V出现一个还原峰，且峰电流较弱；曲线b是K2S2O8的循环伏安曲线，在-1.1V左右出现了一个还原峰，此反应为不可逆过程；曲线c是15??和1(2&08同时存在下的循环伏安曲线，混合液在-0.7V和-1.3V同时出现了两个还原峰，其分别对应于TSPP和K2S2O8的还原峰，TSPP的峰电位不变，K2S2O8的峰电位却负移了0.2，原因可能是TSPP的存在对其还原产生了影响。
[0024]实施例2
a)电极的抛光处理同实施例1;
b)三种溶液的配制同实施例1;
c)移取600yL上述混合溶液于样品池中，静置2min，待体系稳定之后，以玻碳电极为工作电极，Ag/AgCl电极、铂丝分别为参比电极和对电极，在-0.3V到-1.5V之间进行电化学发光扫描，结果参见图2。
[0025]图2为不同溶液在裸的玻碳电极上的电化学发光图；其中，a为TSPP缓冲液，匕为K2S2O8缓冲液，C为TSPP+ K2S2O8混合溶液;从图2中可以看出在TSPP和K2S2O8单独存在时并没有发光信号，而当两者共存于一个体系时有很强的电化学发光信号。
[0026]实施例3 a)电极的抛光处理同实施例1;
b)移取10yL的TSPP溶液到1.5mL离心管中，再移入10yL不同浓度的K2S208(I X 10_Vol.L-1IXlO-1 mol.L—1)到离心管，最后加入800yL pH为7.4的0.1 mol.L-1 PBS缓冲溶液(含0.1 mol.Γ1 KCl)使总体积为lmL，摇匀并且静置2min;缓冲溶液中TSPP的浓度为2X ICT5 mol.L—1 ；
c)分别移取600yL上述混合溶液于样品池中，以玻碳电极为工作电极，Ag/AgCl电极、铂丝分别为参比电极和对电极，在-0.3V到-1.5V之间进行循环伏安扫描和电化学发光扫描，结果参见图3。
[0027]图3为不同浓度的K2S2O8的电化学发光图，可以看到不同浓度时，对其电化学发光强度有一定的影响。图中，3的浓度为0.lmol/L，b的浓度为0.15mol/L，(:的浓度为0.2mol/L，d的浓度为0.25mol/L，e的浓度为0.3mol/L，f的浓度为0.4mol/L，g的浓度为0.5mol/L。
[0028]实施例4
a)电极的抛光处理同实施例2;
b)移取10yL的TSPP溶液到1.5mL离心管中，再移入10yL的K2S2O8到离心管，加入800yL pH为7.4的0.1 mol.L—1 PBS缓冲溶液(含0.1 mol.L—1 KCl)使总体积为lmL，摇匀并且静置2min;得到的缓冲溶液中TSPP的浓度为2 X ΙΟ-5 mol.L—1 ,K2S2O8的浓度为0.5 mol.L
-1.，
c)移取600yL上述混合溶液于样品池中，以玻碳电极为工作电极，Ag/AgCl电极、铀丝分别为参比电极和对电极，在-0.3V到-1.5V之间设置不同的扫速(0.05 V.S^1-0.8 V.s—”进行电化学发光扫描，结果参见图4。
[0029]图4为不同扫速下的电化学发光图。
[0030]实施例5
a)电极的抛光处理同实施例1;
b)用移液枪移取10yL的TSPP溶液到1.5mL离心管中，接着移入10yL的K2S2O8到离心管，再移入pH为7.4的0.1 mol.L-1 PBS缓冲溶液(含0.1 mol.L-1 KCl)使总体积为ImL^匀并且静置2min;得到的缓冲溶液中TSPP的浓度为2 X 1(T5 mol.L—1 ,K2S2O8的浓度为0.5mol.L—S
c)移取600yL上述混合溶液于样品池中，以玻碳电极为工作电极，Ag/AgCl电极、铀丝分别为参比电极和对电极，在-0.3V到-1.5V之间进行电化学发光扫描，结果参见图5。
[0031 ] 图5为裸的玻碳电极在TSPP/K2S208体系，0.1 mol.L—1 PBS缓冲溶液(含0.1 mol.L—1 KCl)中的电化学发光图，由图5可以看出，体系连续扫描20圈后，其电化学发光强度具有较好的稳定性，不随扫描的进行呈现不稳定的状态。
[0032]实施例6
a)电极的抛光处理同实施例1;
b)用移液枪移取不同浓度(浓度已知)的10yL的的TSPP溶液到1.5 mL离心管中，接着移入10yL的K2S2O8到离心管，再移入pH为7.4的0.1 mol.L—1 PBS缓冲溶液使总体积为lmL，摇匀并且静置2min;得到的缓冲溶液中K2S2O8的浓度为0.5 mol.L—S
c)移取600yL上述混合溶液于样品池中，以玻碳电极为工作电极，Ag/AgCl电极、铀丝分别为参比电极和对电极，进行电化学发光扫描，结果参见图6。
[0033]图6为不同浓度TSPP溶液的电化学发光扫描图以及TSPP线性方程;其中，最上面的曲线不在线性范围内，由上往下数第二个曲线到第八个曲线分别为a-g;a_g的浓度分别为:1.13X10—6 mol.L—S 5.56X10—6 mol.L—S 1.13X10—5 mol.L—S I.7 X 10—5 mol.L—1，2.26X10—5 mol.L—^2.83 X 10—5 mol.L—1J.39 X 10—5 mol.L—1 。
[0034]由图6可知:在1.13Χ1θΛιο1.L—1到3.39 X ΙΟΛιοΙ.L—1的线性范围内，电化学发光强度与TSPP的浓度成良好的线性关系，检出限为4.03 X ΙΟΛιοΙ.L—S依据图6得到线性方程:
1=422.95+38.54C，R2=0.998;其中，C代表TSPP的浓度，I代表电化学发光强度。
[0035]实施例7
对未知浓度的TSPP溶液进行浓度检测的方法如下:将TSPP溶液进行一系列1倍比稀释，按照实施例6的方法进行实验，选择发光强度在0-1800范围内的稀释液，将该稀释液的实验结果代入方程，乘以该稀释倍数，得到TSPP溶液的浓度。
[0036]最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种水溶性电化学发光试剂，其特征在于:所述电化学发光试剂为四(4-磺酸基苯基)卟啉。2.根据权利要求1所述的水溶性电化学发光试剂，其特征在于:所述电化学试剂以K2S2O8为共反应剂。3.对权利要求1所述的电化学发光试剂进行定量检测的方法，其特征在于:在三电极体系中，以含有K2S2O8JSPP的磷酸盐缓冲液为溶液，进行电化学发光扫描，并记录信号;将结果代入线性方程:1=422.95+38.54C，得到电化学发光试剂的浓度。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于:所述三电极体系中，工作电极为裸的玻碳电极。5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于:电位设置范围为-0.3到-1.5V。6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于:所述K2S2O8的浓度为0.1mo I/L-0.5 mo I/L ； 作为优选，所述K2S2O8的浓度为0.5mol/L。7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于:所述磷酸盐缓冲液的浓度为lOmmol/L。8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于:所述磷酸盐缓冲液的pH值为7.4。9.根据权利要求3所述的方法，其特征在于:所述电化学发光扫描的扫描速度为0.05-0.5V/so10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于:所述电化学发光扫描的扫描速度为0.1V/So
【专利摘要】本发明公开了一种水溶性电化学发光试剂--四(4-磺酸基苯基)卟啉（TSPP），其在与K2S2O8共存时，具有良好的电化学发光性能。本申请人利用该性能研究了一种定量测定四磺酸基苯基卟啉的方法。该方法具有良好的稳定性和专一性，在1.13×10?6mol·L-1到3.39×10?5mol·L-1的线性范围内，电化学发光强度与TSPP的浓度成良好的线性关系，检出限为4.03×10?7mol·L-1。
【IPC分类】G01N21/76, C07D487/22
【公开号】CN105510309
【申请号】CN201510952369
【发明人】卢小泉, 张静, 王彩荷, 李文奇, 马琴, 严小雨, 何笑, 李洋
【申请人】西北师范大学
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年12月17日