一种卡格列净α、β异构体的分离方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物化学领域，涉及一种卡格列净α、β异构体，具体来说是一种卡格列 净α、β异构体的分离方法。
【背景技术】
[0002] 卡格列净又名坎格列净（Canag 1 i f 1 〇z iη，结构式如下式所示），商品名为 Invokana。化学名为(23,31?，41?，53,61〇-2-(3-((5-(4-氟苯基）噻吩-2-基）甲基)-4-甲基-苯基)-6-(羟甲基）四氢-2H-吡喃-3，4，5-三醇，化学分子式为C 24H25F05S。卡格列净是是由强 生旗下杨森制药公司开发的一种SGLT2抑制剂药物，能将葡萄糖分解后通过肾脏排出体外 的方式来降低血糖水平，临床研究显示卡格列净单独治疗II型糖尿病时具有服用安全，耐 受性好、有明显的减肥效果及良好的血糖控制。
[0003]
[0004] 卡格列净异构体分为α构型和β构型，但只有β构型卡格列净具有药理活性。经合成 得到卡格列净产品中可能存在α构型杂质，影响药品的品质。因此控制 α构型含量对于提高 抗糖尿病类药物质量，保证广大用药者的安全性具有重要的意义。
【发明内容】
[0005] 针对现有技术中的上述技术问题，本发明提供了一种卡格列净α、β异构体的分离 方法，所述的这种卡格列净α、β异构体的分离方法解决了现有技术中的卡格列净产品中存 在α构型杂质，影响药品的品质的技术问题。
[0006] 本发明提供了一种卡格列净α、β异构体的分离方法，采用高效液相色谱仪，
[0007] 以C18柱为色谱柱，以乙腈和水组成的混合液为流动相，采用如下的色谱分
[0008] 离条件进行分离：
[0009] 流动相流速为0.80~1.20mL/min;
[0010] 色谱柱温度为20~40°C;
[0011] 进样量为8~12yL;
[0012] 检测波长为200~254nm;
[0013] 所述流动相按体积比计算，乙腈:水为38~47:53~62。
[0014] 进一步的，上述的一种卡格列净α、β异构体的分离方法的具体步骤为:称取卡格列 净样品，在一个容器中加入乙腈和水组成的流动相，所述流动相按体积比计算，乙腈:水为 43: 57，所述的样品和流动相的质量体积比为20mg: 1 OmL，采用高效液相色谱仪，色谱分离条 件为:流动相流速为1. OOmL/min;色谱柱温度为25°C;进样量为10yL;检测波长为210nm;先 出峰的化合物为卡格列净β异构体，后出峰的化合物为卡格列净α异构体。
[0015] 进一步的，所述的色谱柱为Phenomenex Luna 5μ C18(2) 100Α柱。
[0016] 具体的，色谱柱为Phenomonex Luna 5μ C18(2) 100A 250 X 4 · 6mm柱、Phenomonex Gemini 5yC18 110A 150 X4.6mm柱、DIKMA Diamonsil 5μ C18(2)250X4.6mm柱、Agilent Z0RBAX 300SB-C18 3.5ym 150X4.6mm柱，优选为Phenomonex Luna 5μ C18(2)100A 250X 4 · 6mm 柱。
[0017] 进一步的，所述的流动相流速为1.00mL/min。
[0018]进一步的，色谱柱温度为30°C。
[0019]进一步的，检测波长为210nm。
[0020]进一步的，所述的进样量为10此。
[0021 ] 进一步的，所述流动相按体积比计算，乙腈:水=43:57。
[0022]进一步的，所用的高效液相色谱仪为戴安UltiMate 3000。
[0023]本发明由于采用了高效液相色谱法对卡格列净α、β构型进行分离，能够有效的将 α、β构型在色谱图中完全分离，其分离度可达1.35~3.95,并准确的测出了其光学异构体的 含量，解决了其质量控制问题，确保了最终产品卡格列净的质量，为工业化大生产带来了巨 大的社会意义，具有很强的实用性。
[0024]本发明和已有技术相比，其技术进步是显著的。本发明的方法灵敏度高，分离度良 好，结果准确可靠，适用于卡格列净的光学质量控制。
【附图说明】
[0025]图1为实施例1中卡格列净消旋体样品的色谱分离图，保留时间为15.038min的为β 构型，保留时间为16.733min的为其对应的α构型，两者的分离度为3.62。
[0026]图2为实施例2、3、4中卡格列净消旋体样品的色谱分离图，保留时间为14.808min 的为β构型，保留时间为16.568min的为其对应的α构型，两者的分离度为3.77。
[0027]图3为实施例5中卡格列净单构型的色谱分离图，保留时间为14.773min的为β构 型。
【具体实施方式】
[0028] 下面通过具体实施例子并结合附图对本发明进一步阐述，但并不限制本发明。
[0029] 实施例所用到的仪器的型号及生产厂家的信息如下：
[0030] 戴安（DIONEX)UltiMate 3000,含 UltiMate 3000 Pump, UltiMate 3000 Autosampler,UltiMate 3000 Column Compartment,UltiMate 3000 Photodiode Arrary detector，Chrome 1 eon工作站，美国戴安公司；
[0031 ] Ultra Sonic Cleaner USK Type超声波清洗器；
[0032] 色谱柱：Luna 5μ C18(2)100A 250X4.6mm，广州费罗门科学仪器有限公司； Gemini 5μ C18(2)100A 250X4.6mm，广州费罗门科学仪器有限公司；Z0RBAX 300SB-C18 3·5μπι 150X4.6mm，美国安捷伦有限公司；DIKMA Diamonsil 5μ C18(2)250X4.6mm，北京 迪马科技有限公司。
[0033] 实施例1
[0034] -种卡格列净α、β异构体的高效液相色谱分离方法，其步骤如下:取卡格列净消旋 体标准样品约20mg，置于10mL的容量瓶中，加乙腈-水溶解定容至刻度，作为待测样品溶液； 即采用高效液相色谱仪，以乙腈和水组成的混合液为流动相，采用如下的色谱柱和分离条 件进行分离：
[0035] 色谱柱分别为Phenomonex Luna 5μ C18(2)100A 250X4.6mm柱、Phenomonex Gemini 5yC18 110A 150 X4.6mm柱、DIKMA Diamonsil 5μ C18(2)250X4.6mm柱、Agilent Z0RBAX 300SB-C18 3.5yml50X4.6mi4i;
[0036] 流动相流速为1.0mL/min;
[0037] 色谱柱温度为30°C;
[0038] 进样量为10yL;
[0039] 检测波长为210nm;
[0040] 流动相乙腈:水为43% :57%。
[0041 ] 色谱分离结果如表所示：
[0042]
[0043] 表中以为0构型的保留时间，t2Sa构型保留时间。
[0044] 从上表的结果可以看出，本实施例中色谱柱的型号和生产厂家的不同对色谱峰分 离度有影响。