌症是目前对人类危害最大的顽疾之一，其死亡率高居各种疾病之首。并且随着全球环境污染的日益加剧，癌症的发病率正逐年提高，而癌症患者治疗后的生存率与其接受治疗时癌症所处的阶段有关系，如果在早期就接受治疗的话，其治疗后的五年生存率高达70%_90%。癌症的早期筛查是目前降低癌症发病率和死亡率的一个非常重要的手段。目前常见的检测方法包括各种肿瘤标志物，红外线、X光等。肿瘤标志物需要到医院抽血，需要专门的设备进行检测，红外线和X光也同样如此，这些仪器检测费用昂贵，并且这些对细胞和组织的研究会使人体受到伤害，而且取样也不方便。尿液是人体经过代谢的产物，其成分又与肌体代谢密切相关，所以任何系统疾病的病变也会引起尿液成分的变化，相对于血液而言，尿液样本易于获得，且样品量大，不会给患者带来痛苦。目前，尿中肿瘤标志物的检测一直是国际上研究的热点，利用尿中肿瘤标志物来筛查早期癌症已得到科学研究者和消费者的普遍认可。因此，找到一种方便、经济、有效的早期诊断方法的意义是十分重大的。
[0005]
【发明内容】
[0006]为了解决上述技术问题，本发明提供了一种新的酪氨酸类酚代谢物尿液检测试剂，所述检测试剂为至少含有H+、Hg\ NO3离子的酸性溶液，所述检测试剂中还含有IV B- VE B族金属离子、I B-1I B族金属离子和第VID族金属离子。
[0007]作为本发明优选的技术方案之一，所述IV B- VE B族金属离子为Ti2+、Cr2+、V2+中的一种或多种。
[0008]作为本发明优选的技术方案之一，所述I B-1I B族金属离子为Cu' Zn' Cd2+中的一种或多种。
[0009]作为本发明优选的技术方案之一，所述第VID族金属离子为Fe' Ru' Rh' Pd'Co'Pt2+中的一种或多种。
[0010]作为本发明优选的技术方案之一，所述检测试剂中Hg+的浓度与IV B-VEB族金属离子的浓度比为1:0.6-1.00
[0011]作为本发明优选的技术方案之一，所述检测试剂中Hg+的浓度与第VID族金属离子的浓度比为1:0.6-1.2。
[0012]作为本发明优选的技术方案之一，所述检测试剂中Hg+的浓度为50-1000mmol/L。
[0013]作为本发明优选的技术方案之一，所述检测试剂中H+的浓度为100-4000mmol/L。
[0014]作为本发明优选的技术方案之一，所述检测试剂中NO3的浓度为500-3000mmol/
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[0015]酪氨酸类酚代谢物的检测方法，包括以下步骤，
-获取待测人体尿液；
-将检测试剂与待测人体尿液混合，得到混合液，
所述检测试剂为至少含有H+、Hg+、NO3离子的酸性溶液，所述检测试剂中还含有IV B- VE B族金属离子、I B-1I B族金属离子和第VID族金属离子；
-判断混合液的颜色，当混合液的颜色为砖红色或褐色或玫红色时，则表示待测人体尿液含有酪氨酸类酚代谢物，当混合液的颜色为白色或淡黄色时，则表示待测人体尿液不含有酪氨酸类酚代谢物。
[0016]参考以下详细说明更易于理解本申请的上述以及其他特征、方面和优点。
【具体实施方式】
[0017]除非另有限定，本文使用的所有技术以及科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时，以本说明书中的定义为准。
[0018]如本文所用术语“由…制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
[0019]连接词“由…组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中，此短语将使权利要求为封闭式，使其不包含除那些描述的材料以外的材料，但与其相关的常规杂质除外。当短语“由…组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时，其仅限定在该子句中描述的要素；其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。
[0020]当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“I至5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“I至4”、“1至3”、“1-2”、“1-2和4-5”、“1-3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。
[0021]此外，本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个，并且单数形式的要素或组分也包括复数形式，除非所述数量明显旨指单数形式。
[0022]酪氨酸类酚代谢物尿液检测试剂，所述检测试剂为至少含有H+、Hg+、N03离子的酸性溶液，所述检测试剂中还含有IV B-VEB族金属离子、I B-1I B族金属离子和第VID族金属离子。
[0023]TV B-W B族金属离子
本发明所述的IV B-VEB族金属离子是指IV B-VEB族金属元素以离子的形式存在，可以举例:Ti2\ Ti' Ti' Mn' Cr2+、Cr3+、V2\ V3\ V4\ lr\ lr\ Zr4+、Nb' Nb' Nb' Nb5+、Mo\Mo2Mo3+, Mo4Mo5+, Hf' Hf3+、Hf' Ta+、Ta2+、Ta' Ta5+等。本发明中的 IV B- VII B 族金属离子是能够抑制尿液中蛋白质或者多肽的对检测显色的影响，但在本发明人的大量实验工作中，发现在H+、Hg+、N03离子的酸性溶液的体系中加入IV B-VEB族金属离子，与市售的米伦试剂相比，其检测尿液中酪氨酸类酚代谢物不需加热并且检测结果更为准确，具有较好的灵敏度。虽然其机理尚未清楚，但本发明的发明人认为:当尿液中存在酪氨酸类酚代谢物时，酪氨酸类酚代谢物会与酸性溶液中的硝酸根离子发生取代反应，生成硝基苯酚类的物质，其颜色为淡黄色或黄色，酸性溶液中的亚汞离子与IV B-VEB族金属离子共同作用，催化硝基苯酚类的物质还原为亚硝基苯酚类物质，由于亚硝基苯酚类物质的结构不稳定，经互变异构后成为颜色更深的醌肟，最终形成红色稳定产物。
[0024]作为本发明一种优选的技术方案，从获得更为明显的反应产物角度出发，所述IV B- VE B族金属离子为Ti' Cr' V2+中的一种或多种。
[0025]T B-丨? B族金属离子
本发明所述的I B-1I B族金属离子是指I B-1I B族金属元素以离子的形式存在，可以举例:Cu+、Cu2+、Cd+、Cd2+、Zn'Hg'Ag+等。本发明中的I B-1I B族金属离子能够抑制尿液中蛋白质或者多肽的对检测显色的影响，使得检测尿液中酪氨酸类酚代谢物更为准确。尿液中的无机盐、多肽或蛋白质表面存在大量的负电荷，会吸附大量的亚汞离子，使得亚汞硝酸根离子的酸性溶液与酪氨酸类酚代谢物无法发生显色反应。I B-1I B族金属离子的存在下，使得检测尿液中酪氨酸类酚代谢物更为准确。
[0026]作为本发明一种优选的技术方案，从抑制本发明中人体尿液中干扰物质出发，所述I B-1I B族金属离子为Cu' Zn' Cd2+中的一种或多种。
[0027]第VIll族金属离子
本发明所述的第VID族金属离子是指第VID族金属元素以离子的形式存在，可以举例:
Fe 'Fe 3+、Ni'Ni'Ru'Rh'Pd'Co'Co'Pt2+、Os' Ir2+等。本发明中的发明人意外的发现，在H+、Hg\ NO3离子和IV B-VEB族金属离子的酸性溶液的体系中加入一定量的第VID族金属离子时，使得检测尿液中的酪氨酸类酚代谢物更为准确且更灵敏。
[0028]作为本发明一种优选的技术方案，从获得更为明显的反应产物角度出发，所述第VID族金属离子为Fe2+、Ru' Rh' Pd' Co' Co3+、Pt2+中的一种或多种。
[0029]显佴试剂
作为酪氨酸类酚代谢物的显色试剂，本发明的检测试剂为含有H+、Hg+、NO3离子、IV B-VEB族金属离子、I